| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 縮略词表 | 第8-11页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 石栗是具有发展潜力的能源植物 | 第12页 |
| 1.1.2 植物脂肪酸和油脂合成 | 第12-14页 |
| 1.1.3 果实发育过程中种子内含物的积累规律 | 第14页 |
| 1.2 乙酰辅酶A羧化酶的结构与分类 | 第14-15页 |
| 1.3 乙酰辅酶A羧化酶编码基因的结构与特点 | 第15-16页 |
| 1.4 异质型ACCase相关亚基的克隆研究进展 | 第16-19页 |
| 1.4.1 异质型ACCase的表达与调控 | 第16页 |
| 1.4.2 accB、accC基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4.3 同源克隆法结合RACE技术克隆基因的优势 | 第17-19页 |
| 1.5 ACCase在基因工程中的应用 | 第19-21页 |
| 1.5.1 提高藻类油脂含量 | 第19-20页 |
| 1.5.2 提高植物种子的油脂含量 | 第20页 |
| 1.5.3 根据ACCase对化学物质的敏感性筛选除草剂 | 第20-21页 |
| 1.6 半定量RT-PCR技术及Actin基因的作用 | 第21-23页 |
| 1.6.1 半定量RT-PCR技术 | 第21-23页 |
| 1.6.2 Actin编码基因的作用 | 第23页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.8 研究内容 | 第24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-44页 |
| 2.1 试验材料的收集 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-44页 |
| 2.2.1 石栗accB、accC基因全长cDNA序列的克隆 | 第26-42页 |
| 2.2.2 accB、accC基因的半定量RT-PCR分析 | 第42-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-62页 |
| 3.1 石栗嫩叶与种子总RNA的提取 | 第44-45页 |
| 3.2 accB、accC基因简并片段PCR产物电泳检测及测序 | 第45-46页 |
| 3.3 accB、accC基因5'RACE的PCR产物凝胶电泳检测及测序 | 第46-48页 |
| 3.3.1 accB基因5'RACE延伸 | 第46-47页 |
| 3.3.2 accC基因5'RACE的PCR产物电泳检测及测序 | 第47-48页 |
| 3.4 accB、accC基因3'RACE PCR产物电泳检测及测序 | 第48-50页 |
| 3.4.1 accB基因3'RACE PCR产物电泳检测及测序 | 第48-49页 |
| 3.4.2 accC基因3'RACE PCR产物电泳检测及测序 | 第49-50页 |
| 3.5 石栗accB、accC基因全长cDNA序列的生物信息学分析 | 第50-53页 |
| 3.5.1 石栗accB基因核苷酸序列分析 | 第50-51页 |
| 3.5.2 石栗accC基因核苷酸序列分析 | 第51-53页 |
| 3.6 石栗accB、accC基因编码蛋白质结构分析 | 第53-57页 |
| 3.6.1 石栗accB基因编码蛋白质结构分析 | 第53-55页 |
| 3.6.2 石栗accC基因编码蛋白质结构分析 | 第55-57页 |
| 3.7 accB、accC基因的RT-PCR半定量结果分析 | 第57-62页 |
| 3.7.1 accB、accC和内参基因Actin同时扩增的PCR条件优化 | 第57-58页 |
| 3.7.2 RT-PCR半定量循环次数的确定 | 第58-60页 |
| 3.7.3 石栗种子油脂含量的测定与accB、accC基因的半定量RT-PCR结果 | 第60-62页 |
| 4 小结与讨论 | 第62-64页 |
| 4.1 RNA的提取 | 第62-63页 |
| 4.2 石栗accB、accC基因的全长cDNA克隆及序列分析 | 第63页 |
| 4.3 半定量RT-PCR分析石栗accB、accC基因表达变化 | 第63-64页 |
| 5 本文创新点 | 第64页 |
| 6 结论 | 第64-65页 |
| 7 问题与展望 | 第65-66页 |
| 7.1 存在的问题 | 第65页 |
| 7.2 展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74页 |
