| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 β-内酰胺酶的研究概述 | 第10-14页 |
| 1.1.1 β-内酰胺酶的定义 | 第10页 |
| 1.1.2 β-内酰胺酶的分类 | 第10-13页 |
| 1.1.3 常见产β-内酰胺酶的菌株 | 第13-14页 |
| 1.1.4 β-内酰胺酶的作用机制 | 第14页 |
| 1.2 蜡样芽孢杆菌的特性及产青霉素酶的性质 | 第14-15页 |
| 1.2.1 蜡状芽孢杆菌概述 | 第14页 |
| 1.2.2 蜡状芽孢杆菌产青霉素酶的性质 | 第14-15页 |
| 1.3 青霉素酶的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 青霉素生产及其废弃物 | 第16页 |
| 1.5 青霉素酶在青霉素废菌渣中应用的可行性分析 | 第16-17页 |
| 1.5.1 青霉素菌渣的危害 | 第16页 |
| 1.5.2 青霉素菌渣处理方法 | 第16-17页 |
| 1.5.3 可行性分析 | 第17页 |
| 1.6 本课题的科学意义与应用前景 | 第17-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-29页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器设备 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌种 | 第19页 |
| 2.1.2 培养基 | 第19页 |
| 2.1.3 主要设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 青霉素酶测定方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 待测酶液的制备 | 第21页 |
| 2.2.2 碘量法测定青霉素酶的酶活 | 第21-22页 |
| 2.2.3 羟胺法测定青霉素酶的酶活 | 第22-23页 |
| 2.3 青霉素酶的发酵实验 | 第23-25页 |
| 2.3.1 kd-01菌株的活化 | 第23页 |
| 2.3.2 液体摇瓶种子的制备 | 第23页 |
| 2.3.3 kd-01菌株发酵培养 | 第23-24页 |
| 2.3.4 kd-01菌株紫外诱变处理 | 第24页 |
| 2.3.5 发酵培养基条件优化试验 | 第24-25页 |
| 2.3.6 菌种保藏及传代试验 | 第25页 |
| 2.3.7 分析方法 | 第25页 |
| 2.4 无菌青霉素酶的制备 | 第25页 |
| 2.5 青霉素菌渣的检测 | 第25-29页 |
| 2.5.1 青霉素菌渣中氮的测定方法 | 第26页 |
| 2.5.2 青霉素菌渣中磷的测定方法 | 第26-27页 |
| 2.5.3 青霉素菌渣中钾的测定方法 | 第27-28页 |
| 2.5.4 青霉素菌渣中青霉素残留的测定方法 | 第28-29页 |
| 第3章 青霉素酶的特性及检测方法 | 第29-35页 |
| 3.1 温度对酶活力的影响 | 第29页 |
| 3.2 PH对酶活力的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 青霉素酶的稳定性 | 第30页 |
| 3.4 青霉素酶的SDS-PAGE检测 | 第30-31页 |
| 3.5 青霉素酶酶活的测定 | 第31-34页 |
| 3.5.1 羟胺与青霉素反应成明显的显色现象 | 第31-32页 |
| 3.5.2 羟胺法测定青霉素含量的标准曲线 | 第32页 |
| 3.5.3 青霉素酶的羟胺法测定 | 第32页 |
| 3.5.4 羟胺法显色的稳定性 | 第32-33页 |
| 3.5.5 羟胺法与碘量法测青霉素酶活力的比较 | 第33-34页 |
| 3.6 本章小结 | 第34-35页 |
| 第4章 青霉素酶菌种的紫外诱变及发酵条件优化 | 第35-49页 |
| 4.1 蜡样芽孢杆菌菌株的紫外诱变 | 第35-37页 |
| 4.1.1 紫外线诱变时间和存活率的关系 | 第35-36页 |
| 4.1.2 紫外线诱变(35s)结果 | 第36-37页 |
| 4.1.3 紫外线诱变高产菌株性能稳定性试验 | 第37页 |
| 4.2 kd-02菌株发酵优化的结果 | 第37-45页 |
| 4.2.1 接种量对发酵结果的影响 | 第37-38页 |
| 4.2.2 温度对发酵结果的影响 | 第38页 |
| 4.2.3 发酵培养基PH对发酵产酶的影响 | 第38-39页 |
| 4.2.4 不同通气量对发酵产酶的影响 | 第39页 |
| 4.2.5 培养基对发酵结果的影响 | 第39-43页 |
| 4.2.6 产酶促进剂对菌株产青霉素酶的影响 | 第43-44页 |
| 4.2.7 葡萄糖含量对青霉素酶发酵结果的影响 | 第44页 |
| 4.2.8 工业蛋白胨对青霉素酶发酵结果的影响 | 第44页 |
| 4.2.9 硫酸铵含量对青霉素酶发酵结果的影响 | 第44-45页 |
| 4.3 青霉素酶发酵过程检测 | 第45-47页 |
| 4.3.1 kd-02发酵过程的生长曲线 | 第45页 |
| 4.3.2 kd-02菌株在发酵过程中形态的变化 | 第45-47页 |
| 4.3.3 kd-02产优化后的培养基发酵产青霉素酶的稳定性 | 第47页 |
| 4.4 无菌青霉素酶的制备 | 第47页 |
| 4.5 本章小结 | 第47-49页 |
| 第5章 青霉素酶在青霉素菌渣无害化中的应用 | 第49-56页 |
| 5.1 测定青霉素类物质含量的方法介绍 | 第49-50页 |
| 5.1.1 高效液相色谱法测定青霉素类物质含量 | 第49页 |
| 5.1.2 恒电流库仑分析法测定青霉素类物质含量 | 第49页 |
| 5.1.3 流动注射化学发光法测定青霉素类物质含 | 第49-50页 |
| 5.1.4 线性扫描极谱法测定青霉素类物质含量 | 第50页 |
| 5.2 青霉素菌渣中氮的测定结果 | 第50页 |
| 5.3 青霉素菌渣中磷的测定结果 | 第50-51页 |
| 5.3.1 磷标准曲线的制作 | 第50-51页 |
| 5.3.2 青霉素菌渣中磷的测定结果 | 第51页 |
| 5.4 青霉素菌渣中钾的测定结果 | 第51-52页 |
| 5.4.1 钾标准曲线的制备 | 第51页 |
| 5.4.2 青霉素菌渣中钾的测定结果 | 第51-52页 |
| 5.5 青霉素酶检测青霉素菌渣中青霉素残留 | 第52-53页 |
| 5.5.1 青霉素钠标准曲线的制备 | 第52页 |
| 5.5.2 青霉素菌渣中青霉素残留的检测 | 第52-53页 |
| 5.6 青霉素酶的用量选择 | 第53-54页 |
| 5.6.1 青霉素酶降解青霉素钠成品 | 第53页 |
| 5.6.3 青霉素酶降解青霉素菌渣 | 第53-54页 |
| 5.7 成本计算 | 第54页 |
| 5.8 本章小结 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |