摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第14-27页 |
第一节 选题背景与意义 | 第14-16页 |
第二节 国内外研究进展 | 第16-27页 |
一、植物光周期途径及其分子调控研究进展 | 第16-20页 |
(一)植物光周期途径是重要的开花调控途径 | 第16页 |
(二)光周期反应与大豆生长适应性相关 | 第16-18页 |
(三)光周期途径分子调控机制研究进展 | 第18-20页 |
二、大豆生育期基因的功能和QTL定位 | 第20-21页 |
(一)大豆生育期基因的功能 | 第20页 |
(二)大豆生育期基因的QTL定位 | 第20-21页 |
三、大豆生育期相关基因的分子克隆 | 第21-23页 |
(一)大豆生育期E1 基因的分子克隆 | 第21-22页 |
(二)大豆生育期E2 基因的分子克隆 | 第22-23页 |
(三)大豆光敏色素基因E3 和E4 基因的分子克隆 | 第23页 |
四、植物启动子研究进展 | 第23-27页 |
(一)启动子的种类 | 第23-24页 |
(二)启动子的顺式作用元件 | 第24-25页 |
(三)植物基因光反应元件 | 第25-27页 |
第二章 大豆E1 基因的表达节律研究 | 第27-34页 |
第一节 材料与方法 | 第27-29页 |
一、试验材料和材料处理 | 第27页 |
二、试验方法 | 第27-29页 |
第二节 试验结果和分析 | 第29-33页 |
一、总RNA的提取和反转录 | 第29-31页 |
二、PCR检测 | 第31-33页 |
第三节 本章小结 | 第33-34页 |
第三章大豆E1 基因上游序列分析及酵母单杂交筛选上游结合因子 | 第34-69页 |
第一节 材料与方法 | 第34-50页 |
一、试验材料 | 第34-38页 |
(一)载体构建相关材料 | 第34-36页 |
(二)转化拟南芥相关材料 | 第36-37页 |
(三)酵母单杂交相关材料 | 第37-38页 |
(四)生物软件和数据库 | 第38页 |
二、试验方法 | 第38-50页 |
(一)载体构建 | 第38-42页 |
(二)转化拟南芥 | 第42-44页 |
(三)转基因拟南芥的表达分析 | 第44-46页 |
(四)酵母单杂交筛库 | 第46-50页 |
第二节 试验结果与分析 | 第50-67页 |
一、E1 基因上游序列生物信息学分析 | 第50-59页 |
(一)E1 基因上游序列比对 | 第50-56页 |
(二)E1 基因上游序列顺式作用元件分析 | 第56-59页 |
二、大豆E1 基因 5’侧翼序列缺失表达分析 | 第59-63页 |
(一)不同区段植物表达载体的构建 | 第59-60页 |
(二)冻融法转化农杆菌 | 第60-61页 |
(三)拟南芥抗性植株的筛选 | 第61-62页 |
(四)转基因拟南芥的表达分析 | 第62-63页 |
三、酵母单杂文库筛选 | 第63-67页 |
(一)诱饵载体构建 | 第63-64页 |
(二)诱饵载体自激活验证及 3-AT浓度的确定 | 第64-65页 |
(三)阳性克隆确定和测序 | 第65-67页 |
第三节 本章小结 | 第67-69页 |
第四章 不同遗传背景影响E1 基因表达量 | 第69-85页 |
第一节 材料与方法 | 第69-72页 |
一、试验材料 | 第69-70页 |
(一)植物材料 | 第69页 |
(二)试验试剂 | 第69-70页 |
(三)数据分析软件 | 第70页 |
二、试验方法 | 第70-72页 |
(一)开花期的调查 | 第70页 |
(二)DNA提取 | 第70-71页 |
(三)RNA提取及检测 | 第71页 |
(四)qRT-PCR检测E1 基因表达量 | 第71页 |
(五)E2、E3 和E4 基因的基因型鉴定 | 第71-72页 |
(六)数据分析 | 第72页 |
第二节 结果与分析 | 第72-83页 |
一、E1 基因表达量与开花期的关系 | 第72-74页 |
(一)E1(e1-as)基因表达量与开花期呈负相关 | 第72-74页 |
(二)杂交群体中E1 基因表达量与开花期呈负相关 | 第74页 |
二、不同E2、E3、E4 基因型与E1 基因表达量的关系 | 第74-81页 |
(一)不同基因型组合的植株中E1 基因的表达量 | 第74-75页 |
(二)E2、E3、E4 基因型与E1 基因表达量的关系 | 第75-78页 |
(三)不同E3、E4 基因型组合与E1 基因表达量的关系 | 第78-79页 |
(四)不同E2、E3、E4 基因型与开花期的关系 | 第79-81页 |
三、其他开花基因表达量与E1 基因的表达量和开花期的关系 | 第81-83页 |
第三节 本章小结 | 第83-85页 |
第五章 e1-b3a亚细胞定位及功能验证 | 第85-94页 |
第一节 材料和方法 | 第85-87页 |
一、试验材料 | 第85页 |
二、试验方法 | 第85-87页 |
(一)e1-b3a基因型的鉴定 | 第85页 |
(二)e1-b3a亚细胞定位 | 第85-86页 |
(三)开花期的调查 | 第86页 |
(四)数据分析 | 第86-87页 |
第二节 试验结果与分析 | 第87-93页 |
一、e1-b3a基因型及CAPS标记 | 第87-89页 |
(一)e1-b3a等位变异结构分析 | 第87-88页 |
(二)e1-b3a基因型CAPS标记 | 第88-89页 |
二、e1-b3a的亚细胞定位 | 第89页 |
三、e1-b3a等位变异对开花期的影响 | 第89-93页 |
第三节 本章小结 | 第93-94页 |
讨论 | 第94-102页 |
结论 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-111页 |
发表文章目录 | 第111-112页 |
致谢 | 第112-113页 |