摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-19页 |
一 FtsH 金属蛋白酶 | 第10-12页 |
1 FtsH 的分布及分类 | 第10页 |
2 FtsH 的结构 | 第10-11页 |
3 真核生物中FtsH 的作用机制 | 第11页 |
4 真核生物中FtsH 蛋白酶的生物学功能 | 第11-12页 |
二 植物的逆境胁迫 | 第12-16页 |
1 高温胁迫 | 第12-14页 |
2 低温胁迫 | 第14-16页 |
三 RNAi 技术 | 第16-19页 |
1 RNAi 的定义 | 第16-17页 |
2 RNAi 的分类 | 第17页 |
3 RNAi 的特征 | 第17-18页 |
4 RNAi 的作用机制 | 第18-19页 |
第二部分 材料与方法 | 第19-32页 |
第一章 LeftsH6 对拟南芥抗逆性的影响 | 第19-25页 |
一 实验材料 | 第19-20页 |
1 植物材料 | 第19页 |
2 菌种及质粒 | 第19页 |
3 酶及化学试剂 | 第19页 |
4 主要仪器设备 | 第19-20页 |
5 PCR 所用引物及序列 | 第20页 |
二 实验方法 | 第20-25页 |
1 菌种的保藏 | 第20页 |
2 质粒的提取 | 第20-21页 |
3 质粒的酶切、连接 | 第21页 |
4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第21页 |
5 质粒DNA 转化大肠杆菌感受态 | 第21页 |
6 农杆菌感受态的制备及植物表达载体的农杆菌转化 | 第21-22页 |
7 植物表达载体的构建及农杆菌转化 | 第22页 |
8 花浸染法转化拟南芥 | 第22-23页 |
9 转基因拟南芥的筛选 | 第23-24页 |
10 植物基因组DNA 的小量提取 | 第24页 |
11 转基因拟南芥外源基因的PCR 鉴定 | 第24页 |
12 转基因拟南芥的获得耐热性实验 | 第24-25页 |
13 转基因拟南芥的高温生长实验 | 第25页 |
第二章 Thftsh8 对盐芥抗逆性的影响 | 第25-32页 |
一 实验材料 | 第25-26页 |
1 植物材料 | 第25页 |
2 酶及化学试剂 | 第25-26页 |
3 主要仪器设备 | 第26页 |
二 实验方法 | 第26-32页 |
1 花浸染法转化盐芥 | 第26-27页 |
2 Basta 抗性苗的筛选 | 第27页 |
3 实时荧光定量PCR(Real time PCR) | 第27-30页 |
4 叶绿素含量的测定 | 第30页 |
5 叶绿素荧光参数的测定 | 第30页 |
6 逆境胁迫对ThftsH8-RNAi 株系生长的影响 | 第30-32页 |
第三部分 结果及分析 | 第32-44页 |
一 LeftsH6 对拟南芥抗逆性的影响 | 第32-35页 |
1 植物表达载体的构建 | 第32页 |
2 抗性苗的筛选结果 | 第32-33页 |
3 纯合体的筛选结果 | 第33页 |
4 转基因拟南芥的PCR 检测结果 | 第33-34页 |
5 转基因拟南芥的耐热性实验结果 | 第34-35页 |
6 转基因拟南芥的高温生长实验结果 | 第35页 |
二 ThftsH8 对盐芥抗逆性的影响 | 第35-44页 |
1 植物表达载体的构建、验证 | 第35-36页 |
2 花侵染法转化盐芥 | 第36页 |
3 ThftsH8-RNAi 株系的筛选结果 | 第36页 |
4 实时荧光定量PCR(Real Time PCR)的分析结果 | 第36-38页 |
5 叶绿素含量的测定结果 | 第38页 |
6 叶绿素荧光参数的测定结果 | 第38-39页 |
7 逆境胁迫对ThftsH8-RNAi 株系生长的影响 | 第39-44页 |
第四部分 结论与讨论 | 第44-45页 |
一 LeftsH6 对拟南芥抗逆性的影响 | 第44页 |
二 ThftsH8 对盐芥抗逆性的影响 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |