| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 鼻咽癌的研究背景 | 第13-15页 |
| 1.1.1 鼻咽癌的病因学研究 | 第13-15页 |
| 1.1.2 鼻咽癌的诊断 | 第15页 |
| 1.2 RNA干扰(RNA INTERFERENCE,RNAI) | 第15-17页 |
| 1.2.1 RNAi的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.2.2 RNAi的特征及意义 | 第16页 |
| 1.2.3 RNAi在肿瘤研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.3 慢病毒 | 第17-18页 |
| 1.3.1 慢病毒作为载体的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 慢病毒载体介导的RNAi | 第18页 |
| 1.4 非编码RNA (NCRNA)研究背景 | 第18-20页 |
| 1.4.1 LncRNA的功能及作用机制 | 第19-20页 |
| 1.4.2 LncRNA的研究进展与展望 | 第20页 |
| 1.5 P53与P21研究背景 | 第20-22页 |
| 1.5.1 p53与p21信号通路 | 第21页 |
| 1.5.2 p53与p21在肿瘤中的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.6 LNCRNAZ38的发现 | 第22页 |
| 1.6.1 LncRNAZ38的前期研究 | 第22页 |
| 1.7 研究内容和方法 | 第22-24页 |
| 第2章 慢病毒载体介导的RNAi干扰Z38的表达 | 第24-33页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.1 主要试剂和材料 | 第25页 |
| 2.2.2 主要仪器和材料 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 细胞复苏与培养 | 第26-27页 |
| 2.3.2 慢病毒感染的MOI (Multiplicity of Infection)值的确定 | 第27页 |
| 2.3.3 慢病毒感染人鼻咽癌HNEI、5-8F细胞 | 第27-28页 |
| 2.3.4 筛选稳定干扰的细胞株 | 第28页 |
| 2.3.5 细胞总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.3.6 RNA浓度及质量的检测 | 第28-29页 |
| 2.3.7 cDNA的制备 | 第29页 |
| 2.3.8 实时荧光定量PCR检测Z38基因干扰效率 | 第29-30页 |
| 2.4 实验结果 | 第30-32页 |
| 2.4.1 倒置显微镜下检测转染效率 | 第30-31页 |
| 2.4.2 检测总RNA质量 | 第31页 |
| 2.4.3 实时荧光定量PCR检测Z38基因干扰效率 | 第31-32页 |
| 2.5 本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 干扰Z38表达对癌细胞增殖、迁移能力的影响 | 第33-41页 |
| 3.0 引言 | 第33-34页 |
| 3.1 实验仪器和试剂 | 第34页 |
| 3.1.1 主要试剂和材料 | 第34页 |
| 3.2 主要仪器和材料 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.3.1 MTT法检测细胞增殖能力 | 第35页 |
| 3.3.2 细胞划痕实验 | 第35页 |
| 3.3.3 平板细胞克隆形成实验 | 第35-36页 |
| 3.3.4 Transell实验 | 第36页 |
| 3.4 实验结果 | 第36-40页 |
| 3.4.1 MTT法检测细胞增殖能力 | 第36-37页 |
| 3.4.2 细胞划痕实验检测细胞迁移能力 | 第37-38页 |
| 3.4.3 平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力 | 第38-39页 |
| 3.4.4 Transwell实验检测细胞迁移能力 | 第39-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 干扰Z38表达对p53、p21表达水平的影响 | 第41-48页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 实验仪器和材料 | 第41-42页 |
| 4.2.1 主要试剂材料 | 第41-42页 |
| 4.2.2 主要仪器和材料 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 4.3.1 鼻咽癌细胞总蛋白样品提取 | 第42-43页 |
| 4.3.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第43页 |
| 4.3.3 蛋白样品的变性处理 | 第43页 |
| 4.3.4 电泳溶液试剂以及胶的配制 | 第43-45页 |
| 4.3.5 SDS-PAGE电泳步骤 | 第45页 |
| 4.3.6 转膜 | 第45页 |
| 4.3.7 封闭、孵抗及显影 | 第45-46页 |
| 4.4 实验结果 | 第46-47页 |
| 4.4.1 Western Blot检测干扰Z38表达对抑癌因子p53、p21表达水平的影响 | 第46-47页 |
| 4.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 结论与展望 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
