| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 黄姑鱼简介及其性别相关研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 鱼类性别相关分子标记的开发及应用 | 第12-15页 |
| 1.2.1 微卫星分子标记 | 第12-13页 |
| 1.2.2 随机扩增多态性DNA分子标记 | 第13页 |
| 1.2.3 扩增片段长度多态性分子标记 | 第13-14页 |
| 1.2.4 单核苷酸多态性及插入缺失分子标记 | 第14-15页 |
| 1.3 鱼类性别决定与分化的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 鱼类性别相关基因的研究概况 | 第16-20页 |
| 1.4.1 Dmrt1基因 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Gsdf基因 | 第17-18页 |
| 1.4.3 Amh基因 | 第18-19页 |
| 1.4.4 AmhrⅡ基因 | 第19页 |
| 1.4.5 Sox家族基因 | 第19-20页 |
| 1.4.6 Sdy基因 | 第20页 |
| 1.5 鱼类性别决定分子机制及调控网络的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 第2章 黄姑鱼性别特异分子标记的开发与验证 | 第23-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 引物 | 第24页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.5 常用溶液试剂及培养基配制 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 性别特异分子标记的筛选 | 第27-29页 |
| 2.2.3 性别特异引物的设计 | 第29页 |
| 2.2.4 PCR检测及遗传性别的鉴定 | 第29页 |
| 2.3 结果 | 第29-35页 |
| 2.3.1 基因组DNA质量检测 | 第29-30页 |
| 2.3.2 黄姑鱼X和Y染色体上Dmrt1基因1号内含子的结构比较 | 第30-31页 |
| 2.3.3 性别特异引物的设计结果 | 第31-33页 |
| 2.3.4 黄姑鱼养殖群体和野生群体的遗传性别鉴定结果 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 黄姑鱼Dmrt1基因的克隆与表达分析 | 第37-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第37-38页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 引物 | 第38页 |
| 3.1.4 仪器设备 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 基因组DNA提取 | 第39页 |
| 3.2.2 黄姑鱼不同发育阶段个体遗传性别鉴定 | 第39页 |
| 3.2.3 总RNA提取 | 第39-40页 |
| 3.2.4 cDNA第一条合成及检测 | 第40-41页 |
| 3.2.5 5 ’和3’RACE扩增 | 第41-42页 |
| 3.2.6 Dmrt1基因开放阅读框扩增 | 第42页 |
| 3.2.7 Dmrt1基因序列的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 3.2.8 Dmrt1基因实时荧光定量PCR检测 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-54页 |
| 3.3.1 黄姑鱼鱼苗遗传性别鉴定的结果 | 第43-44页 |
| 3.3.2 总RNA提取结果 | 第44页 |
| 3.3.3 Dmrt1基因5’UTR和3’UTR扩增结果 | 第44-45页 |
| 3.3.4 Dmrt1基因生物信息学分析结果 | 第45-52页 |
| 3.3.5 Dmrt1基因在不同组织中的表达情况 | 第52-53页 |
| 3.3.6 Dmrt1基因在不同发育时期性腺中的表达情况 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第4章 黄姑鱼gsdf基因的克隆与表达分析 | 第56-65页 |
| 4.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.1 实验样品和试剂 | 第56页 |
| 4.1.2 引物 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 4.3 结果 | 第57-63页 |
| 4.3.1 Gsdf基因结构的生物信息学分析结果 | 第57-61页 |
| 4.3.2 Gsdf基因在不同组织中的表达情况 | 第61-62页 |
| 4.3.3 Gsdf基因在不同发育时期性腺中的表达情况 | 第62-63页 |
| 4.4 讨论 | 第63-65页 |
| 第5章 黄姑鱼Amh基因的克隆与表达分析 | 第65-75页 |
| 5.1 实验材料 | 第65页 |
| 5.1.1 实验样品和试剂 | 第65页 |
| 5.1.2 引物 | 第65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65-66页 |
| 5.3 结果 | 第66-73页 |
| 5.3.1 Amh基因生物信息学分析结果 | 第66-71页 |
| 5.3.2 Amh基因在不同组织中的表达情况 | 第71-72页 |
| 5.3.3 Amh基因在不同发育时期性腺中的表达情况 | 第72-73页 |
| 5.4 讨论 | 第73-75页 |
| 第6章 Dmrt1、Gsdf和Amh表达情况的比较 | 第75-79页 |
| 6.1 实验材料 | 第75页 |
| 6.2 实验方法 | 第75页 |
| 6.3 结果 | 第75-77页 |
| 6.4 讨论 | 第77-79页 |
| 第7章 结论与展望 | 第79-81页 |
| 7.1 研究结论 | 第79页 |
| 7.2 创新点 | 第79页 |
| 7.3 展望 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 在校期间的科研成果 | 第90页 |
