| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 用黄瓜PAPP2C启动子表达拟南芥广谱抗病蛋白RPW8.1初探 | 第14-55页 |
| 1 文献综述 | 第14-21页 |
| 1.1 黄瓜白粉病 | 第14-17页 |
| 1.1.1 黄瓜白粉病病原菌 | 第14页 |
| 1.1.2 黄瓜白粉病抗性基因 | 第14-16页 |
| 1.1.3 黄瓜白粉病的防治 | 第16-17页 |
| 1.2 植物先天免疫反应 | 第17页 |
| 1.3 RPW8的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 黄瓜遗传转化的相关研究 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 药品与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 培养基、抗生素及植物激素 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 黄瓜PAPP2C基因转录水平分析 | 第23-26页 |
| 2.2.1.1 假单孢杆菌DC3000及DC3000-HrcC菌株的准备及喷菌 | 第23-24页 |
| 2.2.1.2 黄瓜白粉菌的准备及接菌 | 第24页 |
| 2.2.1.3 取样 | 第24页 |
| 2.2.1.4 黄瓜RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.1.5 黄瓜RNA反转录cDNA的获取 | 第24-25页 |
| 2.2.1.6 黄瓜PAPP2C基因的实时定量qRT-PCR | 第25-26页 |
| 2.2.2 黄瓜PAPP2C启动子功能区域分析 | 第26-31页 |
| 2.2.2.1 启动子报告基因载体pCsPP10CY的构建 | 第26-30页 |
| 2.2.2.2 验证启动子功能片段 | 第30-31页 |
| 2.2.3 黄瓜PAPP2C启动子启动RPW8.1在烟草中瞬时表达分析 | 第31-32页 |
| 2.2.3.1 黄瓜PAPP2C启动子启动RPW8.1的表达载体P_2CsPR81Y的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 P_2CsPR81Y在烟草中表达 | 第32页 |
| 2.2.4 农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系的建立 | 第32-38页 |
| 2.2.4.1 黄瓜再生体系的建立 | 第32-35页 |
| 2.2.4.2 农杆菌介导的遗传转化体系的建立 | 第35-38页 |
| 3 结果与讨论 | 第38-53页 |
| 3.1 黄瓜PAPP2C基因转录水平分析 | 第38-41页 |
| 3.1.1 DC3000菌株处理后的转录分析 | 第38-39页 |
| 3.1.2 DC3000-HrcC菌株处理后的转录分析 | 第39页 |
| 3.1.3 白粉菌处理后的转录分析 | 第39-41页 |
| 3.2 黄瓜PAPP2C启动子功能区域分析 | 第41-45页 |
| 3.2.1 启动子报告基因载体pCsPP10CY的构建 | 第41-43页 |
| 3.2.1.1 载体P_2YFPB_3P_(10)酶切 | 第41页 |
| 3.2.1.2 CsPP2C启动子序列的扩增 | 第41-42页 |
| 3.2.1.3 黄瓜启动子片段的酶切 | 第42页 |
| 3.2.1.4 筛选阳性克隆 | 第42-43页 |
| 3.2.2 eYFP基因连入启动子报告基因载体pCsPP1OCY1,pCsPP10CY2 | 第43-45页 |
| 3.2.2.1 eYFP基因扩增 | 第43-44页 |
| 3.2.2.2 载体pCsPP1OCY1、pCsPP10CY2酶切 | 第44页 |
| 3.2.2.3 筛选阳性克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.3 在烟草中验证启动子功能片段 | 第45页 |
| 3.3 黄瓜PAPP2C启动子在烟草中启动广谱抗病基因RPW8.1 | 第45-48页 |
| 3.3.1 P_2CsPR81Y表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.3.1.1 RPW8.1的扩增 | 第45-46页 |
| 3.3.1.2 载体pCsPP10CY2-eYFP的酶切 | 第46页 |
| 3.3.1.3 重组质粒的筛选鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2.2 表达载体在烟草中表达 | 第47-48页 |
| 3.4 农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系的建立 | 第48-53页 |
| 3.4.1 黄瓜再生体系的建立 | 第48-50页 |
| 3.4.1.1 种子处理方法 | 第48-49页 |
| 3.4.1.2 芽诱导浓度的确定 | 第49-50页 |
| 3.4.1.3 芽伸长培养基的确定 | 第50页 |
| 3.4.2 农杆菌介导的遗传转化体系的建立 | 第50-51页 |
| 3.4.2.1 菌体浓度对转化的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.3 抗生素选择压的筛选 | 第51-52页 |
| 3.4.3.1 卡那霉素的选择压筛选 | 第51-52页 |
| 3.4.3.2 除菌抗生素的选择 | 第52页 |
| 3.4.4 农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系 | 第52-53页 |
| 4 讨论与展望 | 第53-55页 |
| 70%嘧菌脂·烯酰吗啉水分散粒剂防治黄瓜霜霉病农药田间药效试验 | 第55-67页 |
| 1 文献综述 | 第55-58页 |
| 1.1 黄瓜霜霉病 | 第55-56页 |
| 1.1.1 黄瓜霜霉病的发生与危害 | 第55页 |
| 1.1.2 病原菌的特性 | 第55-56页 |
| 1.1.3 黄瓜霜霉病的流行规律 | 第56页 |
| 1.2 黄瓜霜霉病的抗性研究进展 | 第56页 |
| 1.3 黄瓜霜霉病的防治方法 | 第56-58页 |
| 1.3.1 防治方法 | 第56-57页 |
| 1.3.2 黄瓜霜霉病用药历史 | 第57页 |
| 1.3.3 药剂的选择 | 第57-58页 |
| 1.4 试验目的 | 第58页 |
| 2 材料与方法 | 第58-62页 |
| 2.1 试验材料与条件 | 第58-59页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第58页 |
| 2.1.2 作物栽培及环境条件 | 第58-59页 |
| 2.2 试验设计 | 第59-60页 |
| 2.2.1 药剂 | 第59页 |
| 2.2.1.1 试验药剂 | 第59页 |
| 2.2.1.2 对照药剂 | 第59页 |
| 2.2.1.3 药剂用量与处理编号 | 第59页 |
| 2.2.2 小区安排 | 第59-60页 |
| 2.2.2.1 小区排列 | 第59-60页 |
| 2.2.2.2 小区面积和重复 | 第60页 |
| 2.2.3 施药方法 | 第60页 |
| 2.2.3.1 使用方法 | 第60页 |
| 2.2.3.2 施药器械 | 第60页 |
| 2.2.3.3 施药时间和次数 | 第60页 |
| 2.2.3.4 使用容量 | 第60页 |
| 2.2.3.5 防治其他病虫害的药剂资料 | 第60页 |
| 2.3 试验测定及方法 | 第60-62页 |
| 2.3.1 气象及土壤资料 | 第60页 |
| 2.3.1.1 气象资料 | 第60页 |
| 2.3.1.2 土壤资料 | 第60页 |
| 2.3.2 调查方法、时间和次数 | 第60-61页 |
| 2.3.2.1 调查时间和次数 | 第60页 |
| 2.3.2.2 调查方法 | 第60-61页 |
| 2.3.2.3 药效计算方法 | 第61页 |
| 2.3.3 对作物的直接影响 | 第61页 |
| 2.3.4 产品的产量和质量 | 第61页 |
| 2.3.5 对其他生物影响 | 第61-62页 |
| 2.3.5.1 对其他病虫害的影响 | 第61页 |
| 2.3.5.2 对其他非靶标生物的影响 | 第61-62页 |
| 3 结果与讨论 | 第62-65页 |
| 3.1 病斑调查结果 | 第62-63页 |
| 3.2 施药当地气象情况 | 第63-64页 |
| 3.3 实验结果 | 第64-65页 |
| 4 讨论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第79页 |
