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2001~2016年间华东地区IBV分子流行病学、致病性及S1蛋白的天然免疫应答研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
中英对照缩略词第16-18页
第一部分 文献综述第18-90页
    综述一 传染性支气管炎病毒研究进展第18-44页
        1 病原学第18-31页
            1.1 发现、命名与分类第18-19页
            1.2 生物学特性第19-20页
            1.3 基因组结构与主要功能蛋白第20-23页
            1.4 生活周期第23-27页
            1.5 致病机理第27-28页
            1.6 毒株分型第28-31页
        2 流行病学第31-33页
            2.1 自然宿主第31-32页
            2.2 实验室宿主第32-33页
            2.3 传播方式第33页
        3 临床症状及病理变化第33-36页
            3.1 呼吸道第33-34页
            3.2 肾脏第34-35页
            3.3 生殖道第35-36页
            3.4 消化道第36页
            3.5 其它第36页
        4 诊断第36-40页
            4.1 病原的分离鉴定第36-37页
            4.2 血清学诊断技术第37-38页
            4.3 分子生物学检测技术第38-40页
        5 防治第40-44页
            5.1 免疫预防第40-43页
            5.2 治疗第43-44页
    综述二 传染性支管炎病毒在世界范围内流行现状第44-54页
        1 亚洲国家IBV流行现状第44-48页
        2 欧洲国家IBV流行现状第48-50页
        3 非洲国家IBV流行现状第50-51页
        4 北美洲国家IBV流行现状第51-52页
        5 南美洲国家IBV流行现状第52-53页
        6 大洋洲国家IBV流行现状第53-54页
    综述三 禽冠状病毒纤突蛋白研究进展第54-65页
        1 禽冠状病毒S蛋白概述第54-56页
            1.1 结构特点第54-55页
            1.2 序列多样性第55-56页
            1.3 其它禽类冠状病毒S蛋白第56页
        2 禽冠状病毒S蛋白功能第56-59页
            2.1 组织吸附中的作用第56-58页
            2.2 细胞亲和性中的作用第58页
            2.3 体内组织嗜性与致病性中的作用第58-59页
        3 病毒吸附中宿主影响因素第59-62页
            3.1 唾液酸第59-60页
            3.2 蛋白受体第60-61页
            3.3 凝集素第61页
            3.4 硫酸肝素第61-62页
            3.5 宿主蛋白酶第62页
        4 禽冠状病毒S蛋白引起宿主天然免疫反应第62-65页
    参考文献第65-90页
第二部分 研究内容第90-176页
    第一章 2001~2016年间华东地区传染性支气管炎病毒分子流行病学分析第90-120页
        1 材料第91-93页
            1.1 生物材料第91页
            1.2 试剂与载体第91-92页
            1.3 主要试剂溶液配制第92-93页
            1.4 主要仪器第93页
        2 方法第93-106页
            2.1 引物设计第93页
            2.2 病毒增殖第93-94页
            2.3 病毒总RNA提取第94页
            2.4 S1基因扩增与序列测定第94-96页
            2.5 S1基因序列分析第96-106页
        3 结果第106-116页
            3.1 病毒分离结果第106-107页
            3.2 分离株S1蛋白长度与裂解位点的多样性第107-109页
            3.3 分离株S1基因分型的多样性第109-112页
            3.4 新分支New-Ⅰ与New-Ⅱ基因型IBV S1基因的来源第112-116页
        4 讨论第116-120页
    第二章 2001~2016年间我国传染性支气管炎病毒基因组序列重组分析第120-142页
        1 材料第121-122页
            1.1 生物材料第121页
            1.2 试剂与载体第121页
            1.3 主要试剂溶液配制第121-122页
            1.4 主要仪器第122页
        2 方法第122-129页
            2.1 分离株全序列扩增引物设计第122页
            2.2 分离株全基因组序列RT-PCR第122页
            2.3 病毒基因组5'与3'端序列扩增第122-127页
            2.4 分离株基因组序列测定与分析第127-129页
        3 结果第129-136页
            3.1 分离株基因组结构第129页
            3.2 分离株CK/CH/2010/JT-1基因组的重组来源第129-133页
            3.3 分离株CK/CH/2014/QL1403基因组的重组来源第133-135页
            3.4 我国2001~2016年间IBV基因组重组现象普遍第135-136页
        4 讨论第136-142页
    第三章 我国鸡传染性支气管炎病毒分离株致病性分析及交叉保护研究第142-154页
        1 材料第143-144页
            1.1 生物材料第143页
            1.2 主要试剂第143页
            1.3 主要仪器第143-144页
        2 方法第144-146页
            2.1 病毒扩增第144页
            2.2 SPF鸡致病性实验第144页
            2.3 病毒中和实验第144-145页
            2.4 交叉保护实验第145页
            2.5 鸡IBV血清抗体ELISA第145-146页
        3 结果第146-150页
            3.1 IBV分离株致病性第146-148页
            3.2 交叉中和实验结果第148-149页
            3.3 天然弱毒CK/CH/2014/QL1403对QX型IBV交叉保护实验第149-150页
        4 讨论第150-154页
    第四章 传染性支气管炎病毒S1蛋白的天然免疫应答研究第154-170页
        1 材料第156-157页
            1.1 生物材料第156页
            1.2 试剂与载体第156页
            1.3 主要试剂溶液配制第156-157页
            1.4 主要仪器第157页
        2 方法第157-162页
            2.1 引物设计第157-158页
            2.2 真核表达载体的构建第158-159页
            2.3 CEKC的制备第159-160页
            2.4 CEKC的质粒转染第160页
            2.5 共聚焦显微镜荧光分析第160-161页
            2.6 Western-blot第161页
            2.7 荧光定量PCR方法检测相关因子第161-162页
            2.8 统计学分析第162页
        3 结果第162-167页
            3.1 S1基因RT-PCR扩增结果第162-163页
            3.2 重组质粒酶切鉴定第163页
            3.3 重组质粒转染CEKC后S1蛋白的表达第163-164页
            3.4 IBV S1蛋白引起CEKC天然免疫相关因子表达差异第164-165页
            3.5 配体刺激后IBV S1蛋白引起CEKC天然免疫相关因子表达差异第165-167页
        4 讨论第167-170页
    参考文献第170-176页
全文总结第176-177页
致谢第177-178页
攻读博士期间所获成果第178-179页

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