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苹果树腐烂病菌生长发育相关突变体筛选及侧翼序列分析

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第10-19页
    1.1 苹果树腐烂病的发生及分布第10页
    1.2 苹果树腐烂病的病害特征第10-11页
    1.3 苹果树腐烂病菌的研究进展第11-13页
        1.3.1 病原菌的种类第11-12页
        1.3.2 病原菌的生物学特性第12页
        1.3.3 病原菌的侵染第12-13页
        1.3.4 苹果树腐烂病菌生长发育相关基因的研究第13页
    1.4 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化第13-14页
    1.5 T-DNA 插入突变体库的构建及相关突变体的筛选第14-15页
    1.6 T-DNA 插入位点侧翼序列扩增的研究进展第15-17页
        1.6.1 热不对称交错 PCR第15-17页
        1.6.2 反向 PCR(Inverse PCR)第17页
        1.6.3 质粒拯救法(Plasmid Rescue)第17页
    1.7 本研究的目的和意义第17-19页
第二章 突变体生长发育相关表型的鉴定第19-24页
    2.1 材料与方法第19-20页
        2.1.1 材料第19页
        2.1.2 方法第19-20页
    2.2 结果与分析第20-23页
        2.2.1 突变体菌落形态的观察第20页
        2.2.2 突变体菌落大小的测定第20-22页
        2.2.3 突变体繁殖体的产生情况第22-23页
    2.3 结论与讨论第23-24页
第三章 T-DNA 插入位点侧翼序列的扩增和分析第24-31页
    3.1 实验材料第24页
        3.1.1 菌株第24页
        3.1.2 培养基第24页
        3.1.3 实验试剂第24页
        3.1.4 实验仪器及设备第24页
    3.2 实验方法第24-28页
        3.2.1 DNA 提取(CTAB 法)第24-25页
        3.2.2 琼脂糖凝胶电泳第25页
        3.2.3 热不对称交错 PCR(TAIL-PCR)第25-26页
        3.2.4 Tail-PCR 扩增产物的凝胶回收第26-27页
        3.2.5 DNA 片段连接第27页
        3.2.6 大肠杆菌的转化(热激转化法)第27页
        3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法)第27-28页
        3.2.8 菌落 PCR第28页
        3.2.9 摇菌第28页
        3.2.10 侧翼序列比对与分析第28页
    3.3 结果与分析第28-29页
    3.4 结论与讨论第29-31页
参考文献第31-36页
附录第36-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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