| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第14-20页 |
| 1 酚类化合物 | 第14-15页 |
| 1.1 植物酚类化合物简介 | 第14-15页 |
| 1.2 酚类化合物与橄榄涩味 | 第15页 |
| 2 金丝桃苷 | 第15-18页 |
| 2.1 金丝桃苷简介 | 第15-16页 |
| 2.2 金丝桃苷的代谢途径 | 第16页 |
| 2.3 果实中金丝桃苷的研究进展 | 第16-17页 |
| 2.4 金丝桃苷生物合成途径中相关酶的研究 | 第17-18页 |
| 3 内参基因的意义与选择 | 第18-19页 |
| 4 该课题研究的目的和意义 | 第19页 |
| 5 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 橄榄果实发育成熟过程中金丝桃苷含量的变化 | 第20-25页 |
| 1 材料与方法 | 第20-22页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 1.1.2 试剂药品 | 第20-21页 |
| 1.2 仪器设备 | 第21页 |
| 1.3 实验方法 | 第21-22页 |
| 1.3.1 多酚的提取与纯化 | 第21页 |
| 1.3.2 标准溶液的配置 | 第21页 |
| 1.3.3 色谱条件 | 第21-22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-24页 |
| 2.1 标准曲线的绘制 | 第22页 |
| 2.2 不同橄榄品种(系)果实中金丝桃苷含量的变化 | 第22-23页 |
| 2.3 不同类型橄榄成熟果实中金丝桃苷含量的差异 | 第23-24页 |
| 3 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 四个橄榄内参基因的克隆与筛选 | 第25-38页 |
| 1 材料与方法 | 第25-31页 |
| 1.1 植物材料 | 第25-26页 |
| 1.2 试剂药品 | 第26页 |
| 1.3 仪器设备 | 第26页 |
| 1.4 实验方法 | 第26-31页 |
| 1.4.1 橄榄果实总RNA的提取与检测 | 第26-27页 |
| 1.4.2 橄榄果实总RNA逆转录 | 第27页 |
| 1.4.3 保守序列引物设计 | 第27-28页 |
| 1.4.4 反应体系 | 第28页 |
| 1.4.5 PCR扩增条件 | 第28页 |
| 1.4.6 PCR产物的回收、连接、转化和测序 | 第28-30页 |
| 1.4.7 qRT-PCR引物设计与筛选 | 第30页 |
| 1.4.8 qRT-PCR运行程序 | 第30页 |
| 1.4.9 内参基因表达数据的分析 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-36页 |
| 2.1 橄榄果肉总RNA提取 | 第31页 |
| 2.2 内参基因的克隆 | 第31-32页 |
| 2.3 内参基因qRT-PCR引物 | 第32-33页 |
| 2.4 候选内参基因在样本内的表达特性 | 第33-34页 |
| 2.5 内参基因稳定性评价 | 第34-36页 |
| 2.5.1 Bestkeeper分析 | 第34-35页 |
| 2.5.2 geNorm分析 | 第35-36页 |
| 2.5.3 NormFinder分析 | 第36页 |
| 2.6 内参基因的选择 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 橄榄果肉中F3'H、F3H、FLS基因的克隆及表达分析 | 第38-72页 |
| 1 材料与方法 | 第38-46页 |
| 1.1 植物材料 | 第38页 |
| 1.2 试剂药品 | 第38-39页 |
| 1.3 仪器设备 | 第39页 |
| 1.4 实验方法 | 第39-46页 |
| 1.4.1 橄榄果实总RNA提取与检测 | 第39页 |
| 1.4.2 橄榄果实总RNA逆转录 | 第39页 |
| 1.4.3 引物设计 | 第39-40页 |
| 1.4.4 保守区cDNA的PCR扩增 | 第40-41页 |
| 1.4.5 3'和5'RACE | 第41-44页 |
| 1.4.6 基因的全长验证 | 第44页 |
| 1.4.7 基因组DNA克隆 | 第44-46页 |
| 1.4.8 生物信息学分析 | 第46页 |
| 1.4.9 qRT-PCR引物设计与筛选 | 第46页 |
| 1.4.10 qRT-PCR运行程序 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-68页 |
| 2.1 F3'H的克隆 | 第47-53页 |
| 2.1.1 F3'H保守序列的获取 | 第47页 |
| 2.1.2 F3'H3'和5'RACE序列的获取 | 第47-48页 |
| 2.1.3 F3'H cDNA和gDNA全长序列获取 | 第48页 |
| 2.1.5 橄榄CaF3'H的序列分析 | 第48-52页 |
| 2.1.6 橄榄CaF3'H编码氨基酸的基本特征 | 第52页 |
| 2.1.7 橄榄CaF3'H基因gDNA和cDNA的比较 | 第52-53页 |
| 2.2 F3H的克隆 | 第53-59页 |
| 2.2.1 F3H保守序列的获取 | 第53页 |
| 2.2.2 F3H3'和5'RACE序列的获取 | 第53-54页 |
| 2.2.3 F3H cDNA和gDNA全长序列获取 | 第54-55页 |
| 2.2.5 橄榄CaF3H的序列分析 | 第55-58页 |
| 2.2.6 橄榄CaF3H编码氨基酸的基本特征 | 第58页 |
| 2.2.7 橄榄CaF3H基因gDNA和cDNA的比较 | 第58-59页 |
| 2.3 FLS的克隆 | 第59-64页 |
| 2.3.1 FLS保守序列的获取 | 第59页 |
| 2.3.2 FLS3'和5'RACE序列的获取 | 第59-60页 |
| 2.3.3 FLS cDNA和gDNA全长序列获取 | 第60页 |
| 2.3.5 橄榄CaFLS的序列分析 | 第60-63页 |
| 2.3.6 橄榄CaFLS编码氨基酸的基本特征 | 第63-64页 |
| 2.3.7 橄榄CaFLS基因gDNA和cDNA的比较 | 第64页 |
| 2.4 目的基因在样本内的表达特性 | 第64-65页 |
| 2.5 目的基因的相对表达量 | 第65-68页 |
| 2.6 相关性分析 | 第68页 |
| 3 讨论 | 第68-72页 |
| 3.1 F3'H、F3H、FLS三个基因的序列信息 | 第68-70页 |
| 3.2 三个基因的表达趋势 | 第70页 |
| 3.3 相关性分析 | 第70-72页 |
| 第五章 总结与展望 | 第72-75页 |
| 1 总结 | 第72-73页 |
| 2 展望 | 第73页 |
| 3 创新点 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 附录A | 第83-84页 |
| 附录B | 第84-87页 |
| 附录C | 第87-91页 |
| 硕士学习期间发表的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
