英文缩略词 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 家禽卵巢与卵泡特征 | 第12-14页 |
1.1.1 卵巢的解剖与组织学特点 | 第12-13页 |
1.1.2 鸡卵泡颗粒细胞和膜细胞 | 第13-14页 |
1.2 miRNAs研究进展 | 第14-18页 |
1.2.1 miRNAs简介 | 第14-15页 |
1.2.2 miRNAs的加工 | 第15-17页 |
1.2.3 miRNAs的作用机制 | 第17页 |
1.2.4 miRNAs靶基因的预测和鉴定 | 第17-18页 |
1.3 miRNAs在卵巢中的功能 | 第18-19页 |
1.4 miRNAs单核苷酸多态性的研究 | 第19-21页 |
1.4.1 miRNAs单核苷酸多态性影响成熟miRNAs的表达 | 第20页 |
1.4.2 鸡miRNAs单核苷酸多态性研究进展 | 第20-21页 |
1.5 miR-26a-5p研究进展 | 第21-22页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-40页 |
2.1 试验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 试验动物与样品采集 | 第23页 |
2.1.2 主要仪器 | 第23-24页 |
2.1.3 主要试剂及来源 | 第24-25页 |
2.1.4 常用试剂的配制 | 第25页 |
2.1.5 主要数据库及生物软件 | 第25-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 核酸提取及其浓度检测 | 第26-28页 |
2.2.2 实时荧光定量PCR检测 | 第28-33页 |
2.2.3 鸡等级卵泡颗粒细胞及膜细胞的获得和分离培养 | 第33-34页 |
2.2.4 细胞转染 | 第34页 |
2.2.5 CCK-8法检测细胞增殖 | 第34-35页 |
2.2.6 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第35-36页 |
2.2.7 Pri-miR-26a-5pSNPs位点筛选与群体多态性分析 | 第36-37页 |
2.2.8 Pri-miR-26a-5p两种单倍型质粒的构建 | 第37-39页 |
2.3 统计与分析 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-59页 |
3.1 miR-26a-5p的表达 | 第40-41页 |
3.1.1 总RNA的提取 | 第40页 |
3.1.2 miR-26a-5p在鸡卵巢卵泡细胞中的表达 | 第40-41页 |
3.2 miR-26a-5p对鸡等级卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第41-43页 |
3.2.1 miR-26a-5pmimics的转染效率 | 第41-42页 |
3.2.2 miR-26a-5p对鸡等级卵泡颗粒细胞增殖的影响 | 第42页 |
3.2.3 凋亡相关基因的表达变化 | 第42-43页 |
3.3 miR-26a-5p靶基因的筛选和鉴定 | 第43-49页 |
3.3.1 miR-26a-5p靶基因的筛选 | 第43-45页 |
3.3.2 miR-26a-5p靶基因NLK的表达 | 第45-47页 |
3.3.3 miR-26a-5p和NLK基因靶向关系验证 | 第47-49页 |
3.4 Pri-miR-26a-5pSNPs鉴定及多样性分析 | 第49-59页 |
3.4.1 Pri-miR-26a-5p10个SNPs位点的鉴定 | 第49-51页 |
3.4.2 Pri-miR-26a-5p10个SNPs位点基因型及等位基因频率分析 | 第51-53页 |
3.4.3 Pri-miR-26a-5p10个SNPs位点连锁不平衡分析 | 第53页 |
3.4.4 Pri-miR-26a-5pSNPs位点单倍型的构建 | 第53-54页 |
3.4.5 Pri-miR-26a-5p单倍型二级结构预测 | 第54-55页 |
3.4.6 Pri-miR-26a-5p单倍型表达载体的构建 | 第55-57页 |
3.4.7 不同单倍型对成熟miR-26a-5p表达的影响 | 第57页 |
3.4.8 Pri-miR-26a-5pSNPs位点与鸡产蛋性状的关联分析 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第75页 |