中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
一、 性腺肽类激素在雌性中的局部调节机理研究 | 第14-20页 |
1 抑制素 | 第14-16页 |
2 活化素 | 第16-18页 |
3 卵泡抑素 | 第18-19页 |
4 Wilm's肿瘤抑制子 | 第19-20页 |
二、 性腺肽类激素在雄性中的局部调节机理研究 | 第20-29页 |
1 组织和细胞分布 | 第21-22页 |
2 在精巢中的功能 | 第22-29页 |
第二章 鸡和鸭抑制素α亚基成熟区的cDNA克隆及序列分析 | 第29-42页 |
1 材料和方法 | 第29-31页 |
1.1 材料 | 第29页 |
1.1.1 实验动物 | 第29页 |
1.1.2 工具酶及试剂 | 第29页 |
1.2 方法 | 第29-31页 |
1.2.1 鸡卵泡颗粒细胞的分离 | 第29-30页 |
1.2.2 RNA的抽提 | 第30页 |
1.2.3 引物的设计 | 第30页 |
1.2.4 RT-PCR反应扩增鸡Inhibinα亚基成熟区序列 | 第30页 |
1.2.5 RT-PCR产物的克隆 | 第30页 |
1.2.6 阳性克隆的分析鉴定 | 第30-31页 |
1.2.7 DNA序列分析 | 第31页 |
2 结果 | 第31-34页 |
2.1 RT-PCR扩增目的序列 | 第31页 |
2.2 重组子的酶切鉴定 | 第31页 |
2.3 PCR扩增鉴定重组子 | 第31-32页 |
2.4 DNA及预测氨基酸序列的同源分析 | 第32-34页 |
3 讨论 | 第34-42页 |
第三章 鸡和鸭抑制素/活化素β_A亚基成熟区的cDNA克隆及序列分析 | 第42-51页 |
1 材料和方法 | 第42-43页 |
1.1 动物材料 | 第42页 |
1.2 鸡卵泡颗粒细胞的分离 | 第42页 |
1.3 RNA的抽提 | 第42页 |
1.4 引物的设计 | 第42页 |
1.5 RT-PCR反应扩增鸡抑制素/活化素β_A亚基成熟区序列 | 第42-43页 |
1.6 RT-PCR产物的克隆 | 第43页 |
1.7 阳性克隆的分析鉴定 | 第43页 |
1.7.1 酶切鉴定 | 第43页 |
1.7.2 PCR扩增鉴定 | 第43页 |
1.8 DNA序列分析 | 第43页 |
2 结果 | 第43-46页 |
2.1 RT-PCR扩增目的序列 | 第43-44页 |
2.2 重组子的酶切鉴定 | 第44页 |
2.3 重组子的PCR扩增鉴定 | 第44页 |
2.4 cDNA及预测氨基酸序列的同源分析 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-51页 |
第四章 鸡和鸭抑制素/活化素β_B亚基成熟区cDNA的克隆及序列分析 | 第51-60页 |
1 材料与方法 | 第51-52页 |
1.1 实验动物 | 第51页 |
1.2 实验材料 | 第51页 |
1.3 鸡卵泡颗粒细胞的分离 | 第51页 |
1.4 RNA的抽提 | 第51页 |
1.5 引物的设计 | 第51页 |
1.6 RT-PCR反应扩增鸡抑制素/活化素β_B亚基成熟区序列 | 第51页 |
1.7 RT-PCR产物的克隆 | 第51-52页 |
1.8 阳性克隆的分析鉴定 | 第52页 |
1.8.1 酶切鉴定 | 第52页 |
1.8.2 PCR扩增鉴定 | 第52页 |
1.9 DNA序列分析 | 第52页 |
2 结果 | 第52-54页 |
2.1 RT-PCR扩增目的序列 | 第52页 |
2.2 重组子的酶切鉴定 | 第52页 |
2.3 重组子的PCR扩增鉴定 | 第52-53页 |
2.4 cDNA及预测氨基酸序列的同源分析 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-60页 |
第五章 鸡各级卵泡中抑制素α亚基表达丰度的研究 | 第60-66页 |
1 材料和方法 | 第60-62页 |
1.1 实验动物 | 第60页 |
1.2 工具酶及试剂 | 第60页 |
1.3 各级卵泡的分离 | 第60页 |
1.4 RNA的抽提 | 第60-61页 |
1.5 引物的设计及竞争标准DNA的制备 | 第61页 |
1.6 竞争标准cRNA的制备 | 第61-62页 |
1.7 定量竞争RT-PCR | 第62页 |
2 结果 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
第六章 鸭各级卵泡中抑制素α和抑制素/活化素β_A亚基mRNA表达丰度的研究 | 第66-74页 |
1 材料和方法 | 第66-68页 |
1.1 实验材料 | 第66页 |
1.2 各级卵泡的分离 | 第66页 |
1.3 RNA的抽提 | 第66页 |
1.4 引物的设计及竞争标准DNA的制备 | 第66-67页 |
1.5 竞争标准cRNA的制备 | 第67页 |
1.6 RT-PCR检测抑制素两亚基在不同卵泡中的分布 | 第67页 |
1.7 定量竞争RT-PCR | 第67-68页 |
2 结果 | 第68-71页 |
2.1 RT-PCR检测各亚基在不同卵泡中的表达情况 | 第68页 |
2.2 定量竞争RT-PCR定量RNA | 第68-71页 |
3 讨论 | 第71-74页 |
第七章 鸭卵泡及精巢中卵泡抑素和抑制素/活化素β_B亚基mRNA表达的研究 | 第74-82页 |
1 材料和方法 | 第74-76页 |
1.1 实验材料 | 第74页 |
1.2 各级卵泡及成熟与未成熟精巢的分离 | 第74页 |
1.3 RNA的抽提 | 第74页 |
1.4 引物的设计及竞争标准DNA的制备 | 第74-75页 |
1.5 竞争标准cRNA的制备 | 第75页 |
1.6 RT-PCR法检测卵泡抑素和β_B亚基在不同卵泡及精巢中的表达情况 | 第75页 |
1.7 定量竞争RT-PCR | 第75-76页 |
2 结果 | 第76-79页 |
2.1 RT-PCR法检测卵泡抑素及β_B亚基在不同卵泡及精巢中的表达情况 | 第76页 |
2.2 用定量竞争RT-PCR法定量RNA | 第76-79页 |
3 讨论 | 第79-82页 |
第八章 活化素和卵泡抑素对鸭卵泡颗粒细胞FSH受体mRNA表达作用的研究 | 第82-93页 |
1 材料和方法 | 第82-83页 |
1.1 实验材料 | 第82页 |
1.2 实验动物 | 第82页 |
1.3 细胞培养 | 第82-83页 |
1.4 激素处理 | 第83页 |
1.5 各组细胞FSH受体mRNA表达丰度的定量测定 | 第83页 |
2 结果 | 第83-89页 |
2.1 经Activin处理的颗粒细胞FSH受体mRNA的定量结果 | 第83-85页 |
2.2 经FSP处理的颗粒细胞FSH受体mRNA的定量结果 | 第85-86页 |
2.3 经Activin和FSP共同处理的颗粒细胞FSH受体mRNA的定量结果 | 第86-87页 |
2.4 经FSH和Activin共同处理的颗粒细胞FSH受体mRNA的定量结果 | 第87-88页 |
2.5 经FSH和FSP共同处理的颗粒细胞FSH受体mRNA的定量结果 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-93页 |
第九章 鸭卵巢各级卵泡中WT1 mRNA的表达 | 第93-99页 |
1 材料和方法 | 第93-95页 |
1.1 实验材料 | 第93页 |
1.2 实验动物 | 第93页 |
1.3 工具酶及试剂 | 第93页 |
1.4 RNA的抽提 | 第93页 |
1.5 引物的设计及竞争标准DNA的制备 | 第93-94页 |
1.6 竞争标准cRNA的制备 | 第94页 |
1.7 RT-PCR检测WT1在不同卵泡中的表达 | 第94页 |
1.8 定量竞争RT-PCR | 第94-95页 |
2 结果 | 第95-96页 |
2.1 RT-PCR检测WT1在不同卵泡中的表达情况 | 第95页 |
2.2 定量竞争RT-PCR定量RNA | 第95-96页 |
3 讨论 | 第96-99页 |
结论 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
攻读博士学位期间发表的论文目录及主持、参加的科研项目 | 第101页 |