| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 前言 | 第9-15页 |
| 1.1 5-氟尿嘧啶的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 秀丽隐杆线虫的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.1 秀丽隐杆线虫的生物学特征 | 第10页 |
| 1.2.2 秀丽隐杆线虫作为模式生物的优势 | 第10-11页 |
| 1.2.3 秀丽隐杆线虫在药物筛选方面的研究 | 第11页 |
| 1.3 胶原蛋白家族基因与信号通路 | 第11-13页 |
| 1.3.1 秀丽隐杆线虫胶原蛋白家族基因 | 第11-12页 |
| 1.3.2 秀丽隐杆线虫ECM-receptor interaction通路和Focal adhesion通路的研究 | 第12-13页 |
| 1.4 RNA干扰机制与应用 | 第13-14页 |
| 1.4.1 RNA干扰的机制 | 第13页 |
| 1.4.2 RNA干扰的应用 | 第13页 |
| 1.4.3 秀丽隐杆线虫的RNA干扰方法 | 第13-14页 |
| 1.5 本论文拟研究的问题和思路 | 第14-15页 |
| 第二章 材料和方法 | 第15-29页 |
| 2.1 实验材料、实验试剂和实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.1 线虫、菌株和质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-29页 |
| 2.2.1 秀丽隐杆线虫的培养与同步化 | 第16-18页 |
| 2.2.2 数字基因表达谱筛选 | 第18页 |
| 2.2.3 提取秀丽隐杆线虫总RNA | 第18-19页 |
| 2.2.4 总RNA反转录及基因片段的扩增 | 第19-21页 |
| 2.2.5 克隆载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.6 表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.7 dsRNA的表达 | 第25-26页 |
| 2.2.8 RNAi秀丽隐杆线虫的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.9 基因缺陷型秀丽隐杆线虫生殖情况的测定 | 第27页 |
| 2.2.10 基因缺陷型秀丽隐杆线虫寿命的测定 | 第27页 |
| 2.2.11 利用DAPI染色,观察基因缺陷型线虫形态变化 | 第27-28页 |
| 2.2.12 5-氟尿嘧啶作用基因缺陷型秀丽隐杆线虫 | 第28页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第28-29页 |
| 第三章 结果 | 第29-38页 |
| 3.1 5-氟尿嘧啶作用以后秀丽隐杆线虫数字基因表达谱的筛选结果 | 第29-30页 |
| 3.2 秀丽隐杆线虫总RNA提取结果 | 第30页 |
| 3.3 col-131、col-150、col-121和dpy-5基因片段扩增的结果 | 第30-31页 |
| 3.4 克隆载体的构建结果 | 第31-32页 |
| 3.5 表达载体的构建结果 | 第32-33页 |
| 3.6 IPTG浓度对RNAi效果的影响及col-131、col-150、col-121和dpy-5基因的RNAi结果 | 第33-34页 |
| 3.7 RNAi型线虫形态观察 | 第34-35页 |
| 3.8 RNAi型线虫产卵量的情况 | 第35-36页 |
| 3.9 RNAi型线虫存活率情况 | 第36页 |
| 3.10 RNA干扰型线虫暴露于5-氟尿嘧啶的生殖情况和基因表达的变化 | 第36-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-41页 |
| 4.1 胶原蛋白家族基因的功能分析 | 第38-39页 |
| 4.2 col-131基因功能预测 | 第39页 |
| 4.3 ECM-receptor interaction通路和Focal adhension通路的作用机制分析 | 第39-40页 |
| 4.4 5-氟尿嘧啶对秀丽隐杆线虫生殖缺陷影响的机制分析 | 第40-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 5.1 主要结论 | 第41页 |
| 5.2 研究展望 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 综述：人类胶原蛋白的研究现状 | 第47-54页 |
| 综述参考文献 | 第51-54页 |
| 在学期间的研究成果 | 第54-55页 |
| 附录一 英语缩略词汇表 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
