摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 植原体的概述 | 第10-13页 |
1.1.1 植原体的发现 | 第10-11页 |
1.1.2 植原体的形态结构与生理特征 | 第11-12页 |
1.1.3 植原体的致病机理 | 第12页 |
1.1.4 植原体的病害传播 | 第12页 |
1.1.5 植原体的防治方法 | 第12-13页 |
1.2 植原体分类的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.1 植原体的系统进化地位 | 第13-14页 |
1.2.2 基于生物学特征进行分类 | 第14页 |
1.2.3 基于16SrRNA和核糖体蛋白rp基因进行分类 | 第14页 |
1.2.4 基于延伸因子tuf进行分类 | 第14-15页 |
1.2.5 基于Sec基因进行分类 | 第15页 |
1.3 植原体的检测与诊断研究进展 | 第15-20页 |
1.3.1 电子显微镜检测法 | 第16页 |
1.3.2 组织化学检测法 | 第16页 |
1.3.3 激光共聚焦显微检测法 | 第16-17页 |
1.3.4 血清学检测法 | 第17页 |
1.3.5 核酸杂交检测法 | 第17-18页 |
1.3.6 PCR检测法 | 第18-20页 |
1.4 本研究的主要内容与技术路线 | 第20-21页 |
2、海南竹柏扁枝病的发生与症状 | 第21-23页 |
3、海南竹柏扁枝病病原的显微检测鉴定 | 第23-32页 |
3.1 材料 | 第23-25页 |
3.1.1 植物材料 | 第23页 |
3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
3.1.3 相关试剂配制方法 | 第23-25页 |
3.1.4 实验耗材 | 第25页 |
3.1.5 实验仪器 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-28页 |
3.2.1 取材 | 第25-26页 |
3.2.2 固定 | 第26页 |
3.2.3 清洗 | 第26页 |
3.2.4 后固定 | 第26页 |
3.2.5 脱水 | 第26页 |
3.2.6 过渡 | 第26页 |
3.2.7 渗透 | 第26页 |
3.2.8 包埋聚合 | 第26-27页 |
3.2.9 修片 | 第27页 |
3.2.10 半薄切片 | 第27页 |
3.2.11 脱树脂 | 第27页 |
3.2.12 DAPI 染色 | 第27页 |
3.2.13 超薄切片 | 第27页 |
3.2.14 醋酸双氧铀、柠檬酸铅双重染色 | 第27-28页 |
3.3 结果与分析 | 第28-30页 |
3.3.1 组织化学检测法的荧光显微观测 | 第28-30页 |
3.3.2 电子显微镜检测法的形态结构观测 | 第30页 |
3.4 结论与讨论 | 第30-32页 |
4 海南竹柏扁枝病病原植原体的分子检测鉴定 | 第32-50页 |
4.1 实验材料 | 第32-33页 |
4.1.1 植物材料 | 第32页 |
4.1.2 主要试剂 | 第32页 |
4.1.3 相关试剂配制方法 | 第32-33页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第33页 |
4.2 方法 | 第33-40页 |
4.2.1 植物总DNA的提取 | 第33-34页 |
4.2.2 海南竹柏扁枝病病原植原体16SrRNA基因的PCR扩增 | 第34-35页 |
4.2.3 海南竹柏扁枝病病原植原体延伸因子tuf基因的PCR扩增 | 第35-36页 |
4.2.4 PCR产物琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
4.2.5 PCR产物的切胶回收纯化 | 第36-37页 |
4.2.6 目的基因的克隆 | 第37-38页 |
4.2.7 序列分析和系统进化分析 | 第38-39页 |
4.2.8 RF1LP 分析 | 第39-40页 |
4.3 结果与分析 | 第40-50页 |
4.3.1 植原体16SrRNA基因的PCR扩增结果 | 第40-41页 |
4.3.2 竹柏扁枝病植原体的16SrRNA基因序列分析 | 第41-42页 |
4.3.4 16SrRNA基因同源性分析与系统进化树的构建 | 第42-44页 |
4.3.5 16SrRNA基因的虚拟RFLP分析 | 第44-47页 |
4.3.6 植原体延伸因子tur基因的PCR扩增结果 | 第47页 |
4.3.7 竹柏扁枝病植原体的tuf基因序列分析 | 第47-49页 |
4.3.8 tuf基因同源性比较 | 第49-50页 |
5 结论与讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58页 |