| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 PEDV 概述 | 第10页 |
| 1.2 猪流行性腹泻病毒的生物学特性研究 | 第10-11页 |
| 1.2.1 PEDV 的形态结构 | 第10-11页 |
| 1.2.2 PEDV 的理化特性 | 第11页 |
| 1.3 PEDV 基因组结构及主要编码的蛋白 | 第11-13页 |
| 1.3.1 PEDV 的基因组结构 | 第11页 |
| 1.3.2 主要编码的蛋白 | 第11-13页 |
| 1.4 PEDV 的培养特性 | 第13页 |
| 1.5 病毒感染的分子基础与病毒感染特性的研究 | 第13-14页 |
| 1.6 本试验研究的理论意义 | 第14-15页 |
| 2.材料与方法 | 第15-29页 |
| 2.1 材料 | 第15-19页 |
| 2.1.1 样品 | 第15页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第15页 |
| 2.1.3 菌株与载体 | 第15页 |
| 2.1.4 试验中用到的引物 | 第15-16页 |
| 2.1.5 抗体及血清 | 第16页 |
| 2.1.6 主要试剂及配制 | 第16-19页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 样品的采集 | 第19-20页 |
| 2.2.2 样品的处理 | 第20页 |
| 2.2.3 病毒的分离培养 | 第20页 |
| 2.2.4 分离病毒的鉴定 | 第20-25页 |
| 2.2.5 pAPN 全基因的扩增、克隆及鉴定 | 第25页 |
| 2.2.6 pAPN-SPC 基因的 PCR 扩增 | 第25页 |
| 2.2.7 重组真核表达载体 pEGFP-pAPN-SPC 的构建及提取 | 第25页 |
| 2.2.8 重组真核表达载体 pEGFP-pAPN-SPC 的鉴定及序列测定 | 第25-26页 |
| 2.2.9 G418 最佳工作浓度的确定 | 第26页 |
| 2.2.10 重组真核表达载体 pEGFP-pAPN-SPC 转染 Vero 细胞及筛选重组质粒 | 第26页 |
| 2.2.11 pAPN-SPC 在 Vero 细胞系中表达的检测 | 第26-27页 |
| 2.2.12 通过荧光定量 PCR 检测构建细胞对 PEDV 的易感性 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| 3.1 结果 | 第29-37页 |
| 3.1.1 分离病毒培养结果 | 第29页 |
| 3.1.2 分离病毒鉴定结果 | 第29-32页 |
| 3.1.3 pAPN-SPC-Vero 细胞系鉴定结果 | 第32-37页 |
| 3.2 分析 | 第37-40页 |
| 3.2.1 病毒的分离鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.2 pAPN-Vero 细胞系的建立 | 第38-40页 |
| 4 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 在读期间发表的论文 | 第45-46页 |
| 附录 | 第46-47页 |
| 附录 A pAPN 基因测序结果 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
