| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一、前言 | 第12-39页 |
| 1.1 HIV简介 | 第12-13页 |
| 1.2 HIV-1分子病毒学 | 第13-16页 |
| 1.3 HIV-1病毒生活周期 | 第16-22页 |
| 1.3.1 游离的病毒 | 第17页 |
| 1.3.2 受体结合与吸附 | 第17-18页 |
| 1.3.3 融合 | 第18页 |
| 1.3.4 逆转录 | 第18-20页 |
| 1.3.5 整合与基因表达 | 第20-21页 |
| 1.3.6 组装 | 第21页 |
| 1.3.7 出芽成熟 | 第21-22页 |
| 1.3.8 HIV-1的细胞与细胞之间的传播 | 第22页 |
| 1.4 宿主因了在HIV-1基因表达中的调控作用与机制 | 第22-26页 |
| 1.5 HIV-1蛋白病毒功能简介 | 第26-33页 |
| 1.5.1 Tat蛋白 | 第26-27页 |
| 1.5.2 Rev蛋白 | 第27-28页 |
| 1.5.3 Nef蛋白 | 第28-29页 |
| 1.5.4 Vif蛋白 | 第29-30页 |
| 1.5.5 Vpr蛋白 | 第30页 |
| 1.5.6 Vpu蛋白 | 第30-31页 |
| 1.5.7 Env蛋白 | 第31-32页 |
| 1.5.8 Gag蛋白 | 第32页 |
| 1.5.9 Gag-Pol蛋白 | 第32-33页 |
| 1.6 HIV-1药物及治疗现状 | 第33-35页 |
| 1.6.1 逆转录酶抑制剂 | 第33页 |
| 1.6.2 蛋白酶抑制剂 | 第33页 |
| 1.6.3 整合酶抑制剂 | 第33-34页 |
| 1.6.4 融合抑制剂 | 第34页 |
| 1.6.5 CCR5抑制剂 | 第34页 |
| 1.6.6 其它抗HIV-1药物 | 第34-35页 |
| 1.7 Cyclin T1蛋白简介 | 第35-37页 |
| 1.8 Sam68蛋白简介 | 第37-39页 |
| 二、材料与方法 | 第39-47页 |
| 2.1 细胞系与培养条件、转染 | 第39页 |
| 2.2 质粒与小干涉RNA | 第39-40页 |
| 2.3 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第40-41页 |
| 2.4 Western印迹(Western blot)与抗体 | 第41-42页 |
| 2.5 荧光素酶活性试验 | 第42页 |
| 2.6 免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation) | 第42-43页 |
| 2.7 免疫荧光染色(immunofluorescence staining) | 第43页 |
| 2.8 染色体免疫沉淀试验(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP) | 第43-44页 |
| 2.9 生物素标记的cDNA显色技术 | 第44页 |
| 2.10 HIV逆转录酶试验(RTase assay) | 第44-45页 |
| 2.11 酵母双杂交(Yeast two-hybrid) | 第45页 |
| 2.12 间接测量Tat蛋白的报告基因试验(Indirect Tat Reporter Assay) | 第45-46页 |
| 2.13 数据分析 | 第46-47页 |
| 三、实验结果 | 第47-71页 |
| 3.1 Cyclin T1的可变剪接产物Cyelin T1b的发现及其在HIV-1转录过程中的抑制作用 | 第47-61页 |
| 3.1.1 Cyclin T1b的发现 | 第47-48页 |
| 3.1.2 CycT1b在不同细胞中以及细胞周期中的表达 | 第48-50页 |
| 3.1.3 CycT1b的细胞内定位模式 | 第50-52页 |
| 3.1.4 CycT1b抑制HIV-1基因的表达 | 第52-53页 |
| 3.1.5 CycT1b通过抑制Tat反式转求激活来抑制HIV-1的复制 | 第53-54页 |
| 3.1.6 CycT1b能够结合CDK9,而不能结合Tat | 第54-56页 |
| 3.1.7 CycT1b与CycT1a竞争结合CDK9,导致结合到HIV-1 LTR启动子上的P-TEFb和超磷酸化的的RNA聚合酶Ⅱ减少 | 第56-58页 |
| 3.1.8 CycT1b抑制HIV-1的转录延伸 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60-61页 |
| 3.2 Sam68调控HIV-1的RNA剪接过程 | 第61-71页 |
| 3.2.1 Sma68调控HIV-1蛋白的表达 | 第62-63页 |
| 3.2.2 Sam68调控HIV-1 RNA的剪接 | 第63-65页 |
| 3.2.3 Sam68调控位于剪接供点D4和受点A7之间的剪接过程 | 第65-66页 |
| 3.2.4 Sam68调控位于剪接供点D1和受点A3之间的剪接过程 | 第66-68页 |
| 3.2.5 Sam68调控细胞内ASF/SF2的表达 | 第68-69页 |
| 3.2.6 hnRNPK将Sam68及ASF/SF2连接到一个剪接复合物当中 | 第69-70页 |
| 小结 | 第70-71页 |
| 四、讨论 | 第71-77页 |
| 4.1 Cyclin T1b对于HIV-1转录延伸的调节 | 第71-72页 |
| 4.2 Cyc T1b对于RNA聚合酶Ⅱ的活性影响 | 第72页 |
| 4.3 CycT1作为抗HIV-1病毒药物靶标的前景 | 第72-73页 |
| 4.4 Sam68对于HIV-1复制的调控 | 第73-75页 |
| 4.5 Sam68调控HIV-1 RNA可变剪接的机制探讨 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| 科研成果 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
