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光周期诱导水稻雄性不育相关差异蛋白的验证与分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-22页
    1.1 国内外研究进展第11-19页
        1.1.1 光温敏不育水稻育性转换的生态学特性第11-12页
        1.1.2 光温敏不育水稻的分子遗传机制第12-13页
        1.1.3 光温敏不育水稻的蛋白质组学研究第13-14页
        1.1.4 水稻育性转换的生理生化特征第14-17页
        1.1.5 类黄酮物质代谢途径对植物育性的影响第17-19页
    1.2 本研究的目的和意义第19-20页
    1.3 研究内容及技术路线第20-22页
        1.3.1 研究内容第20页
        1.3.2 本研究的技术路线第20-22页
2 材料与方法第22-31页
    2.1 材料第22页
    2.2 材料种植及光周期处理第22页
    2.3 实验材料的采集第22页
    2.4 水稻花粉育性鉴定第22-23页
    2.5 荧光定量PCR分析第23-26页
        2.5.1 总RNA的提取第23页
        2.5.2 DNase I处理与RNA质量检测第23页
        2.5.3 反转录及PCR检测第23-24页
        2.5.4 荧光定量PCR第24-26页
    2.6 可溶性蛋白提取及含量测定第26页
    2.7 SDS-PAGE第26页
    2.8 Western Blot第26-29页
        2.8.1 人工合成多肽第26-27页
        2.8.2 兔多克隆抗体制备及抗体纯化第27-28页
        2.8.3 蛋白免疫印迹分析第28-29页
    2.9 类黄酮含量的测定第29页
    2.10 脯氨酸含量测定第29页
    2.11 可溶性糖、淀粉含量测定第29页
    2.12 抗氧化酶类活性测定第29-30页
    2.13 水稻幼穗MDA含量测定第30-31页
3 结果与分析第31-52页
    3.1 光周期处理对花粉育性转换的诱导第31-32页
    3.2 幼穗分化V、VI、VII期基因表达分析第32-38页
        3.2.1 RNA质量及反转录检测第32-34页
        3.2.2 幼穗分化V、VI、VII期类黄酮代谢途径相关酶基因表达分析第34-36页
        3.2.3 幼穗分化V、VI、VII期糖代谢途径相关酶基因表达分析第36-38页
    3.3 幼穗分化V、VI、VII期差异表达蛋白的Western Blot分析第38-40页
    3.4 幼穗中类黄酮含量分析第40-43页
        3.4.1 类黄酮含量分析第40-42页
        3.4.2 类黄酮代谢途径关键酶与类黄酮含量间相关性分析第42-43页
    3.5 幼穗中可溶性糖、淀粉含量分析第43-46页
        3.5.1 可溶性糖、淀粉含量分析第43-45页
        3.5.2 糖代谢途径相关酶与可溶性糖及淀粉含量关系分析第45-46页
    3.6 D52S中抗氧化物酶类活性及MDA含量分析第46-49页
    3.7 水稻幼穗中脯氨酸含量分析第49-50页
    3.8 水稻幼穗中可溶性蛋白含量分析第50-52页
4 讨论第52-58页
    4.1 类黄酮代谢途径相关酶及类黄酮含量与育性的关系第52-53页
    4.2 糖代谢途径相关酶、可溶性糖及淀粉含量与育性关系第53-54页
    4.3 抗氧化酶类活性、MDA含量及类黄酮含量关系分析第54-55页
    4.4 幼穗中脯氨酸、可溶性蛋白含量分析第55-56页
    4.5 主要结论第56-58页
论文发表第58-59页
参考文献第59-68页
附录第68-70页
致谢第70页

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