摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-54页 |
1.1 有丝分裂概述 | 第11-32页 |
1.1.1 有丝分裂的周期进程 | 第11-13页 |
1.1.2 姐妹染色单体的连接 | 第13-20页 |
1.1.3 动点的结构基础 | 第20-25页 |
1.1.4 中心体的结构与周期 | 第25-32页 |
1.2 纺锤体 | 第32-43页 |
1.2.1 纺锤体的组装 | 第32-37页 |
1.2.2 动点-微管连接 | 第37-41页 |
1.2.3 动点微管动态性调控 | 第41-43页 |
1.3 纺锤体组装检验点 | 第43-54页 |
1.3.1 SAC的功能概述 | 第45-49页 |
1.3.2 SAC蛋白动点定位 | 第49-52页 |
1.3.3 SAC失活的机制 | 第52-54页 |
第二章 材料与方法 | 第54-72页 |
2.1 实验材料 | 第54-57页 |
2.1.1 细胞株 | 第54页 |
2.1.2 载体 | 第54页 |
2.1.3 构建的质粒 | 第54-55页 |
2.1.4 抗体 | 第55页 |
2.1.5 试剂材料 | 第55-57页 |
2.2 实验方法 | 第57-72页 |
2.2.1 E.coli感受态细胞制作方法 | 第57页 |
2.2.2 通过PCR扩增基因以及产物回收方法 | 第57-59页 |
2.2.3 DNA片段重组 | 第59页 |
2.2.4 质粒转化 | 第59-60页 |
2.2.5 抽提小量的质粒DNA | 第60页 |
2.2.6 试剂盒抽提质粒DNA的方法 | 第60-61页 |
2.2.7 制备用于蛋白表达的E.coli感受态细胞 | 第61页 |
2.2.8 谷胱苷肽(GST)融合蛋白的表达纯化 | 第61-63页 |
2.2.9 His融合蛋白的表达和纯化 | 第63页 |
2.2.10 GST pull- down | 第63-64页 |
2.2.11 免疫共沉淀实验 | 第64-65页 |
2.2.12 免疫印迹实验 | 第65页 |
2.2.13 免疫印迹膜重复利用 | 第65-66页 |
2.2.14 体外磷酸化反应实验 | 第66页 |
2.2.15 质谱鉴定相互作用蛋白以及蛋白质的磷酸化位点 | 第66页 |
2.2.16 OD360检测(EnzChek~(?) Phosphate Assay Kit) | 第66-67页 |
2.2.17 磷酸钙法转染 | 第67-68页 |
2.2.18 脂质体转染质粒 | 第68页 |
2.2.19 脂质体转染siRNA | 第68-69页 |
2.2.20 细胞同步化的方法 | 第69-70页 |
2.2.21 染色体甩片 | 第70页 |
2.2.22 免疫荧光实验 | 第70-71页 |
2.2.23 活细胞成像 | 第71页 |
2.2.24 细胞的冷处理实验 | 第71-72页 |
第三章 CSPP1调控有丝分裂期动点微管的动态性 | 第72-124页 |
3.1 引言 | 第72-76页 |
3.2 实验结果 | 第76-118页 |
3.2.1 CSPP1是一个新的动点蛋白 | 第76-83页 |
3.2.2 Aurora B凋控CSPP1的动点定位 | 第83-88页 |
3.2.3 CSPP1与CENP-H结合定位在动点上 | 第88-97页 |
3.2.4 CSPP1凋节正常的有丝分裂进程 | 第97-102页 |
3.2.5 抑制CSPP1表达影响纺锤体检验点失活 | 第102-106页 |
3.2.6 CSPP1调控染色体的摆动 | 第106-113页 |
3.2.7 CSPP1与MCAK协同调控染色体的摆动 | 第113-118页 |
3.3 讨论及CSPP1的作用模型 | 第118-121页 |
3.4 展望 | 第121-124页 |
第四章 Bubin的功能探索 | 第124-156页 |
4.1 引言 | 第124-125页 |
4.2 实验结果和讨论 | 第125-154页 |
4.2.1 Bubin的发现 | 第125-130页 |
4.2.2 Bubin是一个新的动点蛋白 | 第130-133页 |
4.2.3 Bubin调控正常的有丝分裂进程 | 第133-140页 |
4.2.4 Bubin维持姐妹染色单体之间的连接 | 第140-142页 |
4.2.5 Bubin介导动点蛋白的正常定位 | 第142-145页 |
4.2.6 Bubin调控Bub1的激酶活性 | 第145-148页 |
4.2.7 Bubin调控Aurora B-Mps1-Bub1环路 | 第148-154页 |
4.3 展望 | 第154-156页 |
参考文献 | 第156-175页 |
致谢 | 第175-176页 |
在读期间发表的学术论文与参加的会议 | 第176页 |