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吉富罗非鱼硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因的克隆及温度与饲料脂肪源对其表达的研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第13-21页
    1. 前言第13页
    2. SCD基因研究概况第13-16页
        2.1. SCD克隆及组织表达第13-14页
        2.2. SCD基因分子结构第14-15页
        2.3. SCD基因组织表达特点第15-16页
    3. SCD基因的生物学功能第16-17页
    4. SCD基因在不同因子作用下参与脂代谢的调控第17-19页
        4.1. 营养调节第17-18页
        4.2. 激素调节第18-19页
        4.3. 温度调节第19页
    5. 本研究的目的与意义第19-21页
第二章 吉富罗非鱼SCD基因的克隆与序列分析第21-37页
    1. 材料与方法第21-22页
        1.1. 实验鱼第21页
        1.2. 实验仪器与试剂第21-22页
            1.2.1. 主要试剂第21-22页
            1.2.2. 主要仪器第22页
    2. 实验方法第22-27页
        2.1. 总RNA的提取第22页
        2.2. 吉富罗非鱼SCD基因部分序列的PCR扩增及纯化第22-24页
            2.2.1. cDNA的制备第22-23页
            2.2.2. 引物设计第23页
            2.2.3. 吉富罗非鱼SCD基因中间片段的扩增第23-24页
            2.2.4. PCR产物的回收纯化、克隆和测序第24页
        2.3. 吉富罗非鱼SCD基因全长的获得第24-27页
            2.3.1. SCD序列5'RACE第24-26页
            2.3.2. SCD序列3'RACE第26-27页
        2.4. 序列分析第27页
    3. 实验结果第27-34页
        3.1. 吉富罗非鱼总RNA提取第27-28页
        3.2. 吉富罗非鱼序列分析第28-34页
            3.2.1. 开放阅读框分析第28-29页
            3.2.2. 核苷酸同源性分析第29页
            3.2.3. 分子进化树的构建第29-30页
            3.2.4. 蛋白质一级结构分析第30-33页
                3.2.4.1. 氨基酸组成及亲疏水性分析第30-31页
                3.2.4.2. 跨膜区结构预测及信号肽分析第31-32页
                3.2.4.3. 蛋白质保守结构域分析第32-33页
                3.2.4.4. 组氨酸结构域分析第33页
            3.2.5. 蛋白质二级结构分析第33-34页
                3.2.5.1. 二级结构预测第33-34页
                3.2.5.2. 蛋白质磷酸化位点分析第34页
    4. 讨论第34-37页
第三章 吉富罗非鱼SCD基因组织及时空表达规律第37-45页
    1. 材料与方法第37-38页
        1.1. 样品采集第37页
        1.2. 实验仪器与试剂第37-38页
            1.2.1. 主要试剂第37-38页
            1.2.2. 主要仪器第38页
    2. 实验方法第38-39页
        2.1. 总RNA的提取第38页
        2.2. 实时荧光定量PCR第38-39页
            2.2.1. cDNA模板的制备第38页
            2.2.2. 引物设计第38页
            2.2.3. 实时荧光定量PCR第38-39页
            2.2.4. 统计分析第39页
    3. 实验结果第39-41页
        3.1. 吉富罗非鱼胚胎及受精卵发育阶段SCD基因的相对表达量第39-40页
        3.2. 吉富罗非鱼仔稚鱼阶段SCD基因的相对表达量第40页
        3.3. 吉富罗非鱼SCD基因组织表达分布第40-41页
    4. 讨论第41-45页
        4.1. 吉富罗非鱼SCD基因组织表达分布第41-42页
        4.2. 吉富罗非鱼胚胎及受精卵发育阶段SCD基因的相对表达量第42-43页
        4.3. 吉富罗非鱼仔稚鱼阶段SCD基因的相对表达量第43-45页
第四章 温度对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成、生理指标及SCD基因表达的影响第45-57页
    1. 材料与方法第45-47页
        1.1. 实验鱼第45页
        1.2. 实验方法第45-47页
            1.2.1. 实验前期处理第45-46页
            1.2.2. 养殖实验第46页
            1.2.3. 样品采集第46-47页
                1.2.3.1. 生长指标测定第46页
                1.2.3.2. 血液指标测定第46页
                1.2.3.3. 肌肉成分的测定第46-47页
                1.2.3.4. 肝脏SCD mRNA表达量及酶活测定第47页
            1.2.4. 统计分析第47页
    2. 实验结果第47-52页
        2.1. 水温对吉富罗非鱼生长及肌肉成分的影响第47-48页
        2.2. 水温对吉富罗非鱼血液指标的影响第48-49页
        2.3. 水温对吉富罗非鱼血清生化指标的影响第49页
        2.4. 水温对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响第49-51页
        2.5. 水温对吉富罗非鱼SCD基因表达及活性影响第51-52页
    3. 讨论第52-57页
        3.1. 水温对吉富罗非鱼生长及肌肉成分的影响第52页
        3.2. 水温对吉富罗非鱼血液指标的影响第52-53页
        3.3. 水温对吉富罗非鱼血清生化指标的影响第53页
        3.4. 水温对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响第53-55页
        3.5. 水温对吉富罗非鱼SCD基因表达及活性影响第55-57页
第五章 脂肪源对吉富罗非鱼机体脂肪酸组成、生理指标及SCD基因表达的影响第57-77页
    1. 材料与方法第57-59页
        1.1. 实验鱼第57页
        1.2. 实验方法第57-59页
            1.2.1. 实验前期处理第57页
            1.2.2. 实验饲料第57-58页
            1.2.3. 养殖实验第58页
            1.2.4. 样品采集第58-59页
                1.2.4.1. 生长指标测定第58页
                1.2.4.2. 血液指标测定第58-59页
                1.2.4.3. 饲料、肌肉及肝脏成分的测定第59页
                1.2.4.4. 肝脏切片的制备第59页
                1.2.4.5. 肝脏与肌肉SCD mRNA表达量及酶活的测定第59页
            1.2.5. 统计分析第59页
    2. 实验结果第59-70页
        2.1. 饲料脂肪酸组成第59-61页
        2.2. 脂肪源对吉富罗非鱼生长的影响第61页
        2.3. 脂肪源对吉富罗非鱼血清生化指标的影响第61-62页
        2.4. 脂肪源对肝脏生化指标的影响第62-64页
        2.5. 脂肪源对吉富罗非鱼肌肉及肝脏脂肪酸组成的影响第64-68页
            2.5.1. 脂肪源对吉富罗非鱼肌肉脂肪酸组成的影响第64-66页
            2.5.2. 脂肪源对吉富罗非鱼肝脏脂肪酸组成的影响第66-68页
        2.6. 脂肪源对吉富罗非鱼SCD基因表达及活性影响第68-70页
    3. 讨论第70-77页
        3.1. 脂肪源对吉富罗非鱼生长的影响第70-71页
        3.2. 脂肪源对吉富罗非鱼肌肉及肝脏脂肪酸组成的影响第71-72页
        3.3. 脂肪源对吉富罗非鱼SCD基因表达及活性影响第72-73页
        3.4. 脂肪源对吉富罗非鱼血清生化指标的影响第73-75页
        3.5. 脂肪源对肝脏生化指标的影响第75-77页
全文总结第77-79页
参考文献第79-95页
致谢第95-97页
科研情况第97页

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