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基于聚多巴胺功能化的膜色谱介质制备及其在蛋白分离中的应用

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
1 引言第14-32页
    1.1 膜色谱技术简介第14-22页
        1.1.1 膜色谱的原理和特点第14-15页
        1.1.2 膜色谱介质(membrane adsorber)的分类第15-17页
        1.1.3 膜色谱介质的制备第17-20页
        1.1.4 膜色谱的应用第20-22页
            1.1.4.1 蛋白的快速捕获与纯化第20-21页
            1.1.4.2 精制第21页
            1.1.4.3 生物大分子的纯化第21-22页
    1.2 基于聚多巴胺(PDA)涂覆的膜改性第22-28页
        1.2.1 PDA的形成和特点第22-24页
        1.2.2 PDA改性的应用第24-28页
            1.2.2.1 直接沉积PDA于膜表面进行改性第24-26页
            1.2.2.2 PDA作为中间功能层用于膜的功能化第26-27页
            1.2.2.3 多巴胺与功能分子先结合后沉积第27页
            1.2.2.4 PDA作为膜的组成成分第27-28页
    1.3 本课题的提出和主要研究内容第28-32页
        1.3.1 课题研究背景与意义第28-29页
        1.3.2 主要研究内容第29-32页
2 以PDA为平台的膜色谱介质的制备及其在HSA/IgG分离中的应用第32-46页
    2.1 引言第32-33页
    2.2 实验部分第33-35页
        2.2.1 实验材料及主要仪器第33页
        2.2.2 通过PDA涂覆聚醚砜膜制备膜色谱介质第33页
        2.2.3 膜的鉴定和表征第33-34页
            2.2.3.1 光电子能谱第33页
            2.2.3.2 扫描电镜第33-34页
            2.2.3.3 接触角第34页
            2.2.3.4 比表面积的测定第34页
            2.2.3.5 跨膜压力的测定第34页
        2.2.4 蛋白吸附容量的测定第34-35页
        2.2.5 膜色谱介质分离性能的测定第35页
        2.2.6 分析方法第35页
    2.3 结果与讨论第35-45页
        2.3.1 基于PDA涂覆的膜表面改性和鉴定第35-37页
        2.3.2 以PDA为中间功能层的阴离子交换膜色谱介质的制备和鉴定第37-38页
        2.3.3 以PDA为中间功能层的疏水膜色谱介质的制备和鉴定第38页
        2.3.4 以PDA为中间功能层的亲和膜色谱介质的制备和鉴定第38-39页
        2.3.5 阴离子交换膜色谱介质从HSA/IgG混合液中分离HSA第39-42页
        2.3.6 疏水膜色谱介质从HSA/IgG混合液中分离IgG第42-43页
        2.3.7 亲和膜色谱介质从HSA/IgG混合液中分离IgG第43-45页
    2.4 本章小结第45-46页
3 以疏水微滤膜为基膜的耐盐型膜色谱介质的制备及应用第46-66页
    3.1 引言第46-47页
    3.2 实验部分第47-50页
        3.2.1 实验材料及主要仪器第47页
        3.2.2 耐盐型阴离子交换(STAE)膜色谱介质的制备第47-48页
        3.2.3 膜的鉴定和表征第48-49页
            3.2.3.1 接触角第48页
            3.2.3.2 红外光谱第48页
            3.2.3.3 机械性能的测定第48页
            3.2.3.4 Zeta电位的测定第48页
            3.2.3.5 扫描电镜第48页
            3.2.3.6 比表面积的测定第48页
            3.2.3.7 跨膜压力的测定第48页
            3.2.3.8 氨基含量的测定第48-49页
        3.2.4 膜色谱介质吸附容量的测定第49页
        3.2.5 从HSA/IgG混合液中精制IgG第49-50页
        3.2.6 重复使用性的评价第50页
        3.2.7 分析方法第50页
    3.3 结果与讨论第50-65页
        3.3.1 STAE膜色谱介质的制备和鉴定第50-54页
        3.3.2 PDA涂覆时间的影响第54-55页
        3.3.3 离子强度和流速对膜色谱介质吸附容量的影响第55-57页
        3.3.4 从HSA/IgG混合液中精制IgG第57-62页
        3.3.5 自制膜色谱介质重复使用性的评价第62-63页
        3.3.6 自制膜色谱介质与相应商品化产品的比较第63-65页
    3.4 本章小结第65-66页
4 利用膜色谱介质从组分Ⅳ沉淀中纯化α_1-抗胰蛋白酶(AAT)的研究第66-90页
    4.1 引言第66-67页
    4.2 实验部分第67-70页
        4.2.1 实验材料及主要仪器第67-68页
        4.2.2 膜色谱介质的制备第68页
        4.2.3 分析方法第68-69页
            4.2.3.1 接触角第68页
            4.2.3.2 Zeta电位的测定第68页
            4.2.3.3 跨膜压力的测定第68页
            4.2.3.4 光电子能谱第68页
            4.2.3.5 离子交换容量的测定第68页
            4.2.3.6 总蛋白浓度的测定第68-69页
            4.2.3.7 AAT含量和活性的检测方法第69页
            4.2.3.8 SDS-PAGE鉴定方法第69页
        4.2.4 组分Ⅳ沉淀的预处理第69页
        4.2.5 商品化膜色谱介质纯化AAT第69-70页
        4.2.6 自制膜色谱介质纯化AAT第70页
    4.3 结果与讨论第70-88页
        4.3.1 组分Ⅳ沉淀的预处理第70-72页
            4.3.1.1 PEG4000添加量的影响第70-71页
            4.3.1.2 pH对除去杂蛋白的影响第71-72页
        4.3.2 商品化膜色谱介质纯化AAT的初步探索第72-77页
            4.3.2.1 阴离子交换膜色谱介质初步纯化AAT第72-75页
            4.3.2.2 疏水膜色谱介质精制AAT第75-77页
        4.3.3 自制阴离子交换膜色谱介质纯化AAT第77-88页
            4.3.3.1 四种阴离子交换膜色谱介质的制备和应用第77-80页
            4.3.3.2 洗脱盐浓度和流速的影响第80-83页
            4.3.3.3 PEI分子量对膜渗透性能的影响第83-84页
            4.3.3.4 PEI分子量对纯化AAT的影响第84-88页
    4.4 本章小结第88-90页
5 基于膜色谱固定化漆酶的酶膜反应器的构建和应用第90-116页
    5.1 引言第90-91页
    5.2 实验部分第91-94页
        5.2.1 实验材料及主要仪器第91页
        5.2.2 膜色谱介质的制备第91-92页
        5.2.3 酶膜反应器的构建第92页
        5.2.4 分析方法第92-93页
            5.2.4.1 光电子能谱第92页
            5.2.4.2 扫描电镜第92页
            5.2.4.3 总蛋白浓度的测定第92页
            5.2.4.4 漆酶活性的检测方法第92页
            5.2.4.5 SDS-PAGE鉴定方法第92-93页
            5.2.4.6 双酚A(BPA)的测定方法第93页
        5.2.5 酶膜反应器稳定性的评价第93页
        5.2.6 酶膜反应器除去BPA第93-94页
    5.3 结果与讨论第94-114页
        5.3.1 阴离子交换膜色谱介质固定漆酶及其应用第94-103页
            5.3.1.1 酶膜反应器用膜的制备和鉴定第94-96页
            5.3.1.2 pH对固定化漆酶的影响第96-97页
            5.3.1.3 流速对固定化漆酶的影响第97-98页
            5.3.1.4 膜色谱介质的重复使用第98-99页
            5.3.1.5 膜色谱介质的稳定性研究第99-101页
            5.3.1.6 酶膜反应器除去BPA的研究第101-103页
        5.3.2 金属螯合膜色谱介质固定漆酶及其应用第103-114页
            5.3.2.1 金属螯合酶膜反应器用膜的制备和鉴定第103-106页
            5.3.2.2 金属离子对固定化漆酶的影响第106-107页
            5.3.2.3 pH对固定化漆酶的影响第107-108页
            5.3.2.4 流速对固定化漆酶的影响第108页
            5.3.2.5 膜色谱介质的重复使用第108-109页
            5.3.2.6 膜色谱介质的稳定性研究第109-111页
            5.3.2.7 膜堆叠数量和通量对酶膜反应器除去BPA的影响第111-113页
            5.3.2.8 酶膜反应器连续除去BPA的研究第113-114页
    5.4 本章小结第114-116页
6 结论与展望第116-120页
    6.1 结论第116-118页
    6.2 主要创新点第118页
    6.3 展望第118-120页
符号表第120-122页
参考文献第122-136页
个人简历及发表文章目录第136-138页
致谢第138页

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