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OsWR2对水稻角质层的影响及下游基因的筛选

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第12-20页
    1.1 角质层的非气孔性失水与植物耐/抗干旱胁迫第12-13页
    1.2 植物的角质层及其生物合成调控的研究现状第13-15页
        1.2.1 调控角质层生物合成的AP2/EREBP家族基因第13-14页
        1.2.2 调控角质层生物合成的MYB家族基因第14-15页
        1.2.3 调控角质层生物合成的HD-ZIP和bHLH家族基因第15页
    1.3 酵母单杂交技术第15-17页
    1.4 酵母双杂交技术第17-18页
    1.5 研究的目的与意义第18-20页
第2章 OsWR2-RNAi对水稻角质层成分的影响及耐旱性研究第20-25页
    2.1 试验材料第20页
        2.1.1 植物材料第20页
        2.1.2 试剂第20页
    2.2 试验方法第20-21页
        2.2.1 水稻叶片表皮蜡质提取和蜡质总量、组成成分分析第20-21页
        2.2.2 水稻叶片角质单体组分含量分析第21页
        2.2.3 材料种植及幼苗干旱处理第21页
        2.2.4 数据统计分析第21页
    2.3 结果与分析第21-23页
        2.3.1 OsWR2-RNAi水稻叶片蜡质组分及含量变化第21-22页
        2.3.2 OsWR2-RNAi水稻叶片角质单体组分和含量变化第22-23页
        2.3.3 OsWR2-RNAi转基因水稻幼苗对干旱胁迫不耐受第23页
    2.4 本章小结与讨论第23-25页
第3章 OsWR2下游基因的筛选和验证第25-41页
    3.1 实验材料第25-27页
        3.1.1 材料第25页
        3.1.2 菌种第25页
        3.1.3 载体第25-26页
        3.1.4 主要试剂第26页
        3.1.5 实验仪器第26页
        3.1.6 培养基配制第26-27页
        3.1.7 主要溶液的配制第27页
    3.2 方法第27-34页
        3.2.1 生物信息学分析第27页
        3.2.2 引物设计第27-28页
        3.2.3 诱饵载体和结合蛋白载体的构建第28-31页
        3.2.4 诱饵酵母的获得第31-33页
        3.2.5 酵母诱饵报告子的AbAr本底表达水平的检测第33页
        3.2.6 酵母单杂交验证实验第33-34页
    3.3 结果与分析第34-41页
        3.3.1 启动子序列分析结果第34-35页
        3.3.2 诱饵质粒和结合蛋白质粒的构建与鉴定第35-36页
        3.3.3 诱饵酵母菌阳性克隆的鉴定第36-37页
        3.3.4 诱饵酵母菌AbAr本底浓度的筛选第37-39页
        3.3.5 转录因子OsWR2与启动子pOsGL1-2和pOsGL1-3DNA片段相互作用的确定第39-41页
第4章 OsWR2与OsGL1-2启动子片段结合位点的筛选第41-46页
    4.1 材料第41页
    4.2 方法第41-42页
        4.2.1 生物信息学分析第41页
        4.2.2 诱饵酵母菌Y1H[pOsGL1-2(GCC)-AbAi]的获得第41-42页
        4.2.3 诱饵酵母菌Y1H[pOsGL1-2(GCC)-AbAi]本底浓度筛选第42页
        4.2.4 酵母单杂交验证实验第42页
    4.3 结果分析第42-44页
        4.3.1 pOsGL1-2(GCC-box)诱饵序列的获得第42-43页
        4.3.2 诱饵酵母菌的鉴定第43页
        4.3.3 诱饵酵母菌AbAr本底浓度的确定第43-44页
        4.3.4 酵母单杂交验证第44页
    4.4 小结与讨论第44-46页
第5章 转录因子OsWR2毒性检测及自激活检测第46-55页
    5.1 实验材料第46-48页
        5.1.1 材料第46页
        5.1.2 菌种第46页
        5.1.3 载体第46-47页
        5.1.4 主要试剂第47页
        5.1.5 实验仪器第47页
        5.1.6 主要溶剂的配制第47页
        5.1.7 培养基第47-48页
        5.1.8 技术路线第48页
    5.2 试验方法第48-50页
        5.2.1 生物信息学分析与引物设计第48-49页
        5.2.2 诱饵表达载体pGBKT7-Bait的构建第49页
        5.2.3 重组诱饵酵母的获得第49-50页
        5.2.4 诱饵酵母的毒性检测第50页
        5.2.5 重组质粒的自激活检测第50页
    5.3 结果与分析第50-54页
        5.3.1 OsWR2生物信息学分析结果第50页
        5.3.2 pGBKT7-Bait诱饵表达载体的构建与鉴定第50-51页
        5.3.3 重组诱饵酵母菌阳性克隆的鉴定及毒性检测第51-52页
        5.3.4 诱饵酵母菌自激活检测第52-54页
    5.4 本章小结与讨论第54-55页
第6章 讨论及下一步工作计划第55-58页
参考文献第58-66页
附录第66-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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