| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 家蚕的食性 | 第12-13页 |
| 1.1.1 家蚕的食性特点 | 第12页 |
| 1.1.2 家蚕食性的分子研究 | 第12页 |
| 1.1.3 家蚕食性的遗传方式研究 | 第12-13页 |
| 1.2 昆虫的嗅觉感受机制 | 第13-14页 |
| 1.2.1 昆虫的嗅觉感受器 | 第13-14页 |
| 1.2.2 昆虫的嗅觉识别过程 | 第14页 |
| 1.3 昆虫嗅觉受体概述 | 第14-15页 |
| 1.4 非典型嗅觉受体Orco的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.4.1 Orco的表达 | 第15-16页 |
| 1.4.2 Orco的结构 | 第16-17页 |
| 1.4.3 Orco的功能 | 第17-18页 |
| 1.4.4 家蚕嗅觉受体Orco的研究进展 | 第18页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-40页 |
| 2.1 材料 | 第20-26页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.2 质粒和菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第20-25页 |
| 2.1.3.1 试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.1.3.2 主要试剂的配制 | 第21-25页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第25页 |
| 2.1.5 主要软件和数据库 | 第25页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 Orco基因的克隆 | 第26-31页 |
| 2.2.1.1 取材 | 第26页 |
| 2.2.1.2 总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.1.3 cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| 2.2.1.4 PCR扩增 | 第28页 |
| 2.2.1.5 DNA片段的琼脂糖凝胶回收 | 第28-29页 |
| 2.2.1.6 连接反应 | 第29页 |
| 2.2.1.7 连接产物的转化 | 第29页 |
| 2.2.1.8 重组质粒的筛选与测序 | 第29-30页 |
| 2.2.1.9 序列比对 | 第30页 |
| 2.2.1.10 质粒提取 | 第30-31页 |
| 2.2.2 qPCR | 第31-32页 |
| 2.2.2.1 总RNA提取 | 第31页 |
| 2.2.2.2 RNA纯度及浓度检测 | 第31页 |
| 2.2.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第31页 |
| 2.2.2.4 引物设计 | 第31页 |
| 2.2.2.5 qPCR反应体系及程序 | 第31-32页 |
| 2.2.2.6 qPCR | 第32页 |
| 2.2.3 小鼠抗BmOrco多克隆抗体的制备 | 第32-38页 |
| 2.2.3.1 抗原片段的选择与PCR扩增 | 第32页 |
| 2.2.3.2 原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 2.2.3.3 重组质粒的原核表达 | 第34页 |
| 2.2.3.4 SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
| 2.2.3.5 包涵体蛋白的变性纯化 | 第35-37页 |
| 2.2.3.6 动物免疫 | 第37页 |
| 2.2.3.7 ELISA | 第37页 |
| 2.2.3.8 Western blot | 第37-38页 |
| 2.2.4 抗体染色 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-50页 |
| 3.1 不同摄食性家蚕品种Orco基因的核苷酸组成比较 | 第40-41页 |
| 3.1.1 Orco基因的PCR扩增 | 第40页 |
| 3.1.2 阳性克隆菌的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.1.3 Orco基因核苷酸组成比较 | 第41页 |
| 3.2 不同摄食性家蚕品种Orco基因的mRNA表达水平比较 | 第41-43页 |
| 3.2.1 不同摄食性家蚕品种Orco基因的表达水平比较 | 第41-42页 |
| 3.2.2 食性改良家蚕品种与其亲代Orco基因的表达水平比较 | 第42-43页 |
| 3.3 不同摄食性家蚕品种Orco蛋白表达水平的比较 | 第43-48页 |
| 3.3.1 抗体制备 | 第43-46页 |
| 3.3.1.1 抗体用片段的选择及克隆 | 第43-44页 |
| 3.3.1.2 原核表达载体的构建 | 第44页 |
| 3.3.1.3 Orco蛋白的诱导表达及变性纯化 | 第44-45页 |
| 3.3.1.4 小鼠多克隆抗体效价的检测 | 第45-46页 |
| 3.3.2 Orco在家蚕幼虫的蛋白定位 | 第46-47页 |
| 3.3.3 不同摄食性家蚕Orco蛋白水平的表达差异 | 第47-48页 |
| 3.4 饥饿对Orco基因表达量的影响 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 昆虫Orco蛋白的原核表达 | 第50-51页 |
| 4.2 Orco的蛋白定位 | 第51页 |
| 4.3 不同摄食性家蚕Orco的表达差异 | 第51-52页 |
| 4.4 Orco在家蚕育种上的应用 | 第52页 |
| 4.5 饥饿对Orco基因表达量的影响 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |
