| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论:单核苷酸多态性及其检测方法 | 第12-30页 |
| 1 单核苷酸多态性及其特点 | 第12-13页 |
| 2 单核苷酸多态性研究的意义 | 第13-16页 |
| ·SNP在遗传学中的应用 | 第14页 |
| ·SNP与疾病预防 | 第14页 |
| ·SNP与复杂疾病或过程的基因定位 | 第14-15页 |
| ·SNP与药物的关系 | 第15-16页 |
| ·SNP在法医研究与亲子鉴定领域的应用 | 第16页 |
| 3 单核苷酸多态性基因分型检测方法 | 第16-28页 |
| ·等位基因特异性识别策略 | 第17-25页 |
| ·等位基因特异性识别产物检测方法 | 第25-27页 |
| ·问题 | 第27-28页 |
| 4 论文的出发点和主要工作 | 第28-30页 |
| 第二章 基于磁性分离系统的SNP检测方法的设计 | 第30-42页 |
| 1 SNP检测方法的总体设计思路 | 第31页 |
| 2 检测探针的设计方法 | 第31-32页 |
| 3 等位基因特异性识别反应 | 第32-35页 |
| ·聚合连接反应 | 第32-34页 |
| ·连接探针的纯化反应 | 第34-35页 |
| ·纯化体系的扩增 | 第35页 |
| 4 等位基因特异性扩增产物的检测 | 第35-37页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测方法 | 第36页 |
| ·酶联免疫吸附实验(ELISA)检测方法 | 第36页 |
| ·通用寡核苷酸芯片检测方法 | 第36-37页 |
| 5 对短片段的插入/缺失的检测方法 | 第37-39页 |
| 6 分型方法的特点的讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 链亲和素磁性微粒的制备 | 第42-55页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-47页 |
| ·PDC活化的磁性微粒的制备方法 | 第43-44页 |
| ·苯二异硫氰酸酯对活化氨基末端磁性微粒活化条件的优化 | 第44-46页 |
| ·链亲和素在活化磁性微粒表面的偶联 | 第46页 |
| ·生物素标记寡核苷酸的固定化及生物活性检测 | 第46-47页 |
| 3 结果与讨论 | 第47-54页 |
| ·功能化磁性微粒的制备 | 第47-51页 |
| ·PDC活化磁性微粒对链亲和素蛋白的偶联 | 第51-53页 |
| ·生物素标记寡核苷酸的固定化及生物活性检测 | 第53-54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| 第四章 聚合连接反应-琼脂糖凝胶电泳检测单核苷酸多态性 | 第55-77页 |
| 1 材料与仪器 | 第55-56页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·仪器 | 第55-56页 |
| 2 实验方法 | 第56-63页 |
| ·聚合连接反应-琼脂糖凝胶电泳检测单核苷酸多态性方法实验流程 | 第56页 |
| ·检测探针的设计、合成及溶解保存 | 第56-61页 |
| ·质粒模板的检测 | 第61-62页 |
| ·临床样本的分型检测 | 第62-63页 |
| 3 结果与讨论 | 第63-75页 |
| ·质粒模板的检测 | 第63-71页 |
| ·临床样本的分型检测 | 第71-74页 |
| ·样本EGFR,c.2573T>G(L858R)突变位点亚克隆测序验证 | 第74-75页 |
| 4 小结 | 第75-77页 |
| 第五章 聚合连接反应-酶联免疫吸附实验检测单核苷酸多态性 | 第77-93页 |
| 1 材料与仪器 | 第77-78页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77-78页 |
| ·仪器 | 第78页 |
| 2 实验方法 | 第78-83页 |
| ·实验流程 | 第78-80页 |
| ·检测探针的设计、合成及溶解保存 | 第80页 |
| ·质粒模板的检测 | 第80-82页 |
| ·临床样本的分型检测 | 第82-83页 |
| 3 结果与讨论 | 第83-91页 |
| ·检测条件的优化及特异性和灵敏度检测 | 第83-88页 |
| ·临床样本的分型检测 | 第88-91页 |
| 4 小结 | 第91-93页 |
| 第六章 聚合连接反应-通用寡核苷酸芯片检测单核苷酸多态性 | 第93-112页 |
| 1 材料与仪器 | 第94-95页 |
| ·材料 | 第94页 |
| ·试剂 | 第94-95页 |
| ·仪器 | 第95页 |
| 2 实验方法 | 第95-104页 |
| ·实验流程 | 第95-97页 |
| ·检测探针的设计、合成及溶解保存 | 第97-100页 |
| ·质粒模板的检测 | 第100-103页 |
| ·药物代谢酶CYP2D6基因突变位点的检测 | 第103-104页 |
| 3 结果与讨论 | 第104-111页 |
| ·反应条件的优化 | 第104-106页 |
| ·EGFR基因突变位点的检测 | 第106-107页 |
| ·药物代谢酶CYP2D6基因突变位点的检测 | 第107-111页 |
| 4 小结 | 第111-112页 |
| 全文总结 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 作者简介 | 第126-127页 |
