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人诱导多能干细胞(iPS cells)微流控芯片培养体系的建立

中文摘要第11-12页
Abstract第12页
縮略字表第13-14页
第一章 引言第14-26页
    1.1 微流控芯片的研究进展第14-17页
        1.1.1 微流控芯片的简介第14页
        1.1.2 微流控芯片的特点第14-16页
        1.1.3 微流控芯片在医药研究领域的应用第16-17页
    1.2 干细胞的生物学特性,培养系统及研究进展第17-19页
        1.2.1 干细胞的生物学特性第17-18页
        1.2.2 干细胞的培养系统第18页
        1.2.3 干细胞的研究进展第18-19页
    1.3 诱导多能干细胞的生物学特性,分化研究及鉴定第19-23页
        1.3.1 诱导多能干细胞生物学特性及分化研究第19-22页
        1.3.2 诱导多能干细胞的鉴定第22-23页
    1.4 微流控芯片在干细胞研究中的应用第23-24页
    1.5 pH对细胞生命活动影响的简介第24页
    1.6 本论文的研究内容和意义第24-26页
第二章 材料和方法第26-37页
    2.1 实验材料、试剂和仪器第26-28页
        2.1.1 实验材料第26页
        2.1.2 实验试剂第26-27页
        2.1.3 实验仪器第27-28页
    2.2 实验方法第28-37页
        2.2.1 小鼠胚胎成纤维细胞的体外分离与原代培养第28-29页
        2.2.2 小鼠胚胎成纤维细胞的传代培养第29页
        2.2.3 小鼠胚胎成纤维细胞的冻存与复苏第29-30页
        2.2.4 饲养层细胞的制备第30页
        2.2.5 人诱导多能干细胞的传代培养第30-31页
        2.2.6 人诱导多能干细胞的冻存与复苏第31-32页
        2.2.7 人诱导多能干细胞的无饲养层培养第32页
        2.2.8 碱性磷酸酶染色鉴定第32页
        2.2.9 微流控芯片的设计和制作第32-35页
        2.2.10 微流控芯片中小鼠胚胎成纤维细胞的培养与观察第35页
        2.2.11 微流控芯片中人诱导多能干细胞的培养与观察第35-36页
        2.2.12 微流控芯片中pH对FDA进入细胞的影响第36-37页
第三章 实验结果第37-58页
    3.1 小鼠胚胎成纤维细胞的培养及饲养层细胞的制备第37-41页
        3.1.1 小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养和传代培养第37-38页
        3.1.2 饲养层细胞的制备第38-41页
    3.2 人诱导多能干细胞的体外培养与鉴定第41-45页
        3.2.1 人诱导多能干细胞的复苏及传代培养第41-43页
        3.2.2 人诱导多能干细胞的无饲养层培养第43-44页
        3.2.3 碱性磷酸酶染色鉴定第44-45页
    3.3 微流控芯片的设计与制作第45-50页
    3.4 微流控芯片中细胞的培养第50-53页
        3.4.1 PDMS-玻璃微流控芯片中小鼠胚胎成纤维细胞的培养与观察第50-51页
        3.4.2 PDMS-玻璃微流控芯片中人诱导多能干细胞的培养与观察第51-53页
    3.5 微流控芯片中pH对FDA进入细胞的影响第53-58页
第四章 讨论第58-66页
    4.1 小鼠胚胎成纤维细胞的培养及饲养层细胞的制备第58-59页
        4.1.1 胎龄和酶消化时间对小鼠胚胎成纤维细胞分离培养的影响第58页
        4.1.2 细胞代数和丝裂霉素C浓度及处理时间对饲养层细胞质量的影响第58-59页
    4.2 人诱导多能干细胞的体外培养与鉴定第59-61页
        4.2.1 胶原酶、克隆传代大小及细胞密度对人iPS细胞传代的影响第59-60页
        4.2.2 克隆大小和密度对人iPS细胞复苏的影响第60-61页
    4.3 微流控芯片的设计与制作第61-62页
        4.3.1 芯片材料对人iPS细胞在微流控芯片中生长的影响第61页
        4.3.2 通道结构对人iPS细胞在微流控芯片中生长的影响第61页
        4.3.3 芯片封接方式对人iPS细胞在微流控芯片中生长的影响第61-62页
    4.4 微流控芯片中细胞的培养第62-63页
        4.4.1 PDMS-玻璃微流控芯片中小鼠胚胎成纤维细胞的培养与观察第62页
        4.4.2 PDMS-玻璃微流控芯片中人诱导多能干细胞的培养与观察第62-63页
    4.5 微流控芯片中pH对二乙酸荧光素(FDA)进入细胞的影响第63-66页
第五章 总结与展望第66-68页
参考文献第68-74页
致谢第74页

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