| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-44页 |
| 第一章 禽致病性大肠杆菌的研究进展 | 第12-32页 |
| 1 病原学 | 第12-13页 |
| 2 流行病学 | 第13-14页 |
| 3 临床类型和病理变化 | 第14页 |
| 4 致病机理 | 第14-15页 |
| 5 大肠杆菌毒力因子 | 第15-24页 |
| ·黏附素 | 第15-17页 |
| ·摄铁系统 | 第17-18页 |
| ·温度敏感性血凝素 | 第18-19页 |
| ·抗血清存活因子 | 第19-22页 |
| ·毒素(Toxin) | 第22-24页 |
| 6 结束语 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-32页 |
| 第二章 大肠杆菌侵袭血脑屏障机理研究 | 第32-44页 |
| 1 血脑屏障的结构 | 第32-33页 |
| 2 大肠杆菌侵袭血脑屏障的过程 | 第33-35页 |
| ·菌血症 | 第33页 |
| ·大肠杆菌粘附于HBMEC | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌侵袭血脑屏障 | 第34页 |
| ·大肠杆菌引起的细胞骨架重排 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌在穿越过程中保持活性 | 第35页 |
| 3 侵袭相关毒力因子 | 第35-39页 |
| ·OmpA | 第36页 |
| ·K1荚膜 | 第36-37页 |
| ·CNF1 | 第37页 |
| ·Ibe蛋白 | 第37-38页 |
| ·Ⅰ型菌毛 | 第38页 |
| ·其他因子 | 第38-39页 |
| 4 结束语 | 第39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 第二篇 试验研究 | 第44-90页 |
| 第三章 侵袭相关基因ibeB、yijP在不同来源大肠杆菌中的分布及序列分析 | 第44-56页 |
| 摘要 | 第44-45页 |
| 1 材料与方法 | 第45-47页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第45页 |
| ·菌株的培养 | 第45页 |
| ·DNA的提取和PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·PCR产物的T/A连接 | 第46页 |
| ·连接产物的转化 | 第46-47页 |
| ·重组质粒的提取与酶切鉴定 | 第47页 |
| ·测序及序列分析 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-51页 |
| ·PCR检测 | 第47-49页 |
| ·克隆载体pMD-T-ibeB、pMD-T-yijP的构建 | 第49页 |
| ·序列分析 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| ABSTRACT | 第54-56页 |
| 第四章 APEC鸭源株DE205B侵袭相关基因ibeB、yijP的克隆表达 | 第56-70页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-63页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·要试剂与仪器 | 第57页 |
| ·实验动物 | 第57页 |
| ·菌株的培养 | 第57页 |
| ·表达菌株的构建与鉴定 | 第57-59页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第59-61页 |
| ·兔抗DE205B全菌血清的制备 | 第61页 |
| ·表达蛋白的纯化与复性 | 第61页 |
| ·纯化蛋白抗血清的制备及多抗效价的测定 | 第61-62页 |
| ·DE205B的侵袭抑制实验 | 第62-63页 |
| 2 结果 | 第63-66页 |
| ·重组质粒的鉴定和蛋白的分析与鉴定 | 第63-64页 |
| ·表达产物的鉴定与纯化 | 第64-65页 |
| ·免疫血清效价的间接ELISA检测 | 第65页 |
| ·侵袭抑制实验 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| ABSTRACT | 第69-70页 |
| 第五章 APEC鸭源株DE205B ibeB基因缺失株的构建及其特性分析 | 第70-90页 |
| 摘要 | 第70-72页 |
| 1 材料与方法 | 第72-79页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·ibeB基因上下游序列的测定 | 第72-73页 |
| ·PCR引物设计和线性打靶DNA的制备 | 第73-74页 |
| ·DE205B电击感受态细胞的制备及电击转化 | 第74页 |
| ·DE205B/pKD46电击感受态细胞的制备及电击转化 | 第74页 |
| ·缺失株的筛选与鉴定 | 第74-75页 |
| ·互补株的构建 | 第75-76页 |
| ·生长曲线的测定 | 第76-77页 |
| ·荧光定量PCR进行表达量分析 | 第77-78页 |
| ·半数致死量(LD50)的测定 | 第78-79页 |
| ·动物感染实验 | 第79页 |
| ·细胞侵袭试验 | 第79页 |
| 2 结果 | 第79-85页 |
| ·线性打靶DNA的制备 | 第80页 |
| ·缺失株的PCR鉴定 | 第80-81页 |
| ·补株的构建 | 第81-82页 |
| ·Real-time PCR | 第82页 |
| ·半数致死量(LD50)的测定 | 第82-83页 |
| ·动物感染试验 | 第83-84页 |
| ·生长曲线的测定 | 第84-85页 |
| ·细胞侵袭试验 | 第85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-88页 |
| ABSTRACT | 第88-90页 |
| 全文总结 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
