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生物材料对神经类细胞培养和生长分化的影响

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 引言第10-20页
    1.1 组织工程研究概论第11页
    1.2 组织工程用生物材料第11-15页
        1.2.1 PLGA 研究概况第12-13页
        1.2.2 PEG 水凝胶研究概况第13-15页
    1.3 种子细胞第15页
    1.4 细胞与材料的相互作用第15-17页
        1.4.1 材料表面图案化对细胞的影响第16-17页
    1.5 立题依据与研究目的第17-18页
    1.6 主要研究内容第18-20页
        1.6.1 神经原代细胞的分离第18页
        1.6.2 PLGA 薄膜的制备第18页
        1.6.3 PLGA 薄膜对神经类细胞生长分化生成的影响第18页
        1.6.4 PEG 水凝胶的制备第18页
        1.6.5 PEG 水凝胶对神经类细胞生长分化生成的影响第18-20页
2 材料与方法第20-32页
    2.1 主要仪器和试剂第20-21页
        2.1.1 主要仪器第20页
        2.1.2 主要试剂第20-21页
    2.2 供试细胞株和培养基第21-22页
        2.2.1 供试细胞株第21页
        2.2.2 主要试剂及培养基的配置第21-22页
    2.3 小鼠原代神经元细胞的分离培养及鉴定第22-23页
        2.3.1 小鼠原代细胞的分离与培养第22-23页
        2.3.2 神经元细胞的鉴定第23页
    2.4 IPS 细胞的培养和纯化第23-26页
        2.4.1 小鼠成纤维细胞的分离培养第23-25页
        2.4.2 滋养层的制备第25-26页
        2.4.3 IPS 细胞的传代培养第26页
        2.4.4 IPS 细胞的纯化第26页
    2.5 PLGA 的制备第26-27页
        2.5.1 PLGA 空白膜的制备第26页
        2.5.2 PLGA 薄膜表面羧基化第26-27页
        2.5.3 ATR-FTIR 检测 PLGA 表面羧基化第27页
    2.6 原代神经元在 PLGA 薄膜上的生长情况第27-28页
        2.6.1 PLGA 表面蛋白接枝第27页
        2.6.2 PLGA 表面接枝蛋白检测第27-28页
        2.6.3 PLGA 薄膜的无菌处理第28页
        2.6.4 PLGA 薄膜接种神经原代细胞第28页
    2.7 PLGA 薄膜上诱导 PC12 细胞第28-30页
        2.7.1 MTT 法测 PLGA 表面 PC12 细胞活性第28-29页
        2.7.2 PLGA 表面接枝不同浓度诱导因子第29页
        2.7.3 PLGA 表面 PC12 细胞诱导第29页
        2.7.4 PLGA 表面诱导 PC12 细胞图案化第29-30页
    2.8 IPS 细胞接种 PLGA 薄膜实验第30页
    2.9 PEG 水凝胶上对细胞生长分化影响实验第30-32页
        2.9.1 PEG 水凝胶空白膜的制备第30页
        2.9.2 PEG 水凝胶的二次接枝第30-31页
        2.9.3 MTT 法测 PEG 水凝胶上 PC12 细胞的活性第31页
        2.9.4 PEG 水凝胶表面 IPS 的诱导第31-32页
3 结果与分析第32-48页
    3.1 小鼠原代神经元细胞分离与鉴定结果第32-34页
        3.1.1 小鼠原代神经元细胞的荧光鉴定结果第32-33页
        3.1.2 小鼠原代神经元细胞的甲苯胺蓝染色结果第33-34页
    3.2 IPS 细胞培养纯化的结果第34-37页
        3.2.1 小鼠成纤维细胞的分离结果第34页
        3.2.2 IPS 细胞的培养结果第34-35页
        3.2.3 IPS 细胞纯化的结果与分析第35-37页
    3.3 PLGA 薄膜对神经类细胞生长和分化生成的影响结果与分析第37-44页
        3.3.1 ATR-FTIR 检测 PLGA 表面羧基化结果第37-38页
        3.3.2 PLGA 对神经原代细胞生长的影响结果与分析第38-39页
        3.3.3 PLGA 对诱导 PC12 细胞成神经细胞影响的结果与分析第39-42页
        3.3.4 PLGA 表面诱导 PC12 细胞图案化结果第42-43页
        3.3.5 PLGA 对 IPS 细胞生长影响结果第43-44页
    3.4 PEG 水凝胶对细胞生长分化影响的结果与分析第44-48页
        3.4.1 PEG 水凝胶对 PC12 细胞的生长的影响结果与分析第44-45页
        3.4.2 IPS 细胞在 PEG 水凝胶上诱导分化的结果第45-48页
4 结论第48-50页
5 讨论与展望第50-52页
参考文献第52-56页
致谢第56-57页

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