| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 鱼类免疫系统 | 第10-11页 |
| 1.2 线粒体介导的抗病毒免疫 | 第11-15页 |
| 1.2.1 线粒体简介 | 第11-12页 |
| 1.2.2 抗RNA病毒的细胞固有免疫反应 | 第12-13页 |
| 1.2.3 线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS） | 第13页 |
| 1.2.4 MAVS信号复合体的激活 | 第13-14页 |
| 1.2.5 MAVS信号的负调控因子 | 第14-15页 |
| 1.3 RLR信号途径研究展望 | 第15-17页 |
| 1.4 青鱼的养殖现状及特点 | 第17-19页 |
| 第二章 青鱼MAVS的克隆及功能初探 | 第19-34页 |
| 2.1 青鱼MAVS的全长CDNA克隆 | 第19-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.1.4.1 青鱼脾脏总RNA的提取—Trizol法 | 第19-20页 |
| 2.1.4.2 合成c DNA第一条链 | 第20页 |
| 2.1.4.3 青鱼MAVS cDNA中间片段的克隆 | 第20-22页 |
| 2.1.4.4 青鱼MAVS基因 5’UTR区段克隆 | 第22-23页 |
| 2.1.4.5 青鱼MAVS基因 3’UTR区段克隆 | 第23-26页 |
| 2.2 青鱼MAVS的蛋白表达 | 第26-28页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.2 试剂 | 第26页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第26页 |
| 2.2.4 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.2.4.1 青鱼MAVS表达载体的构建 | 第26页 |
| 2.2.4.2 质粒中提 | 第26-27页 |
| 2.2.4.3 转染 | 第27-28页 |
| 2.2.4.4 Western Blot分析 | 第28页 |
| 2.2.4.5 糖基化和磷酸化分析 | 第28页 |
| 2.3 青鱼MAVS的细胞内定位 | 第28-30页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.3.2 试剂 | 第29页 |
| 2.3.3 主要仪器 | 第29页 |
| 2.3.4 实验方法 | 第29-30页 |
| 2.3.4.1 青鱼MAVS融合表达载体的构建 | 第29页 |
| 2.3.4.2 Western Blot检测融合表达载体 | 第29页 |
| 2.3.4.3 青鱼MAVS在NIH3T3细胞系中的表达定位 | 第29-30页 |
| 2.3.4.4 青鱼MAVS在EPC细胞系中的表达定位 | 第30页 |
| 2.4 青鱼MAVS的抗病毒功能研究 | 第30-34页 |
| 2.4.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.4.2 试剂 | 第30页 |
| 2.4.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2.4.4 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.4.4.1 病毒的生产和滴度测定 | 第31页 |
| 2.4.4.2 半定量RT-PCR | 第31-32页 |
| 2.4.4.3 双荧光报告实验 | 第32页 |
| 2.4.4.4 病毒感染实验 | 第32-34页 |
| 第三章 实验结果 | 第34-46页 |
| 3.1 青鱼MAVS CDNA的分子克隆 | 第34-35页 |
| 3.2 青鱼MAVS的进化研究 | 第35-37页 |
| 3.3 青鱼不同组织中的MAVS转录水平分析 | 第37-38页 |
| 3.4 青鱼MAVS蛋白表达的特点 | 第38-40页 |
| 3.5 青鱼MAVS的细胞内定位 | 第40-42页 |
| 3.6 青鱼MAVS能激活IFN转录因子 | 第42-43页 |
| 3.7 青鱼MAVS有助于EPC抵御SVCV病毒 | 第43-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
