摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-20页 |
1.1 组织工程研究概论 | 第11页 |
1.2 组织工程用生物材料 | 第11-15页 |
1.2.1 PLGA 研究概况 | 第12-13页 |
1.2.2 PEG 水凝胶研究概况 | 第13-15页 |
1.3 种子细胞 | 第15页 |
1.4 细胞与材料的相互作用 | 第15-17页 |
1.4.1 材料表面图案化对细胞的影响 | 第16-17页 |
1.5 立题依据与研究目的 | 第17-18页 |
1.6 主要研究内容 | 第18-20页 |
1.6.1 神经原代细胞的分离 | 第18页 |
1.6.2 PLGA 薄膜的制备 | 第18页 |
1.6.3 PLGA 薄膜对神经类细胞生长分化生成的影响 | 第18页 |
1.6.4 PEG 水凝胶的制备 | 第18页 |
1.6.5 PEG 水凝胶对神经类细胞生长分化生成的影响 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-32页 |
2.1 主要仪器和试剂 | 第20-21页 |
2.1.1 主要仪器 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.2 供试细胞株和培养基 | 第21-22页 |
2.2.1 供试细胞株 | 第21页 |
2.2.2 主要试剂及培养基的配置 | 第21-22页 |
2.3 小鼠原代神经元细胞的分离培养及鉴定 | 第22-23页 |
2.3.1 小鼠原代细胞的分离与培养 | 第22-23页 |
2.3.2 神经元细胞的鉴定 | 第23页 |
2.4 IPS 细胞的培养和纯化 | 第23-26页 |
2.4.1 小鼠成纤维细胞的分离培养 | 第23-25页 |
2.4.2 滋养层的制备 | 第25-26页 |
2.4.3 IPS 细胞的传代培养 | 第26页 |
2.4.4 IPS 细胞的纯化 | 第26页 |
2.5 PLGA 的制备 | 第26-27页 |
2.5.1 PLGA 空白膜的制备 | 第26页 |
2.5.2 PLGA 薄膜表面羧基化 | 第26-27页 |
2.5.3 ATR-FTIR 检测 PLGA 表面羧基化 | 第27页 |
2.6 原代神经元在 PLGA 薄膜上的生长情况 | 第27-28页 |
2.6.1 PLGA 表面蛋白接枝 | 第27页 |
2.6.2 PLGA 表面接枝蛋白检测 | 第27-28页 |
2.6.3 PLGA 薄膜的无菌处理 | 第28页 |
2.6.4 PLGA 薄膜接种神经原代细胞 | 第28页 |
2.7 PLGA 薄膜上诱导 PC12 细胞 | 第28-30页 |
2.7.1 MTT 法测 PLGA 表面 PC12 细胞活性 | 第28-29页 |
2.7.2 PLGA 表面接枝不同浓度诱导因子 | 第29页 |
2.7.3 PLGA 表面 PC12 细胞诱导 | 第29页 |
2.7.4 PLGA 表面诱导 PC12 细胞图案化 | 第29-30页 |
2.8 IPS 细胞接种 PLGA 薄膜实验 | 第30页 |
2.9 PEG 水凝胶上对细胞生长分化影响实验 | 第30-32页 |
2.9.1 PEG 水凝胶空白膜的制备 | 第30页 |
2.9.2 PEG 水凝胶的二次接枝 | 第30-31页 |
2.9.3 MTT 法测 PEG 水凝胶上 PC12 细胞的活性 | 第31页 |
2.9.4 PEG 水凝胶表面 IPS 的诱导 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-48页 |
3.1 小鼠原代神经元细胞分离与鉴定结果 | 第32-34页 |
3.1.1 小鼠原代神经元细胞的荧光鉴定结果 | 第32-33页 |
3.1.2 小鼠原代神经元细胞的甲苯胺蓝染色结果 | 第33-34页 |
3.2 IPS 细胞培养纯化的结果 | 第34-37页 |
3.2.1 小鼠成纤维细胞的分离结果 | 第34页 |
3.2.2 IPS 细胞的培养结果 | 第34-35页 |
3.2.3 IPS 细胞纯化的结果与分析 | 第35-37页 |
3.3 PLGA 薄膜对神经类细胞生长和分化生成的影响结果与分析 | 第37-44页 |
3.3.1 ATR-FTIR 检测 PLGA 表面羧基化结果 | 第37-38页 |
3.3.2 PLGA 对神经原代细胞生长的影响结果与分析 | 第38-39页 |
3.3.3 PLGA 对诱导 PC12 细胞成神经细胞影响的结果与分析 | 第39-42页 |
3.3.4 PLGA 表面诱导 PC12 细胞图案化结果 | 第42-43页 |
3.3.5 PLGA 对 IPS 细胞生长影响结果 | 第43-44页 |
3.4 PEG 水凝胶对细胞生长分化影响的结果与分析 | 第44-48页 |
3.4.1 PEG 水凝胶对 PC12 细胞的生长的影响结果与分析 | 第44-45页 |
3.4.2 IPS 细胞在 PEG 水凝胶上诱导分化的结果 | 第45-48页 |
4 结论 | 第48-50页 |
5 讨论与展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |