| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-31页 |
| 1.1 锌元素的生理功能 | 第11-13页 |
| 1.1.1 锌元素缺乏的症状及其原因 | 第11-12页 |
| 1.1.2 锌元素生理功能的分子机理 | 第12-13页 |
| 1.2 锌离子的内稳态 | 第13-19页 |
| 1.2.1 细胞水平的锌离子内稳态 | 第13-17页 |
| 1.2.2 多细胞个体系统水平的锌离子内稳态 | 第17页 |
| 1.2.3 锌内稳态失衡与疾病 | 第17-19页 |
| 1.3 锌离子在小肠中的吸收机制 | 第19-23页 |
| 1.3.1 锌离子在小肠上皮细胞顶端膜一侧的吸收机制 | 第20-21页 |
| 1.3.2 锌离子在小肠上皮细胞内的运输机制 | 第21-22页 |
| 1.3.3 锌离子在小肠上皮细胞基底膜一侧的吸收机制 | 第22-23页 |
| 1.4 锌离子在小肠中吸收的调节机制 | 第23-24页 |
| 1.5 果蝇中锌转运蛋白的研究进展 | 第24-29页 |
| 1.5.1 果蝇的金属硫蛋白 | 第24页 |
| 1.5.2 果蝇的Zip蛋白 | 第24-25页 |
| 1.5.3 果蝇的ZnT蛋白 | 第25-27页 |
| 1.5.4 果蝇肠道中锌离子的吸收机制 | 第27-28页 |
| 1.5.5 以果蝇为模型研究膳食锌吸收机制的可行性 | 第28-29页 |
| 1.6 本论文的研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 1.7 本论文各部分的主要内容 | 第30-31页 |
| 第2章 同源蛋白dZip1和dZip2基因抑制的表型分析 | 第31-48页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第31-38页 |
| 2.1.1 果蝇序列同源性分析 | 第31页 |
| 2.1.2 系统进化树分析 | 第31页 |
| 2.1.3 dZip1和dZip2跨膜区及拓扑结构分析 | 第31-32页 |
| 2.1.4 果蝇的UAS/GAL4系统 | 第32-33页 |
| 2.1.5 果蝇品系与培养条件 | 第33页 |
| 2.1.6 果蝇总RNA 提取以及半定量RT-PCR | 第33-35页 |
| 2.1.7 果蝇存活率统计 | 第35页 |
| 2.1.8 果蝇三龄幼虫肠道的解剖 | 第35-36页 |
| 2.1.9 碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，简称 ALP）的活性检测 | 第36-37页 |
| 2.1.10 顺乌头酸酶（aconitase）的活性检测 | 第37-38页 |
| 2.1.11 统计学分析 | 第38页 |
| 2.2 实验结果 | 第38-46页 |
| 2.2.1 果蝇Zip家族成员的同源性分析 | 第38-39页 |
| 2.2.2 dZip1和dZip2 基因抑制在缺锌条件下的羽化率分析 | 第39-42页 |
| 2.2.3 dZip1和dZip2 基因抑制影响碱性磷酸酶（ALP）的活性 | 第42-44页 |
| 2.2.4 锌离子能挽救基因抑制引起的羽化率降低 | 第44-45页 |
| 2.2.5 dZip1和dZip2 的跨膜区和拓扑结构预测 | 第45-46页 |
| 2.3 实验结果讨论 | 第46-48页 |
| 第3章 dZip1和dZip2蛋白定位和锌转运功能验证 | 第48-63页 |
| 3.1 实验材料和方法 | 第48-51页 |
| 3.1.1 果蝇品系 | 第48页 |
| 3.1.2 UAS-dZip2和UAS-dZip2-HA质粒构建 | 第48页 |
| 3.1.3 显微注射构建转基因果蝇 | 第48-49页 |
| 3.1.4 果蝇幼虫体内MtnB-EYFP的荧光检测 | 第49页 |
| 3.1.5 dZip1抗体制备 | 第49页 |
| 3.1.6 荧光免疫组化染色 | 第49-50页 |
| 3.1.7 激光扫描共聚焦显微镜的观察 | 第50页 |
| 3.1.8 转染用质粒的构建 | 第50页 |
| 3.1.9 哺乳动物细胞转染和筛选 | 第50-51页 |
| 3.1.10 Zinpyr-1染色 | 第51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-61页 |
| 3.2.1 内源dZip1定位于中肠间缢（midgut constriction）的顶端细胞膜上 | 第51-54页 |
| 3.2.2 dZip2定位于细胞膜和肠道顶端膜一侧 | 第54-56页 |
| 3.2.3 dZip1和dZip2具有往细胞内转运锌的活性 | 第56-59页 |
| 3.2.4 dZip1和dZip2过表达果蝇品系的表型分析 | 第59-61页 |
| 3.3 实验结果讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 细胞内的锌转运蛋白对膳食锌吸收不起重要作用 | 第63-76页 |
| 4.1 实验材料和方法 | 第63-65页 |
| 4.1.1 系统进化树分析 | 第63页 |
| 4.1.2 果蝇品系 | 第63-64页 |
| 4.1.3 果蝇染色体重组方法 | 第64页 |
| 4.1.4 高尔基体标记载体构建 | 第64-65页 |
| 4.1.5 dZnT7-EGFP哺乳动物细胞表达载体的构建 | 第65页 |
| 4.2 实验结果 | 第65-73页 |
| 4.2.1 果蝇ZnT家族成员预测 | 第65-66页 |
| 4.2.2 细胞内锌转运蛋白基因抑制后的表型鉴定 | 第66-70页 |
| 4.2.3 高尔基体定位的dZnT7对膳食锌吸收并非必需 | 第70-73页 |
| 4.3 实验结果讨论 | 第73-76页 |
| 第5章 dZnT1的同源蛋白CG5130参与膳食锌的吸收 | 第76-82页 |
| 5.1 实验材料和方法 | 第76-77页 |
| 5.1.1 果蝇品系 | 第76页 |
| 5.1.2 CG5130-EGFP转染用质粒构建 | 第76-77页 |
| 5.2 实验结果 | 第77-80页 |
| 5.2.1 CG5130是dZnT1 的同源蛋白 | 第77页 |
| 5.2.2 CG5130定位于细胞膜上 | 第77-78页 |
| 5.2.3 CG5130具有向细胞外转运锌的活性 | 第78页 |
| 5.2.4 CG5130在中肠抑制导致全身其他组织（whole body-gut）缺锌 | 第78-80页 |
| 5.2.5 CG5130 基因抑制的表型分析 | 第80页 |
| 5.3 实验结果讨论 | 第80-82页 |
| 第6章 膳食锌水平对锌吸收过程的调节 | 第82-91页 |
| 6.1 实验材料和方法 | 第82-85页 |
| 6.1.1 果蝇品系 | 第82页 |
| 6.1.2 UAS-CG5130-HA转基因果蝇构建 | 第82页 |
| 6.1.3 Anti-dZnT1多克隆抗体制备 | 第82-84页 |
| 6.1.4 果蝇中肠总蛋白提取及免疫印迹 | 第84-85页 |
| 6.2 实验结果 | 第85-89页 |
| 6.2.1 dZip1和dZip2在转录水平上受到膳食锌水平的调节 | 第85-86页 |
| 6.2.2 ZnT家族成员在转录水平上不受膳食锌水平的调节 | 第86-87页 |
| 6.2.3 dZnT1在转录后水平上受膳食锌水平的调节 | 第87-88页 |
| 6.2.4 CG5130在转录后水平上不受膳食锌水平的调节 | 第88-89页 |
| 6.3 实验结果讨论 | 第89-91页 |
| 第7章 中肠膳食锌的吸收不受身体锌水平的调节 | 第91-97页 |
| 7.1 实验材料和方法 | 第91页 |
| 7.2 实验结果 | 第91-95页 |
| 7.2.1 dZnT1在中肠组织中的表达水平影响dZip1和dZip2的转录水平 | 第91-93页 |
| 7.2.2 ZnT35C在马氏管中的表达水平并不影响膳食锌吸收 | 第93-95页 |
| 7.3 实验结果讨论 | 第95-97页 |
| 第8章 结论 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第111页 |
