摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 苹果树腐烂病的发生及分布 | 第10页 |
1.2 苹果树腐烂病的病害特征 | 第10-11页 |
1.3 苹果树腐烂病菌的研究进展 | 第11-13页 |
1.3.1 病原菌的种类 | 第11-12页 |
1.3.2 病原菌的生物学特性 | 第12页 |
1.3.3 病原菌的侵染 | 第12-13页 |
1.3.4 苹果树腐烂病菌生长发育相关基因的研究 | 第13页 |
1.4 根癌农杆菌介导的真菌遗传转化 | 第13-14页 |
1.5 T-DNA 插入突变体库的构建及相关突变体的筛选 | 第14-15页 |
1.6 T-DNA 插入位点侧翼序列扩增的研究进展 | 第15-17页 |
1.6.1 热不对称交错 PCR | 第15-17页 |
1.6.2 反向 PCR(Inverse PCR) | 第17页 |
1.6.3 质粒拯救法(Plasmid Rescue) | 第17页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
第二章 突变体生长发育相关表型的鉴定 | 第19-24页 |
2.1 材料与方法 | 第19-20页 |
2.1.1 材料 | 第19页 |
2.1.2 方法 | 第19-20页 |
2.2 结果与分析 | 第20-23页 |
2.2.1 突变体菌落形态的观察 | 第20页 |
2.2.2 突变体菌落大小的测定 | 第20-22页 |
2.2.3 突变体繁殖体的产生情况 | 第22-23页 |
2.3 结论与讨论 | 第23-24页 |
第三章 T-DNA 插入位点侧翼序列的扩增和分析 | 第24-31页 |
3.1 实验材料 | 第24页 |
3.1.1 菌株 | 第24页 |
3.1.2 培养基 | 第24页 |
3.1.3 实验试剂 | 第24页 |
3.1.4 实验仪器及设备 | 第24页 |
3.2 实验方法 | 第24-28页 |
3.2.1 DNA 提取(CTAB 法) | 第24-25页 |
3.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
3.2.3 热不对称交错 PCR(TAIL-PCR) | 第25-26页 |
3.2.4 Tail-PCR 扩增产物的凝胶回收 | 第26-27页 |
3.2.5 DNA 片段连接 | 第27页 |
3.2.6 大肠杆菌的转化(热激转化法) | 第27页 |
3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第27-28页 |
3.2.8 菌落 PCR | 第28页 |
3.2.9 摇菌 | 第28页 |
3.2.10 侧翼序列比对与分析 | 第28页 |
3.3 结果与分析 | 第28-29页 |
3.4 结论与讨论 | 第29-31页 |
参考文献 | 第31-36页 |
附录 | 第36-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
作者简介 | 第46页 |