中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
引言 | 第8-13页 |
材料和方法 | 第13-20页 |
1 实验材料 | 第13-14页 |
1.1 细胞系 | 第13页 |
1.2 主要试剂与材料 | 第13页 |
1.3 主要仪器与设备 | 第13-14页 |
1.4 主要抗体 | 第14页 |
2 实验方法 | 第14-20页 |
2.1 CD19-CAR-pCDH和CD138-CAR-pCDH载体的构建 | 第14页 |
2.2 细胞培养 | 第14-15页 |
2.3 慢病毒包装 | 第15-16页 |
2.4 分离并制备淋巴细胞单细胞悬液 | 第16页 |
2.5 T细胞体外激活 | 第16-17页 |
2.6 慢病毒转染T细胞 | 第17页 |
2.7 PCR分析 | 第17-18页 |
2.8 蛋白免疫印迹(Western blotting, WB)分析 | 第18-19页 |
2.9 流式细胞术(Flow cytometry, FC)分析 | 第19页 |
2.10 细胞毒性试验 | 第19-20页 |
结果 | 第20-30页 |
Part 1:CD19嵌合抗原受体修饰的T细胞对CD19+套式淋巴瘤细胞的杀伤 | 第20-25页 |
1.1 CD19-CAR-PCDH重组质粒构建成功 | 第20-21页 |
1.2 慢病毒包装、浓缩、滴度测定结果 | 第21-22页 |
1.3 PCR分析结果表明CD19-CAR片段在T细胞内是正常表达的 | 第22页 |
1.4 CD19-CAR片段的蛋白表达分析 | 第22-23页 |
1.5 流式表型分析检测到CD19-CAR片段有蛋白表达在T细胞膜外 | 第23-24页 |
1.6 CD19-CAR修饰的T细胞对套式淋巴瘤有更高的杀伤率 | 第24-25页 |
Part 2:CD138嵌合抗原受体修饰的T细胞对CD138阳性骨髓瘤细胞的杀伤 | 第25-27页 |
2.1 CD138-CAR-PCDH重组质粒构建成功 | 第25-26页 |
2.2 CD138-CAR修饰的T细胞对骨髓瘤细胞有更高的杀伤率 | 第26-27页 |
Part 3:体外对嵌合抗原受体修饰的T细胞进行表型分析 | 第27-30页 |
3.1 体外用IL-7 和IL-15刺激T细胞得到CD8+CD45RA+CD62L+亚群 | 第27-30页 |
讨论 | 第30-32页 |
参考文献 | 第32-36页 |
综述 | 第36-51页 |
参考文献 | 第43-51页 |
致谢 | 第51-53页 |