| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-25页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 1.2 GsZFP1基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 植物C2H2锌指蛋白的结构与功能 | 第14页 |
| 1.2.2 大豆中C2H2锌指蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 锌指蛋白基因GsZFP1的研究进展 | 第15页 |
| 1.3 根癌农杆菌介导基因转化的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.3.1 农杆菌介导的基因转化机理 | 第16-17页 |
| 1.3.2 农杆菌介导基因遗传转化的影响因素 | 第17-18页 |
| 1.3.3 根癌农杆菌介导单子叶植物遗传转化的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 百合遗传转化的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.4.1 百合再生体系的建立 | 第19-21页 |
| 1.4.2 百合抗性研究进展 | 第21页 |
| 1.4.3 百合遗传转化体系的建立 | 第21-23页 |
| 1.5 试验主要研究内容及总体技术路线 | 第23-25页 |
| 1.5.1 试验主要研究内容 | 第23-24页 |
| 1.5.2 试验主要研究技术路线 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第25页 |
| 2.1.3 试验主要仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.4 试验中常用试剂及酶类 | 第26页 |
| 2.1.5 培养基 | 第26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-38页 |
| 2.2.1 质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 质粒DNA的限制性内切酶消化反应 | 第27页 |
| 2.2.3 目的片段电泳回收 | 第27页 |
| 2.2.4 连接反应 | 第27-28页 |
| 2.2.5 大肠杆菌感受态的制备 | 第28页 |
| 2.2.6 大肠杆菌的转化 | 第28-29页 |
| 2.2.7 根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.2.8 冻融法将重组质粒DNA转化根癌农杆菌 | 第29页 |
| 2.2.9 转化菌液的PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.2.10 亚洲百合‘耀眼’高频再生体系的建立 | 第30-31页 |
| 2.2.11 农杆菌介导亚洲百合‘耀眼’遗传转化及抗性植株再生 | 第31-33页 |
| 2.2.12 抗性植株的分子生物学检测 | 第33-34页 |
| 2.2.13 转基因植株耐逆性胁迫处理 | 第34-35页 |
| 2.2.14 生理指标测定方法 | 第35-37页 |
| 2.2.15 百合离体叶片失水速率分析 | 第37页 |
| 2.2.16 气孔形态观察及密度测定方法 | 第37页 |
| 2.2.17 试验数据统计分析方法 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-63页 |
| 3.1 锌指转录因子基因GsZFP1植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 3.2 重组质粒DNA转化根癌农杆菌 | 第40页 |
| 3.3 亚洲百合‘耀眼’高频再生体系的建立 | 第40-49页 |
| 3.3.1 亚洲百合无菌苗的获得 | 第40-41页 |
| 3.3.2 无菌苗鳞片叶不定芽分化的诱导 | 第41-43页 |
| 3.3.3 无菌苗叶片不定芽分化的诱导 | 第43-44页 |
| 3.3.4 无菌苗小鳞茎的诱导 | 第44-46页 |
| 3.3.5 小鳞茎不定芽分化的诱导 | 第46-47页 |
| 3.3.6 无菌苗不定根诱导 | 第47-49页 |
| 3.3.7 无菌苗的驯化和移栽 | 第49页 |
| 3.4 农杆菌介导亚洲百合‘耀眼’遗传转化体系的建立 | 第49-54页 |
| 3.4.1 草丁磷(PPT)筛选浓度的确定 | 第49-51页 |
| 3.4.2 抑菌剂浓度的确定 | 第51-52页 |
| 3.4.3 农杆菌侵染效果的主要影响因素 | 第52-54页 |
| 3.5 转基因植株的分子检测 | 第54-56页 |
| 3.5.1 转基因植株的PCR检测 | 第54-55页 |
| 3.5.2 转基因植株的RT-PCR检测 | 第55-56页 |
| 3.6 转GsZFP1基因百合干旱胁迫分析 | 第56-59页 |
| 3.6.1 转GsZFP1基因百合干旱胁迫处理下表型分析 | 第56-57页 |
| 3.6.2 转GsZFP1基因百合干旱胁迫处理下生理指标分析 | 第57-59页 |
| 3.7 转GsZFP1基因百合耐旱机理研究 | 第59-63页 |
| 3.7.1 GsZFP1基因对百合离体叶片失水速率的调控 | 第59-60页 |
| 3.7.2 转GsZFP1基因百合植株叶片气孔形态观察及密度测定 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 4.1 遗传转化受体材料的选择 | 第63页 |
| 4.2 植株生长调节剂对百合鳞片不定芽分化的影响 | 第63页 |
| 4.3 百合的抗旱性 | 第63-64页 |
| 4.4 抗性植株筛选剂的选择 | 第64页 |
| 4.5 下一步工作展望 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73页 |
