| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 糖尿病及治疗方式 | 第12-13页 |
| 1.3 胰岛素 | 第13-19页 |
| 1.3.1 胰岛素简介 | 第13页 |
| 1.3.2 胰岛素的结构 | 第13-14页 |
| 1.3.3 胰岛素的分类 | 第14-16页 |
| 1.3.4 胰岛素的表达系统 | 第16-17页 |
| 1.3.5 胰岛素的分离纯化 | 第17-19页 |
| 1.4 双水相系统和双水相萃取 | 第19-22页 |
| 1.4.1 双水相系统 | 第19-20页 |
| 1.4.2 双水相萃取的发展 | 第20页 |
| 1.4.3 双水相萃取的特点 | 第20-21页 |
| 1.4.4 双水相萃取的应用 | 第21-22页 |
| 1.5 本文研究思路 | 第22-24页 |
| 第二章 双水相苹取从复性浓缩液中提取胰岛素前体 | 第24-44页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 材料和方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 试剂与材料 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第25页 |
| 2.2.3 PEG/硫酸铵双水相系统的相图测定 | 第25页 |
| 2.2.4 BCA法测定总蛋白浓度 | 第25-26页 |
| 2.2.5 RP-HPLC法测定胰岛素前体浓度 | 第26-27页 |
| 2.2.6 PEG和尿素对BCA与RP-HPLC法影响 | 第27-28页 |
| 2.2.7 胰岛素前体复性超滤浓缩液制备 | 第28页 |
| 2.2.8 PEG4000/硫酸铵双水相萃取 | 第28页 |
| 2.2.9 响应面法实验设计及优化 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-42页 |
| 2.3.1 PEG/硫酸铵双水相系统的相图 | 第29-31页 |
| 2.3.2 PEG4000与尿素对BCA法和RP-HPLC法测定的影响 | 第31-33页 |
| 2.3.3 PEG4000/硫酸铵双水相从复性浓缩液中萃取胰岛素前体 | 第33-37页 |
| 2.3.4 双水相萃取胰岛素前体的分离条件分析 | 第37-41页 |
| 2.3.5 双水相萃取胰岛素前体的优化与验证 | 第41-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-44页 |
| 第三章 双水相萃取从包涵体溶解液中直接复性分离胰岛素前体 | 第44-64页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 材料和方法 | 第44-47页 |
| 3.2.1 试剂与材料 | 第44-45页 |
| 3.2.2 主要仪器与设备 | 第45页 |
| 3.2.3 包涵体溶解液(IBD)制备 | 第45页 |
| 3.2.4 复性萃取实验 | 第45页 |
| 3.2.5 尿素对PEG4000/硫酸铵双水相复性萃取胰岛素前体的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.6 两水平因子实验设计筛选条件 | 第46页 |
| 3.2.7 响应面法实验设计及优化 | 第46-47页 |
| 3.2.8 双水相复性萃取最佳条件的验证及与原工艺的比较 | 第47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-62页 |
| 3.3.1 尿素对PEG4000/硫酸铵双水相体系复性萃取胰岛素前体的影响 | 第47-49页 |
| 3.3.2 两水平因子实验设计筛选条件 | 第49-53页 |
| 3.3.3 显著性影响因子的优化设计 | 第53-57页 |
| 3.3.4 双水相复性萃取条件的优化与验证 | 第57-58页 |
| 3.3.5 两种工艺的比较 | 第58-61页 |
| 3.3.6 胰岛素前体的酶切与纯化 | 第61-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-64页 |
| 第四章 结论与建议 | 第64-66页 |
| 4.1 结论 | 第64-65页 |
| 4.2 建议 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
