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农杆菌介导的瞬时表达系统在烟草、丹参、夏枯草中的建立

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第12-18页
    1.1 病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术第12-14页
        1.1.1 VIGS技术概述第12页
        1.1.2 VIGS技术的应用第12-13页
        1.1.3 影响VIGS体系效率的因素第13-14页
        1.1.4 黄瓜花叶病毒(CMV)在VIGS技术中的应用第14页
    1.2 农杆菌介导的瞬时转化体系第14-17页
        1.2.1 瞬时转化体系概述第14-15页
        1.2.2 pEAQ载体及其应用第15-16页
        1.2.3 农杆菌介导的瞬时遗传转化在植物幼苗中的应用第16-17页
    1.3 本研究的主要目的和意义第17-18页
第二章 VIGS技术在丹参中的应用第18-27页
    2.1 材料、试剂与仪器第18-20页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 菌株与载体第18-19页
        2.1.3 试剂第19页
        2.1.4 培养基与溶液第19-20页
        2.1.5 主要仪器第20页
    2.2 实验方法第20-23页
        2.2.1 叶片干燥处理第20页
        2.2.2 HPLC检测丹参叶片水溶性酚酸类成分第20-21页
        2.2.3 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备及电转化第21页
        2.2.4 农杆菌质粒提取与测序第21页
        2.2.5 农杆菌注射法转化丹参、烟草叶片第21-22页
        2.2.6 丹参叶片原生CMV病毒ELISA鉴定第22-23页
    2.3 结果分析第23-25页
        2.3.1 不同干燥处理对丹参叶片水溶性成分含量影响第23-24页
        2.3.2 农杆菌介导的VIGS在丹参中的应用第24页
        2.3.3 丹参病叶中CMV的ELISA检测第24-25页
    2.4 讨论与结论第25-27页
第三章 pEAQ载体介导的烟草叶片瞬时遗传转化体系第27-33页
    3.1 材料、试剂与仪器第27页
        3.1.1 植物材料第27页
        3.1.2 菌株与载体第27页
        3.1.3 试剂和仪器第27页
    3.2 方法第27-28页
        3.2.1 载体构建第27页
        3.2.2 农杆菌介导转化烟草叶片第27-28页
        3.2.3 HPLC检测转化烟草叶 4-羟基苯乳酸第28页
    3.3 结果分析第28-31页
        3.3.1 农杆菌介导转化烟草叶片第28-30页
        3.3.2 HPLC检测转化烟草的叶片成分变化第30-31页
    3.4 讨论与结论第31-33页
第四章 农杆菌介导的丹参、夏枯草幼苗瞬时遗传转化体系第33-43页
    4.1 材料第33-35页
        4.1.1 植物材料第33页
        4.1.2 菌株与载体第33-34页
        4.1.3 试剂和仪器第34-35页
    4.2 方法第35-37页
        4.2.1 HPLC检测丹参幼苗子叶、茎、根有效成分第35-36页
        4.2.2 根癌农杆菌EHA105电转化第36页
        4.2.3 农杆菌介导的幼苗瞬时转化第36页
        4.2.4 机械损伤处理第36页
        4.2.5 GUS染色及定量检测第36-37页
    4.3 结果分析第37-41页
        4.3.1 丹参幼苗子叶、茎、根有效成分分析第37页
        4.3.2 pCAMBIA1301载体的丹参幼苗瞬时转化第37-39页
        4.3.3 pCAMBIA1304载体的本氏烟草、夏枯草幼苗瞬时转化第39-40页
        4.3.4 FAST+机械损伤瞬时转化夏枯草幼苗第40-41页
    4.4 讨论与结论第41-43页
第五章 结论与创新点第43-44页
    5.1 主要结论第43页
    5.2 创新点第43-44页
参考文献第44-48页
致谢第48-49页
作者简介第49页

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