| 摘要 | 第8-13页 |
| ABSTRACT | 第13-19页 |
| 符号说明及缩略词 | 第20-22页 |
| 第一章 绪论 | 第22-46页 |
| 1.1 木质纤维素的真菌降解转化 | 第22-27页 |
| 1.1.1 降解木质纤维素的真菌 | 第22-24页 |
| 1.1.2 真菌木质纤维素降解酶的酶系组成及降解机制 | 第24-26页 |
| 1.1.3 木质纤维素酶系改良优化 | 第26-27页 |
| 1.2 真菌木质纤维素降解酶的合成对碳源及其它因素的响应 | 第27-32页 |
| 1.2.1 碳降解物阻遏 | 第28-29页 |
| 1.2.2 木质纤维素降解酶的诱导 | 第29-31页 |
| 1.2.3 其它因素的影响 | 第31-32页 |
| 1.3 真菌木质纤维素降解酶的转录调控机制 | 第32-41页 |
| 1.3.1 真菌转录复合物 | 第32-33页 |
| 1.3.2 转录调控因子 | 第33-41页 |
| 1.4 草酸青霉在木质纤维素降解中的应用及研究进展 | 第41-44页 |
| 1.4.1 草酸青霉菌株的筛选及进化 | 第41-42页 |
| 1.4.2 草酸青霉的研究进展 | 第42-44页 |
| 1.5 本文的立题依据和研究目的 | 第44-46页 |
| 第二章 草酸青霉突变子胞外水解酶系进化和转录因子的差异表达 | 第46-70页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第46-55页 |
| 2.1.1 菌株及培养条件 | 第46-47页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第47-48页 |
| 2.1.3 主要分子试剂及试剂盒 | 第48页 |
| 2.1.4 实验常用试剂 | 第48-49页 |
| 2.1.5 实验主要仪器 | 第49-50页 |
| 2.1.6 主要分子生物学操作方法 | 第50-53页 |
| 2.1.7 胞外水解酶活力及胞外蛋白浓度测定 | 第53-54页 |
| 2.1.8 主要水解酶基因表达水平的测定 | 第54页 |
| 2.1.9 草酸青霉CreA、XlnR和AceA的鉴定及序列比对 | 第54-55页 |
| 2.1.10 转录因子编码基因表达水平的测定 | 第55页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第55-67页 |
| 2.2.1 草酸青霉野生株114-2与突变株JU-A10、JU-A10-T的酶系组成差异 | 第55-58页 |
| 2.2.2 草酸青霉转录因子CreA、XlnR及AceA的鉴定与分析 | 第58-63页 |
| 2.2.3 转录因子creA、xlnR及aceA碳源差异表达分析 | 第63-66页 |
| 2.2.4 转录因子creA、xlnR及aceA在野生株114-2和高产突变子JU-A10、JU-A10-T中的差异表达 | 第66-67页 |
| 2.3 本章小结 | 第67-70页 |
| 第三章 草酸青霉碳降解物阻遏因子CreA的功能研究 | 第70-108页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第70-82页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第70-71页 |
| 3.1.2 PCR引物 | 第71-72页 |
| 3.1.3 培养基和培养条件 | 第72-73页 |
| 3.1.4 主要分子实验试剂和常用试剂 | 第73-75页 |
| 3.1.5 分子生物学操作方法 | 第75-77页 |
| 3.1.6 突变菌株的构建 | 第77-78页 |
| 3.1.7 生长及碳源利用分析 | 第78-79页 |
| 3.1.8 胞外水解酶活力测定 | 第79页 |
| 3.1.9 主要水解酶及转录因子编码基因表达水平的测定 | 第79-80页 |
| 3.1.10 表达谱测序数据分析 | 第80-81页 |
| 3.1.11 CreA蛋白DNA结合结构域的异源表达及纯化 | 第81页 |
| 3.1.12 EMSA分析调控蛋白与启动子的体外结合 | 第81-82页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第82-106页 |
| 3.2.1 草酸青霉114-2中CreA调控木质纤维素酶的合成 | 第82-89页 |
| 3.2.2 草酸青霉JU-A10中CreA-1对其木质纤维素酶高产的影响 | 第89-94页 |
| 3.2.3 表达谱测序技术揭示CreA在草酸青霉木质纤维素降解和生长发育过程中的作用 | 第94-102页 |
| 3.2.4 草酸青霉CreA与纤维素酶启动子的体外结合 | 第102-106页 |
| 3.3 本章小结 | 第106-108页 |
| 第四章 草酸青霉转录激活因子XlnR在纤维素酶及半纤维素酶合成调控中的作用研究 | 第108-126页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第108-112页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第108-109页 |
| 4.1.2 培养基和培养条件 | 第109页 |
| 4.1.3 PCR引物 | 第109-110页 |
| 4.1.4 主要分子试剂和常用试剂 | 第110页 |
| 4.1.5 分子生物学操作方法 | 第110页 |
| 4.1.6 突变菌株的构建 | 第110-111页 |
| 4.1.7 生长及碳源利用分析 | 第111页 |
| 4.1.8 木质纤维素酶活力、表达水平测定及转录因子表达量测定 | 第111-112页 |
| 4.1.9 EMSA检测XlnR蛋白DNA结合结构域与启动子序列的结合 | 第112页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第112-124页 |
| 4.2.1 草酸青霉114-2中XlnR缺失及过表达菌株的构建 | 第112-114页 |
| 4.2.2 XlnR明显参与了草酸青霉对木聚糖的利用 | 第114-117页 |
| 4.2.3 XlnR调控草酸青霉木质纤维素降解酶的表达 | 第117-120页 |
| 4.2.4 草酸青霉XlnR与木质纤维素降解酶基因启动子的体外结合 | 第120-124页 |
| 4.3 本章小结 | 第124-126页 |
| 第五章 转录因子AceA在草酸青霉生长发育和胞外多聚糖水解酶系合成调控中的作用研究 | 第126-150页 |
| 5.1 实验材料与方法 | 第126-131页 |
| 5.1.1 菌株、质粒及 培养条件 | 第126-127页 |
| 5.1.2 PCR引物 | 第127-128页 |
| 5.1.3 主要实验仪器、常用试剂和分子生物学操作方法 | 第128页 |
| 5.1.4 AceA相关突变菌株的构建 | 第128-130页 |
| 5.1.5 生长及碳源利用分析 | 第130-131页 |
| 5.1.6 木质纤维素酶活力、表达水平测定及转录因子表达量测定 | 第131页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第131-147页 |
| 5.2.1 草酸青霉114-2中AceA缺失与回补菌株的构建 | 第131-133页 |
| 5.2.2 AceA调控草酸青霉的生长发育过程 | 第133-136页 |
| 5.2.3 AceA在草酸青霉碳源利用中的功能 | 第136-137页 |
| 5.2.4 AceA影响草酸青霉纤维素酶的合成 | 第137-138页 |
| 5.2.5 AceA调控木质纤维素酶基因的表达 | 第138-140页 |
| 5.2.6 草酸青霉AceA与里氏木霉ACE1存在调控功能差异 | 第140-146页 |
| 5.2.7 AceA通过调控AmyR的合成量来调控淀粉酶基因的表达 | 第146-147页 |
| 5.3 本章小结 | 第147-150页 |
| 第六章 草酸青霉未知蛋白PDE_01461对木质纤维素降解酶系的调控及在菌株改良中的应用 | 第150-162页 |
| 6.1 实验材料与方法 | 第151-154页 |
| 6.1.1 菌株、质粒及培养条件 | 第151页 |
| 6.1.2 PCR引物 | 第151-152页 |
| 6.1.3 常用试剂和分子生物学操作方法 | 第152页 |
| 6.1.4 突变菌株的构建 | 第152-153页 |
| 6.1.5 木质纤维素酶活力、表达水平测定 | 第153-154页 |
| 6.2 结果与讨论 | 第154-159页 |
| 6.2.1 PDE_01641的鉴定与序列分析 | 第154-155页 |
| 6.2.2 草酸青霉114-2中PDE_01641的敲除及回补 | 第155-156页 |
| 6.2.3 PDE_01641对草酸青霉木质纤维素降解酶活力的影响 | 第156-157页 |
| 6.2.4 PDE_01641对草酸青霉木质纤维素降解酶基因表达的影响 | 第157-158页 |
| 6.2.5 草酸青霉JU-A10-T中PDE_01641的敲除 | 第158-159页 |
| 6.3 本章小结 | 第159-162页 |
| 全文总结 | 第162-166页 |
| 参考文献 | 第166-186页 |
| 在读期间发表和撰写的学术论文 | 第186-188页 |
| 致谢 | 第188-189页 |
| 附件 | 第189-194页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第194页 |
