| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-26页 |
| 第一章 BCL2 基因家族及BCL-G 基因的研究进展 | 第13-26页 |
| ·BCL-2 基因家族的研究进展 | 第13-20页 |
| ·BCL-2 基因家族的成员及结构特点 | 第13-14页 |
| ·BCL-2 基因家族的功能和作用机制 | 第14-20页 |
| ·BCL-G 研究进展 | 第20-26页 |
| ·BCL-G 的基本特点 | 第20页 |
| ·BCL-G_S 的结构和功能 | 第20-22页 |
| ·BCL-G_L 的结构和功能 | 第22-26页 |
| 试验研究 | 第26-68页 |
| 第二章 猪新基因BCL-G_L的克隆和分析 | 第26-41页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·实验所用组织和工程细菌及载体 | 第26页 |
| ·实验所用主要试剂和工具酶 | 第26页 |
| ·实验所用主要仪器与设备 | 第26-27页 |
| ·实验所用试剂配方 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-33页 |
| ·电子克隆猪BCL-G_L 基因 | 第28页 |
| ·猪BCL-G_L 基因的实验克隆 | 第28-33页 |
| ·猪BCL-G_L 基因的生物信息学预测与分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·猪BCL-G_L 基因的电子克隆结果 | 第33-34页 |
| ·PCR 特异扩增目的基因及测序的结果 | 第34页 |
| ·猪BCL-G_L 克隆载体的鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·猪BCL-G_L 基因的ORF 寻找及蛋白质同源比对结果 | 第35-36页 |
| ·基因特征分析结果 | 第36-37页 |
| ·基因的系统发生进化分析结果 | 第37页 |
| ·蛋白质的分子量和重要结构域的分析结果 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第三章 猪BCL-G_L基因的原核表达 | 第41-49页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·实验所用的工程细菌及载体 | 第41页 |
| ·实验所用主要试剂和工具酶 | 第41页 |
| ·实验所用主要仪器与设备 | 第41-42页 |
| ·实验主要试剂配方 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·原核表达引物PCR 扩增猪BCL-G_L 基因 | 第43页 |
| ·猪BCL-G_L 基因原核表达载体的构建和扩增 | 第43-44页 |
| ·制备大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞 | 第44页 |
| ·猪BCL-G_L 基因在大肠杆菌BL21（DE3）中进行原核表达 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·原核表达引物PCR 扩增猪BCL-G_L 基因的结果 | 第45-46页 |
| ·猪BCL-G_L 原核表达载体酶切鉴定结果 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE 检测原核表达的目的蛋白结果 | 第46-49页 |
| 第四章 豚鼠抗猪BCL-G_L的多克隆抗体制备 | 第49-62页 |
| ·材料 | 第49-52页 |
| ·实验所用的实验动物和工程细菌 | 第49页 |
| ·实验所用主要试剂和耗材 | 第49-50页 |
| ·实验所用主要仪器设备 | 第50页 |
| ·实验主要试剂配方 | 第50-52页 |
| ·方法 | 第52-58页 |
| ·纯化原核表达的猪BCL-G_L 蛋白 | 第52页 |
| ·免疫豚鼠制备多克隆抗体 | 第52-53页 |
| ·多克隆抗体的效价检测 | 第53-56页 |
| ·真核表达载体的大量提取 | 第56-57页 |
| ·真核表达载体pEGFP-BCL-G_L 转染猪脐静脉血管内皮细胞 | 第57页 |
| ·West blot 分析检测抗体特异性 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-60页 |
| ·双向琼脂糖扩散试验检测抗体效价结果 | 第58页 |
| ·ELISA 分析抗体效价的结果 | 第58页 |
| ·真核表达引物扩增全基因结果 | 第58-59页 |
| ·真核表达载体pEGFP-BCL-G_L 的鉴定结果 | 第59页 |
| ·真核表达载体pEGFP-BCL-G_L 转染猪脐静脉血管内皮细胞的荧光检测结果 | 第59-60页 |
| ·Western blot 分析检测抗体特异性的结果 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·间接ELISA 方法的条件摸索 | 第60页 |
| ·Western blot 分析最佳调节的摸索 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第五章 猪BCL-G_L基因的结构域缺失真核表达载体的构建 | 第62-68页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·实验所用的工程细菌和载体 | 第62页 |
| ·实验所用主要试剂和工具酶 | 第62页 |
| ·实验所用主要仪器设备和耗材 | 第62页 |
| ·实验主要试剂配方 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·构建BH3 结构域缺失的真核表达载体 | 第62-63页 |
| ·构建BH2 结构域缺失的真核表达载体 | 第63页 |
| ·构建BH3 和BH2 结构域双缺失的真核表达载体 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-67页 |
| ·缺失BH3 结构域的目的基因扩增结果 | 第63-64页 |
| ·真核表达载体pcDNA-BCL-G_L BH3 deficient 和pEGFP-BCL-G_L BH3 deficient 鉴定结果 | 第64-65页 |
| ·真核表达载体pEGFP-BCL-G_L BH2 deficient 的鉴定结果 | 第65页 |
| ·真核表达载体pEGFP-BCL-G_L BH23 double deficient 的鉴定结果 | 第65-66页 |
| ·真核表达载体pcDNA-BCL-G_L BH23 double deficient 和pcDNA-BCL-G_L BH2 deficient 的鉴定结果 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67页 |
| ·构建缺失载体的方法摸索 | 第67页 |
| ·真核表达载体选择的意义 | 第67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 附录 1 试验常用的换算数据 | 第79-80页 |
| 附录 2 缩略词 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 个人简介 | 第82页 |
