| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写索引 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| 1.1 前言 | 第12-13页 |
| 1.2 论文研究目的、实验方法、实验方案的选择和临床意义 | 第13-18页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第13页 |
| 1.2.2 研究主要内容和方法 | 第13-15页 |
| 1.2.3 实验方案的设计 | 第15-16页 |
| 1.2.4 研究的临床意义 | 第16-18页 |
| 第二章 pGV314-betatrophin重组穿梭质粒的构建及鉴定 | 第18-40页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 仪器 | 第18页 |
| 2.1.2 药品与试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 实验溶液的配置 | 第19-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.3.1 含有小鼠Betatrophin基因质粒的构建 | 第22-24页 |
| 2.3.2 穿梭质粒pGV314酶切线性化 | 第24-26页 |
| 2.3.3 目的基因连接于线性化载体pGV314 | 第26页 |
| 2.3.4 交换产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第26-27页 |
| 2.3.5 用于阳性克隆鉴定的PCR引物设计 | 第27页 |
| 2.3.6 pGV314-Betatrophin穿梭载体的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.7 HEK293T细胞的培养 | 第28页 |
| 2.3.8 外源基因表达的鉴定 | 第28-31页 |
| 2.4 结果 | 第31-35页 |
| 2.4.1 带有目的基因的pcDNA3.1 质粒的鉴定 | 第31页 |
| 2.4.2 重组穿梭质粒pGV314-Betatrophin的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4.3 重组质粒Ad-Betatrophin蛋白表达检测 | 第32-33页 |
| 2.4.4 阳性克隆DNA测序结果及结果分析 | 第33-34页 |
| 2.4.5 用于阳性克隆鉴定的PCR引物设计 | 第34-35页 |
| 2.5 讨论 | 第35-39页 |
| 2.6 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 重组腺病毒Ad-Betatrophin的构建及鉴定 | 第40-47页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第40页 |
| 3.1.1 仪器 | 第40页 |
| 3.1.2 药品与试剂 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 3.2.1 pGV314穿梭质粒的抽提 | 第40-41页 |
| 3.2.2 腺病毒质粒的获取 | 第41页 |
| 3.2.3 人胚肾 293T细胞的培养 | 第41页 |
| 3.2.4 重组腺病毒的包装、扩增、纯化 | 第41-43页 |
| 3.2.5 腺病毒滴度测定-终点稀释法 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-44页 |
| 3.3.1 重组腺病毒的收获 | 第43-44页 |
| 3.3.2 病毒滴度测定 | 第44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-46页 |
| 3.5 结论 | 第46-47页 |
| 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 综述 | 第52-65页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 攻读硕士期间发表文章 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68页 |
