| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1. 几种主要的猪病病原 | 第11-15页 |
| 1.1. 猪伪狂犬病毒 | 第11页 |
| 1.2. 猪瘟病毒 | 第11-12页 |
| 1.3. 非洲猪瘟病毒 | 第12页 |
| 1.4. 猪繁殖与呼吸综合征 | 第12-13页 |
| 1.5. 副猪嗜血杆菌 | 第13页 |
| 1.6. 猪多杀性巴氏杆菌病 | 第13-14页 |
| 1.7. 胸膜肺炎放线杆菌 | 第14-15页 |
| 2. 基于凝胶电泳的多重PCR技术 | 第15页 |
| 2.1. 凝胶电泳多重PCR技术在病原微生物检测中的应用 | 第15页 |
| 2.2. 凝胶电泳多重PCR技术的现状与局限 | 第15页 |
| 3. 毛细管电泳技术 | 第15-21页 |
| 3.1. 毛细管电泳简介 | 第15-17页 |
| 3.2. 毛细管电泳技术的主要特点 | 第17页 |
| 3.3. 毛细管电泳的应用 | 第17-19页 |
| 3.4. 毛细管电泳的局限,优势以及未来展望 | 第19-21页 |
| 第二章 基于普通凝胶电泳的7重猪病病原PCR检测方法的建立 | 第21-40页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-31页 |
| 1.1. 病毒与细菌样品 | 第22页 |
| 1.2. 主要试剂 | 第22页 |
| 1.3. 主要仪器 | 第22-23页 |
| 1.4. 主要溶液与培养基配制 | 第23页 |
| 1.5. 引物设计 | 第23-24页 |
| 1.6. 核酸提取 | 第24-25页 |
| 1.7. 反转录 | 第25-26页 |
| 1.8. 感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 1.9. PCR的扩增 | 第27页 |
| 1.10. DNA纯化回收 | 第27-28页 |
| 1.11. 连接转化制备标准品以及测序验证 | 第28页 |
| 1.12. 质粒提取 | 第28-29页 |
| 1.13. 多重PCR退火温度的优化 | 第29页 |
| 1.14. 灵敏性试验 | 第29页 |
| 1.15. 特异性检测 | 第29-30页 |
| 1.16. 临床样品的检测 | 第30-31页 |
| 2. 结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.1. PCR的扩增与测序鉴定 | 第31页 |
| 2.2. 多重PCR反应条件的优化 | 第31-32页 |
| 2.3. 敏感性试验 | 第32-33页 |
| 2.4. 特异性检测 | 第33-35页 |
| 2.5. 临床样品的初步应用 | 第35-37页 |
| 3. 讨论 | 第37-39页 |
| 4. 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 基于毛细管电泳技术的7重猪疫病病原多重PCR检测方法的建立 | 第40-66页 |
| 1. 材料和方法 | 第41-49页 |
| 1.1. 主要试剂 | 第41页 |
| 1.2. 主要仪器 | 第41页 |
| 1.3. 所用病毒、细菌毒株与临床样本 | 第41-43页 |
| 1.4. 引物设计 | 第43-44页 |
| 1.5. 核酸提取与反转录 | 第44页 |
| 1.6. 毛细管电泳系统的准备、校正与样品分析 | 第44-45页 |
| 1.7. 特异性嵌合引物单重PCR的验证与标准品制备 | 第45页 |
| 1.8. 毛细管电泳的单重PCR试验 | 第45-46页 |
| 1.9. 毛细管电泳多重PCR退火温度的优化 | 第46-47页 |
| 1.10. 毛细管电泳多重PCR灵敏性试验 | 第47-48页 |
| 1.11. 毛细管电泳多重PCR特异性试验 | 第48页 |
| 1.12. 毛细管电泳多重PCR重复性试验 | 第48页 |
| 1.13. 毛细管电泳多重PCR临床样品的验证 | 第48-49页 |
| 2. 结果与分析 | 第49-62页 |
| 2.1. 特异性嵌合引物单重PCR的验证 | 第49页 |
| 2.2. 毛细管电泳的单重PCR试验结果 | 第49-53页 |
| 2.3. 毛细管电泳多重PCR的退火温度优化结果 | 第53-55页 |
| 2.4. 毛细管电泳多重PCR的灵敏性试验结果 | 第55-56页 |
| 2.5. 毛细管电泳多重PCR的特异性试验结果 | 第56-59页 |
| 2.6. 毛细管电泳多重PCR的重复性试验 | 第59-61页 |
| 2.7. 毛细管电泳多重PCR的临床样品验证结果 | 第61-62页 |
| 3. 讨论 | 第62-65页 |
| 4. 结论 | 第65-66页 |
| 全文总结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介及其攻读硕士学位期间学术论文发表情况 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77页 |
