| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 草原毒害草分布及种类 | 第13-15页 |
| 1.1.1 我国草原退化现状 | 第13页 |
| 1.1.2 我国毒害草的种类及危害 | 第13-14页 |
| 1.1.3 黄花棘豆的分布及形态特征 | 第14-15页 |
| 1.2 黄花棘豆的毒性机理 | 第15-17页 |
| 1.2.1 黄花棘豆有毒成分-苦马豆素 | 第15-16页 |
| 1.2.2 苦马豆素的提取及检测 | 第16-17页 |
| 1.3 疯草中内生菌的研究 | 第17-20页 |
| 1.3.1 与苦马豆素相关的内生菌研究 | 第18页 |
| 1.3.2 内生菌的检测技术及定量方法 | 第18-19页 |
| 1.3.3 内生菌Undifilum oxytropis与苦马豆素关系的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 入侵生物学中分子标记的研究 | 第20-22页 |
| 1.4.1 入侵生物学的研究进展 | 第21页 |
| 1.4.2 入侵生物学中分子标记技术 | 第21-22页 |
| 1.4.3 分子标记在棘豆中的应用 | 第22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 我国5省黄花棘豆的遗传结构和遗传多样性研究 | 第24-55页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 黄花棘豆总DNA的提取与检测 | 第26页 |
| 2.2.2 微卫星引物的筛选和PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.3 扩增PCR体系优化实验 | 第27-29页 |
| 2.2.4 TA克隆,菌液PCR,提取质粒,测序分析 | 第29-30页 |
| 2.2.5 筛选出的引物进行群体的SDS-PAGE的验证其多态性和稳定性 | 第30页 |
| 2.2.6 筛选好的引物进行毛细管电泳检测 | 第30-31页 |
| 2.2.7 毛细管电泳的结果及数据处理方法 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-52页 |
| 2.3.1 黄花棘豆总DNA的提取与检测 | 第32-33页 |
| 2.3.2 引物的筛选和PCR扩增 | 第33-34页 |
| 2.3.3 PCR扩增体系单因素实验和正交实验 | 第34-38页 |
| 2.3.4 TA克隆,菌液PCR,质粒提取,测序 | 第38-40页 |
| 2.3.5 部分群体的SDS-PAGE验证 | 第40页 |
| 2.3.6 毛细管电泳检测 | 第40-41页 |
| 2.3.7 黄花棘豆遗传结构和遗传关系 | 第41-52页 |
| 2.4 讨论 | 第52-55页 |
| 2.4.1 基于SSR的黄花棘豆遗传多样性 | 第52-53页 |
| 2.4.2 黄花棘豆繁殖和遗传特性 | 第53-54页 |
| 2.4.3 黄花棘豆居群的居群结构和地理谱系 | 第54-55页 |
| 第三章 33个黄花棘豆居群的苦马豆素含量分析 | 第55-61页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第55页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第55页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第55页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-56页 |
| 3.2.1 标准品的制备及标准曲线的制作 | 第55-56页 |
| 3.2.2 样品中苦马豆素的提取 | 第56页 |
| 3.2.3 苦马豆素的含量测定及计算 | 第56页 |
| 3.2.4 数据处理以及差异分析 | 第56页 |
| 3.3 实验结果 | 第56-59页 |
| 3.3.1 标准曲线的制作 | 第56-57页 |
| 3.3.2 黄花棘豆的33个居群内苦马豆素含量的测定 | 第57-58页 |
| 3.3.3 黄花棘豆两大类群苦马豆素含量的差异分析 | 第58-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 黄花棘豆中内生菌定量测定 | 第61-69页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第61页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第61页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第61页 |
| 4.2 实验方法 | 第61-63页 |
| 4.2.1 检测内生菌的方法的建立 | 第61-62页 |
| 4.2.2 内生菌表达量标准曲线的制作 | 第62页 |
| 4.2.3 黄花棘豆居群内生菌的检测 | 第62页 |
| 4.2.4 对PCR产物的特异性酶切检验 | 第62页 |
| 4.2.5 黄花棘豆样品中内生菌含量的计算 | 第62页 |
| 4.2.6 内生菌含量的差异分析 | 第62-63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-67页 |
| 4.3.1 内生菌PCR方法的建立 | 第63页 |
| 4.3.2 内生菌的标准曲线的制作 | 第63-64页 |
| 4.3.3 黄花棘豆样品中内生菌含量的测定 | 第64页 |
| 4.3.4 PCR产物的特异性检验 | 第64-65页 |
| 4.3.5 黄花棘豆样品中内生菌含量的计算 | 第65-66页 |
| 4.3.6 黄花棘豆内生菌含量的差异分析 | 第66-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 探究黄花棘豆的遗传结构与苦马豆素及内生菌关系 | 第69-73页 |
| 5.1 前期工作 | 第69页 |
| 5.2 分析的软件及方法 | 第69-70页 |
| 5.2.1 苦马豆素与内生菌之间的相关性分析 | 第69页 |
| 5.2.2 遗传距离与苦马豆素、内生菌含量之间的相关性检验 | 第69页 |
| 5.2.3 构建遗传距离与苦马豆素、内生菌三者关系网络 | 第69-70页 |
| 5.3 结果 | 第70-72页 |
| 5.3.1 苦马豆素与内生菌的相关性分析 | 第70页 |
| 5.3.2 遗传距离、地理距离与苦马豆素及内生菌相关分析 | 第70-71页 |
| 5.3.3 遗传距离、地理距离、苦马豆素含量、内生菌之间的相关性 | 第71-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-73页 |
| 结论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
