中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第10-22页 |
1.1 生物活性肽的概述 | 第10-14页 |
1.1.1 概念 | 第10页 |
1.1.2 生物活性肽的分类 | 第10页 |
1.1.3 生物活性肽的特点 | 第10-11页 |
1.1.4 生物活性肽的制备 | 第11-12页 |
1.1.4.1 化学合成法 | 第11页 |
1.1.4.2 酶法 | 第11-12页 |
1.1.4.3 DNA重组法 | 第12页 |
1.1.5 生物活性肽的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.5.1 生物活性肽在医药领域的应用 | 第12-13页 |
1.1.5.2 生物活性肽在食品领域的应用 | 第13-14页 |
1.2 固相多肽合成概述 | 第14-18页 |
1.2.1 固相有机合成基本原理 | 第14-18页 |
1.2.1.1 固相多肽合成树脂 | 第15-16页 |
1.2.1.2 氨基酸保护策略 | 第16页 |
1.2.1.3 肽键缩合试剂 | 第16-17页 |
1.2.1.4 固相多肽合成检测 | 第17-18页 |
1.3 多肽的分离纯化 | 第18-20页 |
1.3.1 离子交换层析 | 第18-19页 |
1.3.2 反相层析 | 第19页 |
1.3.3 亲和层析 | 第19页 |
1.3.4 凝胶过滤层析 | 第19-20页 |
1.4 多肽的分析方法 | 第20-21页 |
1.4.1 质谱分析 | 第20页 |
1.4.2 高效液相色谱纯度分析 | 第20页 |
1.4.3 其他分析方法 | 第20-21页 |
1.5 本课题的研究目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-35页 |
2.1 主要仪器设备、材料及试剂 | 第22-24页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.2 主要材料 | 第23-24页 |
2.1.2.1 固相合成所用材料 | 第23页 |
2.1.2.2 活性验证所用材料 | 第23-24页 |
2.1.3 主要试剂 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-35页 |
2.2.1 生物活性肽的固相合成 | 第24-31页 |
2.2.1.1 树脂的选择与活化 | 第26页 |
2.2.1.2 第一个氨基酸与树脂的连接 | 第26-27页 |
2.2.1.3 连接率的测定 | 第27-28页 |
2.2.1.4 茚三酮定性显色法 | 第28-29页 |
2.2.1.5 脱除氨基保护基 | 第29页 |
2.2.1.6 DCC/HOBt 缩合法 | 第29-30页 |
2.2.1.7 树脂复合物的切割 | 第30-31页 |
2.2.1.8 生物活性肽粗品 RP-HPLC 分析 | 第31页 |
2.2.2 生物活性肽的活性验证 | 第31-35页 |
2.2.2.1 HepG2、 BGC-832 细胞传代培养 | 第31-32页 |
2.2.2.2 HL-60 细胞传代培养 | 第32页 |
2.2.2.3 细胞计数 | 第32-33页 |
2.2.2.4 96 孔细胞板接种培养 | 第33页 |
2.2.2.5 MTT 比色法检测细胞活力 | 第33-34页 |
2.2.2.6 细胞生长抑制率计算 | 第34-35页 |
第三章 结果与讨论 | 第35-51页 |
3.1 树脂的活化 | 第35-36页 |
3.2 第一个氨基酸与树脂连接率的测定 | 第36-38页 |
3.2.1 Fmoc 吸光法测定 | 第36-37页 |
3.2.1.1 标准曲线的建立 | 第36-37页 |
3.2.1.2 连接率计算 | 第37页 |
3.2.2 质量法测定 | 第37-38页 |
3.2.3 测定方法比较 | 第38页 |
3.3 脱保护时间策略的选择 | 第38-39页 |
3.4 生物活性肽的分离纯化 | 第39-44页 |
3.4.1 LS-7 分离纯化结果 | 第39-42页 |
3.4.2 PR-6 的分离纯化结果 | 第42-44页 |
3.5 生物活性肽的活性验证 | 第44-51页 |
3.5.1 生物活性肽对 HL-60 细胞抑制作用分析 | 第44-47页 |
3.5.1.1 PR-6 对 HL-60 抑制效果分析 | 第44-46页 |
3.5.1.2 LS-7 对 HL-60 抑制效果分析 | 第46-47页 |
3.5.2 LS-7 对 HepG2 和 BGC-832 抑制作用分析 | 第47-51页 |
总结与展望 | 第51-53页 |
总结 | 第51-52页 |
展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
个人简历 | 第61页 |