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拟南芥EDR2定位、Ca结合特性和在Ca依赖性生长中的生理功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略词表第12-15页
第一章 文献综述第15-26页
    1.1 钙对植物生长的重要性第15-16页
        1.1.1 钙的生理功能第15页
        1.1.2 植物对钙的吸收第15-16页
        1.1.3 土壤的缺钙现象第16页
    1.2 植物Ca~(2+)信号第16-22页
        1.2.1 Ca~(2+)信号的产生第17-20页
        1.2.2 Ca~(2+)信号的传递第20-21页
        1.2.3 细胞器内的Ca~(2+)含量第21-22页
    1.3 AtEDR2研究进展第22-25页
        1.3.1 AtEDR2结构第23页
        1.3.2 AtEDR2在植物体中的表达第23-24页
        1.3.3 AtEDR2的功能第24-25页
    1.4 本研究的意义第25-26页
第二章 内质网Ca结合蛋白AtEDR2参与植物Ca依赖性生长过程第26-66页
    2.1 实验材料第26-28页
        2.1.1 实验植物第26页
        2.1.2 实验菌种与质粒第26-27页
        2.1.3 实验试剂第27页
        2.1.4 引物列表第27-28页
    2.2 实验仪器第28页
    2.3 实验方法第28-46页
        2.3.1 拟南芥与烟草的种植与生长第28-30页
        2.3.2 AtEDR2 T-DNA插入突变纯合体的鉴定第30-31页
        2.3.3 atedr2的表型分析第31-32页
        2.3.4 pORE O4-AtEDR2 Promoter-CDS载体构建第32-36页
        2.3.5 农杆菌侵染法第36-37页
        2.3.6 转基因阳性植株的筛选第37页
        2.3.7 AtEDR2基因的功能互补验证第37-38页
        2.3.8 AtEDR2 T-DNA插入突变体的钙含量测定第38-39页
        2.3.9 pORE R1-AtEDR2 Promoter-GUS载体构建第39页
        2.3.10 GUS组织化学染色法第39-40页
        2.3.11 35S-AtEDR2-GFP载体构建第40-41页
        2.3.12 烟草的瞬时转化第41页
        2.3.13 免疫荧光第41-42页
        2.3.14 AtEDR2蛋白的提取及Ca结合能力测定第42-46页
    2.4 实验结果与分析第46-63页
        2.4.1 AtEDR2是拟南芥Ca~(2+)依赖生长必需基因第46-52页
        2.4.2 AtEDR2不参与拟南芥Ca的积累第52-53页
        2.4.3 AtEDR2启动子活性的组织特异性研究第53-57页
        2.4.4 AtEDR2蛋白定位于内质网第57-59页
        2.4.5 AtEDR2不参与调节与全营养和低Ca培养条件下PI4P在根中的分布第59-61页
        2.4.6 AtEDR2的PH结构域具有Ca~(2+)结合特性第61-63页
    2.5 讨论第63-66页
第三章 AtEDR2蛋白组学分析第66-85页
    3.1 实验材料第66-68页
        3.1.1 实验植物第66页
        3.1.2 实验试剂第66页
        3.1.3 引物列表第66-68页
    3.2 实验仪器第68页
    3.3 实验方法第68-71页
        3.3.1 蛋白组学材料制备第68页
        3.3.2 iTRAQ法鉴定蛋白差异表达第68-69页
        3.3.3 蛋白组学数据分析第69页
        3.3.4 相关基因突变体的表型分析第69-70页
        3.3.5 蛋白N-糖基化检测第70-71页
    3.4 实验结果与分析第71-84页
        3.4.1 拟南芥atedr2突变体蛋白组学分析第71-79页
        3.4.2 相关突变体的Ca依赖生长表型分析第79-82页
        3.4.3 AtEDR2不参与低Ca胁迫对蛋白N-糖基化的调节第82-84页
    3.5 讨论第84-85页
第四章 AtEDR2表达谱芯片数据分析第85-96页
    4.1 实验材料第85-86页
        4.1.1 实验植物第85页
        4.1.2 实验试剂第85页
        4.1.3 引物列表第85-86页
    4.2 实验方法第86-88页
        4.2.1 表达谱芯片材料制备第86页
        4.2.2 AtEDR2表达谱芯片数据分析第86页
        4.2.3 基于芯片数据的qRT-PCR第86-87页
        4.2.4 活性氧簇检测第87-88页
        4.2.5 相关突变体的表型分析第88页
    4.3 实验结果与分析第88-94页
        4.3.1 AtEDR2负调控拟南芥对低Ca胁迫的转录反应第88-92页
        4.3.2 过氧化物和水杨酸积累途径参与了AtEDR2调节的植物Ca依赖性生长过程第92-94页
    4.4 讨论第94-96页
参考文献第96-107页
致谢第107-108页
攻读学位期间发表的学术论文目录第108页

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