摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-26页 |
1.1 钙对植物生长的重要性 | 第15-16页 |
1.1.1 钙的生理功能 | 第15页 |
1.1.2 植物对钙的吸收 | 第15-16页 |
1.1.3 土壤的缺钙现象 | 第16页 |
1.2 植物Ca~(2+)信号 | 第16-22页 |
1.2.1 Ca~(2+)信号的产生 | 第17-20页 |
1.2.2 Ca~(2+)信号的传递 | 第20-21页 |
1.2.3 细胞器内的Ca~(2+)含量 | 第21-22页 |
1.3 AtEDR2研究进展 | 第22-25页 |
1.3.1 AtEDR2结构 | 第23页 |
1.3.2 AtEDR2在植物体中的表达 | 第23-24页 |
1.3.3 AtEDR2的功能 | 第24-25页 |
1.4 本研究的意义 | 第25-26页 |
第二章 内质网Ca结合蛋白AtEDR2参与植物Ca依赖性生长过程 | 第26-66页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 实验植物 | 第26页 |
2.1.2 实验菌种与质粒 | 第26-27页 |
2.1.3 实验试剂 | 第27页 |
2.1.4 引物列表 | 第27-28页 |
2.2 实验仪器 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-46页 |
2.3.1 拟南芥与烟草的种植与生长 | 第28-30页 |
2.3.2 AtEDR2 T-DNA插入突变纯合体的鉴定 | 第30-31页 |
2.3.3 atedr2的表型分析 | 第31-32页 |
2.3.4 pORE O4-AtEDR2 Promoter-CDS载体构建 | 第32-36页 |
2.3.5 农杆菌侵染法 | 第36-37页 |
2.3.6 转基因阳性植株的筛选 | 第37页 |
2.3.7 AtEDR2基因的功能互补验证 | 第37-38页 |
2.3.8 AtEDR2 T-DNA插入突变体的钙含量测定 | 第38-39页 |
2.3.9 pORE R1-AtEDR2 Promoter-GUS载体构建 | 第39页 |
2.3.10 GUS组织化学染色法 | 第39-40页 |
2.3.11 35S-AtEDR2-GFP载体构建 | 第40-41页 |
2.3.12 烟草的瞬时转化 | 第41页 |
2.3.13 免疫荧光 | 第41-42页 |
2.3.14 AtEDR2蛋白的提取及Ca结合能力测定 | 第42-46页 |
2.4 实验结果与分析 | 第46-63页 |
2.4.1 AtEDR2是拟南芥Ca~(2+)依赖生长必需基因 | 第46-52页 |
2.4.2 AtEDR2不参与拟南芥Ca的积累 | 第52-53页 |
2.4.3 AtEDR2启动子活性的组织特异性研究 | 第53-57页 |
2.4.4 AtEDR2蛋白定位于内质网 | 第57-59页 |
2.4.5 AtEDR2不参与调节与全营养和低Ca培养条件下PI4P在根中的分布 | 第59-61页 |
2.4.6 AtEDR2的PH结构域具有Ca~(2+)结合特性 | 第61-63页 |
2.5 讨论 | 第63-66页 |
第三章 AtEDR2蛋白组学分析 | 第66-85页 |
3.1 实验材料 | 第66-68页 |
3.1.1 实验植物 | 第66页 |
3.1.2 实验试剂 | 第66页 |
3.1.3 引物列表 | 第66-68页 |
3.2 实验仪器 | 第68页 |
3.3 实验方法 | 第68-71页 |
3.3.1 蛋白组学材料制备 | 第68页 |
3.3.2 iTRAQ法鉴定蛋白差异表达 | 第68-69页 |
3.3.3 蛋白组学数据分析 | 第69页 |
3.3.4 相关基因突变体的表型分析 | 第69-70页 |
3.3.5 蛋白N-糖基化检测 | 第70-71页 |
3.4 实验结果与分析 | 第71-84页 |
3.4.1 拟南芥atedr2突变体蛋白组学分析 | 第71-79页 |
3.4.2 相关突变体的Ca依赖生长表型分析 | 第79-82页 |
3.4.3 AtEDR2不参与低Ca胁迫对蛋白N-糖基化的调节 | 第82-84页 |
3.5 讨论 | 第84-85页 |
第四章 AtEDR2表达谱芯片数据分析 | 第85-96页 |
4.1 实验材料 | 第85-86页 |
4.1.1 实验植物 | 第85页 |
4.1.2 实验试剂 | 第85页 |
4.1.3 引物列表 | 第85-86页 |
4.2 实验方法 | 第86-88页 |
4.2.1 表达谱芯片材料制备 | 第86页 |
4.2.2 AtEDR2表达谱芯片数据分析 | 第86页 |
4.2.3 基于芯片数据的qRT-PCR | 第86-87页 |
4.2.4 活性氧簇检测 | 第87-88页 |
4.2.5 相关突变体的表型分析 | 第88页 |
4.3 实验结果与分析 | 第88-94页 |
4.3.1 AtEDR2负调控拟南芥对低Ca胁迫的转录反应 | 第88-92页 |
4.3.2 过氧化物和水杨酸积累途径参与了AtEDR2调节的植物Ca依赖性生长过程 | 第92-94页 |
4.4 讨论 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第108页 |