| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 IDA研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 IDA与脱落的研究 | 第10-12页 |
| 1.1.2 IDA与侧根发育的研究 | 第12-13页 |
| 1.1.3 IDA与生长素的相关研究 | 第13-14页 |
| 1.2 番茄花粉发育研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 番茄花粉发育过程 | 第14页 |
| 1.2.2 番茄花粉发育相关基因 | 第14-15页 |
| 1.3 活性氧相关研究 | 第15-17页 |
| 1.3.1 活性氧的产生机制 | 第15-16页 |
| 1.3.2 活性氧的清除机制 | 第16页 |
| 1.3.3 花发育过程中活性氧相关研究 | 第16-17页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-29页 |
| 2.2.1 番茄SlIDA基因启动子的克隆 | 第18-20页 |
| 2.2.2 番茄SlIDA基因启动子SlIDA::GUS表达载体的构建 | 第20-22页 |
| 2.2.3 番茄ProIDA::GUS遗传转化体系的建立 | 第22-23页 |
| 2.2.4 ProIDA::GUS转基因植株的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.5 筛选T5代SlIDA沉默转基因植株 | 第24-25页 |
| 2.2.6 qRT-PCR分析番茄SlIDA的时空表达 | 第25-26页 |
| 2.2.7 扫描电镜(SEM)观察花粉形态 | 第26页 |
| 2.2.8 I2-KI染色法检测花粉活力 | 第26页 |
| 2.2.9 FDA染色检测花粉活力 | 第26页 |
| 2.2.10 花粉管萌发检测 | 第26-27页 |
| 2.2.11 花粉管萌发速度检测 | 第27页 |
| 2.2.12 雄蕊中O2-含量的检测 | 第27页 |
| 2.2.13 雄蕊中ROS含量的检测 | 第27页 |
| 2.2.14 石蜡切片制备 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-49页 |
| 3.1 番茄SlIDA启动子GUS转基因植株的获得 | 第29-31页 |
| 3.1.1 番茄SlIDA启动子基因的克隆 | 第29页 |
| 3.1.2 番茄SlIDA基因启动子表达载体ProIDA::GUS的构建 | 第29-30页 |
| 3.1.3 SlIDA启动子GUS转基因番茄的获得 | 第30-31页 |
| 3.2 ProSlIDA::GUS转基因番茄的阳性鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.1 GUS染色鉴定ProSlIDA::GUS转基因番茄 | 第31页 |
| 3.2.2 PCR鉴定ProSlIDA::GUS转基因番茄 | 第31-32页 |
| 3.3 筛选T5代SlIDARNAi沉默转基因番茄 | 第32-33页 |
| 3.3.1 探针PCR鉴定SlIDARNAi沉默转基因番茄 | 第32-33页 |
| 3.3.2 qRT-PCR鉴定SlIDARNAi沉默转基因番茄 | 第33页 |
| 3.4 番茄SlIDA基因时空表达特征分析 | 第33-34页 |
| 3.5 ProSlIDA::GUS转基因植株表达特异性 | 第34-37页 |
| 3.5.1 SlIDA::GUS启动子转基因番茄花粉进行GUS染色 | 第36页 |
| 3.5.2 ProSlIDA::GUS转基因番茄的花粉体外萌发后进行GUS染色 | 第36-37页 |
| 3.5.3 石蜡切片观察ProSlIDA::GUS转基因番茄中SlIDA表达情况 | 第37页 |
| 3.6 SlIDA沉默转基因番茄中坐果率和结子率的测定 | 第37-46页 |
| 3.6.1 扫描电镜(SEM)观察RNAi番茄花粉形态 | 第39-41页 |
| 3.6.2 RNAi番茄开花期花粉活力检测 | 第41-44页 |
| 3.6.3 花粉管萌发速度的检测 | 第44-46页 |
| 3.7 番茄SlIDA对花药ROS的影响 | 第46-49页 |
| 3.7.1 NBT染色检测雄蕊中O_2~-的变化 | 第46-47页 |
| 3.7.2 DAB染色检测雄蕊中ROS变化 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 4.1 首次发现IDA基因在植物中调控花粉发育 | 第49页 |
| 4.2 IDA基因在番茄和拟南芥中的表达模式不同 | 第49-50页 |
| 4.3 IDA基因调控脱落的信号通路可能是保守的 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
