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调控大豆E1基因表达的分子机理研究

摘要第9-11页
Abstract第11-13页
第一章 绪论第14-27页
    第一节 选题背景与意义第14-16页
    第二节 国内外研究进展第16-27页
        一、植物光周期途径及其分子调控研究进展第16-20页
            (一)植物光周期途径是重要的开花调控途径第16页
            (二)光周期反应与大豆生长适应性相关第16-18页
            (三)光周期途径分子调控机制研究进展第18-20页
        二、大豆生育期基因的功能和QTL定位第20-21页
            (一)大豆生育期基因的功能第20页
            (二)大豆生育期基因的QTL定位第20-21页
        三、大豆生育期相关基因的分子克隆第21-23页
            (一)大豆生育期E1 基因的分子克隆第21-22页
            (二)大豆生育期E2 基因的分子克隆第22-23页
            (三)大豆光敏色素基因E3 和E4 基因的分子克隆第23页
        四、植物启动子研究进展第23-27页
            (一)启动子的种类第23-24页
            (二)启动子的顺式作用元件第24-25页
            (三)植物基因光反应元件第25-27页
第二章 大豆E1 基因的表达节律研究第27-34页
    第一节 材料与方法第27-29页
        一、试验材料和材料处理第27页
        二、试验方法第27-29页
    第二节 试验结果和分析第29-33页
        一、总RNA的提取和反转录第29-31页
        二、PCR检测第31-33页
    第三节 本章小结第33-34页
第三章大豆E1 基因上游序列分析及酵母单杂交筛选上游结合因子第34-69页
    第一节 材料与方法第34-50页
        一、试验材料第34-38页
            (一)载体构建相关材料第34-36页
            (二)转化拟南芥相关材料第36-37页
            (三)酵母单杂交相关材料第37-38页
            (四)生物软件和数据库第38页
        二、试验方法第38-50页
            (一)载体构建第38-42页
            (二)转化拟南芥第42-44页
            (三)转基因拟南芥的表达分析第44-46页
            (四)酵母单杂交筛库第46-50页
    第二节 试验结果与分析第50-67页
        一、E1 基因上游序列生物信息学分析第50-59页
            (一)E1 基因上游序列比对第50-56页
            (二)E1 基因上游序列顺式作用元件分析第56-59页
        二、大豆E1 基因 5’侧翼序列缺失表达分析第59-63页
            (一)不同区段植物表达载体的构建第59-60页
            (二)冻融法转化农杆菌第60-61页
            (三)拟南芥抗性植株的筛选第61-62页
            (四)转基因拟南芥的表达分析第62-63页
        三、酵母单杂文库筛选第63-67页
            (一)诱饵载体构建第63-64页
            (二)诱饵载体自激活验证及 3-AT浓度的确定第64-65页
            (三)阳性克隆确定和测序第65-67页
    第三节 本章小结第67-69页
第四章 不同遗传背景影响E1 基因表达量第69-85页
    第一节 材料与方法第69-72页
        一、试验材料第69-70页
            (一)植物材料第69页
            (二)试验试剂第69-70页
            (三)数据分析软件第70页
        二、试验方法第70-72页
            (一)开花期的调查第70页
            (二)DNA提取第70-71页
            (三)RNA提取及检测第71页
            (四)qRT-PCR检测E1 基因表达量第71页
            (五)E2、E3 和E4 基因的基因型鉴定第71-72页
            (六)数据分析第72页
    第二节 结果与分析第72-83页
        一、E1 基因表达量与开花期的关系第72-74页
            (一)E1(e1-as)基因表达量与开花期呈负相关第72-74页
            (二)杂交群体中E1 基因表达量与开花期呈负相关第74页
        二、不同E2、E3、E4 基因型与E1 基因表达量的关系第74-81页
            (一)不同基因型组合的植株中E1 基因的表达量第74-75页
            (二)E2、E3、E4 基因型与E1 基因表达量的关系第75-78页
            (三)不同E3、E4 基因型组合与E1 基因表达量的关系第78-79页
            (四)不同E2、E3、E4 基因型与开花期的关系第79-81页
        三、其他开花基因表达量与E1 基因的表达量和开花期的关系第81-83页
    第三节 本章小结第83-85页
第五章 e1-b3a亚细胞定位及功能验证第85-94页
    第一节 材料和方法第85-87页
        一、试验材料第85页
        二、试验方法第85-87页
            (一)e1-b3a基因型的鉴定第85页
            (二)e1-b3a亚细胞定位第85-86页
            (三)开花期的调查第86页
            (四)数据分析第86-87页
    第二节 试验结果与分析第87-93页
        一、e1-b3a基因型及CAPS标记第87-89页
            (一)e1-b3a等位变异结构分析第87-88页
            (二)e1-b3a基因型CAPS标记第88-89页
        二、e1-b3a的亚细胞定位第89页
        三、e1-b3a等位变异对开花期的影响第89-93页
    第三节 本章小结第93-94页
讨论第94-102页
结论第102-103页
参考文献第103-111页
发表文章目录第111-112页
致谢第112-113页

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