| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第14-43页 |
| 1.1 分泌蛋白及其在癌症发生发展和化疗耐受中的作用 | 第14-22页 |
| 1.1.1 分泌蛋白在癌症早期阶段中的作用 | 第14-17页 |
| 1.1.2 分泌蛋白在癌症转移中的作用 | 第17-20页 |
| 1.1.3 分泌蛋白在癌细胞耐受抗癌药物中的作用 | 第20-21页 |
| 1.1.4 分泌蛋白的多重作用特性 | 第21-22页 |
| 1.2 分泌组学及其研究方法/策略 | 第22-27页 |
| 1.2.1 基于二维凝胶电泳的分析方法 | 第22-24页 |
| 1.2.2 基于液相色谱－串联质谱联用的分析方法 | 第24-27页 |
| 1.3 癌症分泌组学的主要研究内容、意义及其应用 | 第27-30页 |
| 1.3.1 癌症早期诊断 | 第27-28页 |
| 1.3.2 癌症转移 | 第28-29页 |
| 1.3.3 癌症化疗耐受 | 第29-30页 |
| 1.4 癌症分泌组学研究的发展趋势 | 第30-33页 |
| 1.4.1 研究样品应逐渐实现从体外向体内的过渡 | 第30-31页 |
| 1.4.2 建立有效提高分泌蛋白检出效率的研究方法 | 第31-32页 |
| 1.4.3 系统的后期验证工作 | 第32页 |
| 1.4.4 关键分泌蛋白的生物学功能解析 | 第32-33页 |
| 1.5 本论文的研究内容 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-43页 |
| 第二章 基于细胞培养的分泌组学研究方法的优化及其在乳腺癌耐药研究中的应用 | 第43-93页 |
| 2.1 引言 | 第43-47页 |
| 2.1.1 基于细胞培养的分泌组学研究方法 | 第43-44页 |
| 2.1.2 分泌蛋白在肿瘤细胞耐受抗癌药物中发挥重要作用 | 第44-45页 |
| 2.1.3 细胞系研究模型 | 第45-46页 |
| 2.1.4 本章研究工作 | 第46-47页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第47-59页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第47页 |
| 2.2.2 临床乳腺癌组织样品 | 第47-48页 |
| 2.2.3 主要的试剂与试剂盒 | 第48-49页 |
| 2.2.4 主要的耗材 | 第49页 |
| 2.2.5 主要的仪器设备 | 第49-50页 |
| 2.2.6 引物序列 | 第50页 |
| 2.2.7 主要溶液的配制 | 第50-52页 |
| 2.2.8 实验方法 | 第52-59页 |
| 2.3 实验结果和讨论 | 第59-81页 |
| 2.3.1 优化基于细胞培养的分泌组学研究的实验方法 | 第59-62页 |
| 2.3.2 鉴定 MCF-7 细胞和 MCF-7/Dox 细胞的分泌蛋白质组 | 第62-66页 |
| 2.3.3 筛选与乳腺癌细胞耐受多柔比星相关的分泌蛋白 | 第66-67页 |
| 2.3.4 多角度分析与乳腺癌细胞耐受多柔比星相关的分泌蛋白 | 第67-77页 |
| 2.3.5 验证 IL-18 与肿瘤细胞耐药的相关性 | 第77-81页 |
| 2.4 小结 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 第三章 应用凝集素捕获技术提高分泌蛋白鉴定效率 | 第93-111页 |
| 3.1 引言 | 第93-96页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第96-100页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第96页 |
| 3.2.2 主要的试剂与试剂盒 | 第96页 |
| 3.2.3 主要的耗材 | 第96页 |
| 3.2.4 主要的仪器设备 | 第96页 |
| 3.2.5 主要溶液的配制 | 第96-97页 |
| 3.2.6 实验方法 | 第97-100页 |
| 3.3 实验结果和讨论 | 第100-105页 |
| 3.3.1 蛋白质鉴定结果总览 | 第100-101页 |
| 3.3.2 凝集素亲和捕获技术具有良好的重现性 | 第101-102页 |
| 3.3.3 凝集素亲和捕获技术的优势 | 第102-105页 |
| 3.4 小结 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-111页 |
| 第四章 基于新鲜组织培养的结直肠癌早期诊断生物标志物的筛选 | 第111-168页 |
| 4.1 引言 | 第111-115页 |
| 4.1.1 结直肠癌的早期诊断需要新型血清生物标志物 | 第111-112页 |
| 4.1.2 研究样品应逐渐实现从体外向体内的过渡 | 第112-113页 |
| 4.1.3 基于新鲜组织培养的癌症分泌组学研究的瓶颈问题 | 第113-114页 |
| 4.1.4 本章研究内容 | 第114-115页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第115-124页 |
| 4.2.1 细胞系 | 第115页 |
| 4.2.2 临床血清/组织样品 | 第115-117页 |
| 4.2.3 主要的试剂与试剂盒 | 第117页 |
| 4.2.4 主要的耗材 | 第117页 |
| 4.2.5 主要的仪器设备 | 第117-118页 |
| 4.2.6 主要溶液的配制 | 第118-119页 |
| 4.2.7 实验方法 | 第119-124页 |
| 4.3 实验结果和讨论 | 第124-156页 |
| 4.3.1 评估新鲜组织培养体系中的细胞生长状态 | 第124-126页 |
| 4.3.2 质谱鉴定结果概览 | 第126-128页 |
| 4.3.3 凝集素亲和捕获技术用于基于组织培养的分泌组学研究的优势 | 第128-130页 |
| 4.3.4 差异表达的分泌蛋白的筛选及多角度分析 | 第130-143页 |
| 4.3.5 初步挑选候选蛋白质并验证抗体特异性 | 第143-147页 |
| 4.3.6 验证 EFEMP2 作为结直肠癌早期诊断的生物标志物的可行性 | 第147-156页 |
| 4.4 小结 | 第156-158页 |
| 参考文献 | 第158-168页 |
| 第五章 总结与展望 | 第168-172页 |
| 5.1 主要结论 | 第168-169页 |
| 5.2 创新点 | 第169页 |
| 5.3 研究展望 | 第169-172页 |
| 附录一 符号与标记 | 第172-174页 |
| 致谢 | 第174-175页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及参与的科研项目 | 第175-177页 |
| 附件 | 第177页 |
