摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
1.1 植物热激蛋白的相关研究及应用 | 第11-15页 |
1.1.1 植物热激蛋白的特点 | 第11-12页 |
1.1.2 热激蛋白与植物的抗逆性 | 第12-14页 |
1.1.3 HSP100家族蛋白的研究现状 | 第14-15页 |
1.1.4 热激蛋白基因在植物耐热性状改良上的应用 | 第15页 |
1.2 草地早熟禾的生物学特性 | 第15-16页 |
1.3 草地早熟禾转基因技术研究进展 | 第16-20页 |
1.3.1 草地早熟禾遗传转化的受体体系 | 第16-19页 |
1.3.2 早熟禾遗传转化方法 | 第19-20页 |
1.4 草地早熟禾的耐热性研究 | 第20-21页 |
1.5 耐热性早熟禾的利用前景及研究意义 | 第21-22页 |
1.6 工作的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-33页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 农杆菌菌株和质粒 | 第23页 |
2.1.3 药品、试剂和溶液 | 第23-24页 |
2.1.4 培养基 | 第24-25页 |
2.2 方法 | 第25-33页 |
2.2.1 早熟禾芽尖转化受体体系的建立 | 第25-26页 |
2.2.2 潮霉素筛选浓度的确定 | 第26页 |
2.2.3 农杆菌的培养 | 第26页 |
2.2.4 农杆菌介导的草地早熟禾的遗传转化 | 第26-27页 |
2.2.5 抗性芽的扩增培养 | 第27-28页 |
2.2.6 抗性芽的生根及移栽 | 第28页 |
2.2.7 转基因植株的分子生物学检测。 | 第28-30页 |
2.2.8 转基因阳性小芽的耐热性分析 | 第30-33页 |
3 结果与分析 | 第33-49页 |
3.1 早熟禾丛生芽离体培养体系的建立 | 第33-36页 |
3.1.1 无菌种子苗的获得 | 第33页 |
3.1.2 茎尖基部膨大的诱导 | 第33-35页 |
3.1.3 丛生芽的诱导 | 第35-36页 |
3.1.3 丛生芽的继代培养 | 第36页 |
3.2 潮霉素筛选浓度的确定 | 第36-37页 |
3.3 转化植株的获得 | 第37-38页 |
3.4 转化植株的PCR和PCR-Southern检测 | 第38-39页 |
3.5 影响农杆菌介导的草地早熟禾芽尖转化率的因素 | 第39-43页 |
3.5.1 农杆菌浸染对芽尖存活率的影响 | 第39-40页 |
3.5.2 农杆菌菌液浓度对转化率的影响 | 第40页 |
3.5.3 真空渗透对草地早熟禾转化频率的影响 | 第40-41页 |
3.5.4 负压处理时间对草地早熟禾转化频率的影响 | 第41-42页 |
3.5.5 乙酰丁香酮对草地早熟禾转化频率的影响 | 第42-43页 |
3.6 转基因小芽的耐热性分析 | 第43-49页 |
3.6.1 瞬时耐热性分析 | 第43-48页 |
3.6.2 叶片中游离脯氨酸含量的测定 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 草地早熟禾芽尖转化受体体系建立的意义 | 第49页 |
4.2 影响草地早熟禾丛生芽高频发生的因素 | 第49-50页 |
4.3 农杆菌介导的草地早熟禾遗传转化体系的优化 | 第50-51页 |
4.4 转hsp101基因的草地早熟禾的耐热性 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60页 |