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海南竹柏扁枝病病原分子生物学鉴定研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 文献综述第10-21页
    1.1 植原体的概述第10-13页
        1.1.1 植原体的发现第10-11页
        1.1.2 植原体的形态结构与生理特征第11-12页
        1.1.3 植原体的致病机理第12页
        1.1.4 植原体的病害传播第12页
        1.1.5 植原体的防治方法第12-13页
    1.2 植原体分类的研究进展第13-15页
        1.2.1 植原体的系统进化地位第13-14页
        1.2.2 基于生物学特征进行分类第14页
        1.2.3 基于16SrRNA和核糖体蛋白rp基因进行分类第14页
        1.2.4 基于延伸因子tuf进行分类第14-15页
        1.2.5 基于Sec基因进行分类第15页
    1.3 植原体的检测与诊断研究进展第15-20页
        1.3.1 电子显微镜检测法第16页
        1.3.2 组织化学检测法第16页
        1.3.3 激光共聚焦显微检测法第16-17页
        1.3.4 血清学检测法第17页
        1.3.5 核酸杂交检测法第17-18页
        1.3.6 PCR检测法第18-20页
    1.4 本研究的主要内容与技术路线第20-21页
2、海南竹柏扁枝病的发生与症状第21-23页
3、海南竹柏扁枝病病原的显微检测鉴定第23-32页
    3.1 材料第23-25页
        3.1.1 植物材料第23页
        3.1.2 主要试剂第23页
        3.1.3 相关试剂配制方法第23-25页
        3.1.4 实验耗材第25页
        3.1.5 实验仪器第25页
    3.2 实验方法第25-28页
        3.2.1 取材第25-26页
        3.2.2 固定第26页
        3.2.3 清洗第26页
        3.2.4 后固定第26页
        3.2.5 脱水第26页
        3.2.6 过渡第26页
        3.2.7 渗透第26页
        3.2.8 包埋聚合第26-27页
        3.2.9 修片第27页
        3.2.10 半薄切片第27页
        3.2.11 脱树脂第27页
        3.2.12 DAPI 染色第27页
        3.2.13 超薄切片第27页
        3.2.14 醋酸双氧铀、柠檬酸铅双重染色第27-28页
    3.3 结果与分析第28-30页
        3.3.1 组织化学检测法的荧光显微观测第28-30页
        3.3.2 电子显微镜检测法的形态结构观测第30页
    3.4 结论与讨论第30-32页
4 海南竹柏扁枝病病原植原体的分子检测鉴定第32-50页
    4.1 实验材料第32-33页
        4.1.1 植物材料第32页
        4.1.2 主要试剂第32页
        4.1.3 相关试剂配制方法第32-33页
        4.1.4 主要仪器设备第33页
    4.2 方法第33-40页
        4.2.1 植物总DNA的提取第33-34页
        4.2.2 海南竹柏扁枝病病原植原体16SrRNA基因的PCR扩增第34-35页
        4.2.3 海南竹柏扁枝病病原植原体延伸因子tuf基因的PCR扩增第35-36页
        4.2.4 PCR产物琼脂糖凝胶电泳第36页
        4.2.5 PCR产物的切胶回收纯化第36-37页
        4.2.6 目的基因的克隆第37-38页
        4.2.7 序列分析和系统进化分析第38-39页
        4.2.8 RF1LP 分析第39-40页
    4.3 结果与分析第40-50页
        4.3.1 植原体16SrRNA基因的PCR扩增结果第40-41页
        4.3.2 竹柏扁枝病植原体的16SrRNA基因序列分析第41-42页
        4.3.4 16SrRNA基因同源性分析与系统进化树的构建第42-44页
        4.3.5 16SrRNA基因的虚拟RFLP分析第44-47页
        4.3.6 植原体延伸因子tur基因的PCR扩增结果第47页
        4.3.7 竹柏扁枝病植原体的tuf基因序列分析第47-49页
        4.3.8 tuf基因同源性比较第49-50页
5 结论与讨论第50-52页
参考文献第52-58页
致谢第58页

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