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俞募配伍治疗功能性便秘大鼠结肠—海马差异基因表达研究

中文摘要第7-12页
ABSTRACT第12-18页
中英文缩略词表第19-21页
引言第21-31页
    1. 选题背景第21-24页
        1.1 针刺调节肠运动疗效肯定,俞募配伍效应机制有待进一步清晰第22-23页
        1.2 转录组测序技术为探索针刺效应的调控机制提供了崭新平台第23-24页
    2. 研究内容第24-26页
        2.1 功能性便秘大鼠结肠、海马组织形态学观察第24-25页
        2.2 俞募配穴治疗功能性便秘大鼠肠道运动效应的研究第25页
        2.3 俞募配穴治疗功能性便秘大鼠肠道组织差异基因功能研究第25页
        2.4 俞募配穴治疗功能性便秘大鼠海马组织差异基因功能研究与验证第25-26页
    3. 技术路线第26-27页
    参考文献第27-31页
实验一 功能性便秘大鼠结肠、海马组织形态学观察第31-42页
    1. 材料第31-34页
        1.1 实验动物第31页
        1.2 主要仪器和设备第31-32页
        1.3 主要试剂第32-33页
        1.4 常用试剂及溶液配制第33-34页
    2. 方法第34-39页
        2.1 技术路线第34-35页
        2.2 动物饲养环境第35页
        2.3 动物分组第35页
        2.4 模型制备第35页
        2.5 模型成功判定第35页
        2.6 干预措施第35-36页
        2.7 取材第36页
        2.8 观察指标第36-39页
        2.9 数据处理及统计学分析第39页
    3. 结果第39-42页
        3.1 功能性便秘大鼠模型复制情况第39页
        3.2 一般状况观察第39-40页
        3.3 远端结肠组织形态学观察第40页
        3.4 海马组织形态学观察第40页
        3.5 海马组织BDNF免疫组化检测第40-42页
实验二 俞募配穴治疗功能性便秘大鼠肠道运动效应研究第42-49页
    1. 材料第42-43页
        1.1 实验动物第42页
        1.2 主要器材与设备第42页
        1.3 主要试剂第42-43页
        1.4 常用试剂及溶液配制第43页
    2. 方法第43-46页
        2.1 技术路线第43页
        2.2 动物饲养环境第43页
        2.3 动物分组第43-44页
        2.4 模型制备第44页
        2.5 模型成功判定第44页
        2.6 干预措施第44-45页
        2.7 观察指标第45页
        2.8 数据处理及统计学分析第45-46页
    3. 结果第46-49页
        3.1 模型复制情况及分组第46页
        3.2 一般状况观察第46页
        3.3 俞募配穴对功能性便秘大鼠排便效应的观测第46-49页
实验三 俞募配穴治疗FC大鼠结肠组织差异基因表达分析第49-98页
    1. 材料第49-50页
        1.1 实验动物第49页
        1.2 主要仪器和设备第49-50页
        1.3 主要试剂第50页
    2. 实验方法第50-60页
        2.1 技术路线第50页
        2.2 动物饲养环境第50-51页
        2.3 动物分组第51页
        2.4 模型制备第51页
        2.5 模型成功判定第51页
        2.6 干预措施第51页
        2.7 取材第51页
        2.8 数字基因表达谱分析第51-54页
        2.9 信息分析第54-60页
    3. 结果第60-98页
        3.1 模型复制情况及分组第60页
        3.2 结肠组织Total RNA质检结果第60页
        3.3 参考序列比对统计第60-62页
        3.4 Reads质量评估第62-64页
        3.5 测序饱和度分析第64-65页
        3.6 基因定量分析第65-66页
        3.7 差异基因表达统计分析第66-73页
        3.8 差异基因GO功能注释及显著性富集分析第73-87页
        3.9 差异基因Pathway显著性富集分析第87-98页
实验四 俞募配穴治疗FC大鼠海马组织差异基因表达分析第98-134页
    1. 材料第98页
        1.1 实验动物第98页
        1.2 主要仪器和设备第98页
        1.3 主要试剂第98页
    2. 实验方法第98-101页
        2.1 技术路线第98页
        2.2 动物饲养环境第98-99页
        2.3 动物分组第99页
        2.4 功能性便秘大鼠模型制备第99页
        2.5 模型成功判定第99页
        2.6 干预措施第99页
        2.7 取材第99页
        2.8 数字基因表达谱分析第99-100页
        2.9 信息分析第100-101页
    3. 结果第101-134页
        3.1 海马组织Total RNA质检结果第101页
        3.2 参考序列比对统计第101-103页
        3.3 Reads质量评估第103-105页
        3.4 测序饱和度分析第105-106页
        3.5 基因定量分析第106-107页
        3.6 差异基因表达统计分析第107-115页
        3.7 差异基因GO功能注释及显著性富集分析第115-129页
        3.8 差异基因Pathway显著性富集分析第129-134页
实验五俞募 穴治疗FC大鼠海马组织差异基因qRT-PCR验证第134-142页
    1. 材料第134-135页
        1.1 实验动物第134页
        1.2 主要仪器和设备第134页
        1.3 主要试剂第134-135页
    2. 实验方法第135-138页
        2.1 检测样本第135页
        2.2 总RNA提取第135页
        2.3 总RNA反转录第135-136页
        2.4 实时荧光定量PCR第136-137页
        2.5 数据分析第137-138页
    3. 结果第138-142页
        3.1 Igf2、Enpp2、Igfbp2、KI、Ptgds及β-actin的qRT-PCR相对标准曲线、扩增曲线、溶解峰第138-140页
        3.2 Igf2、Enpp2、Igfbp2、KI、Ptgds的mRNA相对表达量第140-142页
讨论第142-152页
    1. FC疾病概念认识及动物模型建立第142-143页
    2. 大肠俞募穴临床效应特点分析第143页
    3. RNA-Seq (Quantification)方法选用依据第143-144页
    4. Reads数据分析与序列比对第144-145页
    5. 功能性便秘模型大鼠海马BDNF及其mRNA水平分析第145页
    6. 功能性便秘大鼠结肠组织差异基因功能分析第145-146页
    7. 俞募配伍对功能性便秘大鼠结肠位点差异基因功能分析第146-147页
    8. 功能性便秘大鼠海马组织差异基因功能分析第147-149页
    9. 俞募配伍效应在便秘大鼠海马组织中差异基因功能分析第149-152页
本研究的创新点第152-153页
问题与展望第153-154页
致谢第154-155页
参考文献第155-163页
附件一第163-166页
附件二第166-169页
综述 应用GRADE系统对针灸治疗功能性便秘系统评价的再评价第169-182页
    参考文献第179-182页
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果第182-183页

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