英汉缩略语名词对照 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第12-17页 |
实验研究 | 第17-52页 |
1. 实验材料 | 第17-23页 |
1.1 实验动物 | 第17-18页 |
1.2 实验仪器 | 第18-19页 |
1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
1.4 缓冲液配方及制备方法 | 第20-22页 |
1.5 实验耗材 | 第22-23页 |
2. 实验方法 | 第23-35页 |
2.1 鉴定小鼠基因型 | 第23-24页 |
2.1.1 鼠尾DNA的提取步骤 | 第23页 |
2.1.2 用PCR的方法鉴定基因型 | 第23-24页 |
2.2 小鼠组织学分析 | 第24-28页 |
2.2.1 小鼠腿骨样本收样 | 第24-25页 |
2.2.2 X-射线和Micro-CT扫描分析骨结构 | 第25页 |
2.2.3 石蜡包埋和骨组织切片 | 第25页 |
2.2.4 HE染色 | 第25-26页 |
2.2.5 TRAP染色 | 第26-27页 |
2.2.6 ALP碱性磷酸酶染色 | 第27页 |
2.2.7 PCNA染色 | 第27-28页 |
2.3 小鼠原代成骨细胞培养及功能检测 | 第28-30页 |
2.3.1 原代成骨细胞的培养 | 第28-29页 |
2.3.2 成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)染色 | 第29页 |
2.3.3 成骨细胞矿化检测(Von Kossa) | 第29-30页 |
2.4 成骨细胞中基因表达量的检测 | 第30-33页 |
2.4.1 RNA抽提 | 第30页 |
2.4.2 逆转录反应 | 第30页 |
2.4.3 qRT-PCR | 第30-32页 |
2.4.4 Western印迹实验 | 第32-33页 |
2.5 小鼠骨架染色 | 第33-34页 |
2.6 数据分析 | 第34-35页 |
3. 实验结果 | 第35-49页 |
3.1 C/EBPα在软骨细胞特异性敲除后对骨发育的影响 | 第35-37页 |
3.1.1 C/EBPα f/f;Col2a-cre基因敲除小鼠的表型研究 | 第35页 |
3.1.2 C/EBPα影响小鼠生长板的发育 | 第35-37页 |
3.1.3 C/EBPα影响软骨细胞的增殖 | 第37页 |
3.2 C/EBPα在成骨细胞特异性敲除后对骨发育的影响 | 第37-49页 |
3.2.1 C/EBPα f/f;Osx-cre基因敲除小鼠的基因型鉴定 | 第37-38页 |
3.2.2 C/EBPα f/f;Osx-cre基因敲除小鼠表型研究 | 第38-39页 |
3.2.3 C/EBPα f/f;Osx-cre基因敲除小鼠的骨密度降低 | 第39-40页 |
3.2.4 C/EBPα f/f;Osx-cre基因敲除小鼠的骨体积明显下降 | 第40-41页 |
3.2.5 C/EBPα f/f;Osx-cre基因敲除小鼠骨吸收能力降低 | 第41-43页 |
3.2.6 C/EBPα在成骨细胞中被有效敲除 | 第43-44页 |
3.2.7 敲除C/EBPα影响成骨细胞功能和矿化能力 | 第44-46页 |
3.2.8 敲除C/EBPα影响成骨细胞分化 | 第46-49页 |
4. 讨论和总结 | 第49-52页 |
参考文献 | 第52-63页 |
文献综述 间充质干细胞成骨分化的研究进展 | 第63-80页 |
参考文献 | 第74-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
博士期间发表论文 | 第81页 |