| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第10-12页 |
| 1.1 论文的研究背景 | 第10页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第10页 |
| 1.1.2 选题意义 | 第10页 |
| 1.2 国内外研究现状及发展趋势 | 第10-11页 |
| 1.3 研究内容 | 第11-12页 |
| 第2章 类萌芽素蛋白 | 第12-22页 |
| 2.1 萌芽素和类萌芽素蛋白 | 第12页 |
| 2.2 植物王国的分布 | 第12-15页 |
| 2.2.1 单子叶植物中的类萌芽素蛋白 | 第12-13页 |
| 2.2.2 双叶子植物中的类萌芽素蛋白 | 第13-14页 |
| 2.2.3 裸子植物中的类萌芽素蛋白 | 第14页 |
| 2.2.4 苔藓植物中的类萌芽素蛋白 | 第14-15页 |
| 2.2.5 盐生植物中的类萌芽素蛋白 | 第15页 |
| 2.3 细胞/组织水平定位 | 第15页 |
| 2.4 细胞或亚细胞定位 | 第15页 |
| 2.5 萌芽素/类萌芽素表达 | 第15-16页 |
| 2.6 结构和系统发育 | 第16-17页 |
| 2.7 功能 | 第17-20页 |
| 2.7.1 草酸氧化酶活性 | 第17-18页 |
| 2.7.2 ADP-葡萄糖焦磷酸酶/磷酸二酯酶活性 | 第18页 |
| 2.7.3 蛋白酶抑制剂活性 | 第18-19页 |
| 2.7.4 超氧化物歧化酶活性 | 第19-20页 |
| 2.8 GLPs在生物和非生物胁迫中的作用 | 第20页 |
| 2.9 本章小节 | 第20-22页 |
| 第3章 材料与方法 | 第22-30页 |
| 3.1 OsRGLP1互补DNA的准备 | 第22-23页 |
| 3.1.1 克隆OsRGLP1的cDNA | 第22页 |
| 3.1.2 制备电感受态细胞 | 第22页 |
| 3.1.3 用pTZ57R/ TOsRGLP1转化DH5α | 第22-23页 |
| 3.1.4 确认转化 | 第23页 |
| 3.1.5 通过转化测序进行确认 | 第23页 |
| 3.1.6 表达载体的分离及转化 | 第23页 |
| 3.2 结构设计 | 第23-24页 |
| 3.2.1 重组载体转化DH5α | 第24页 |
| 3.2.2 用重组载体转化农杆菌 | 第24页 |
| 3.2.3 EHA101的电穿孔 | 第24页 |
| 3.2.4 P1301上cDNA的方位 | 第24页 |
| 3.3 农杆菌介导烟草转化 | 第24-25页 |
| 3.3.1 农杆菌培养准备 | 第24页 |
| 3.3.2 叶片准备 | 第24-25页 |
| 3.3.3 共培养 | 第25页 |
| 3.4 再生转化 | 第25页 |
| 3.4.1 转化植物生根 | 第25页 |
| 3.4.2 对照植物 | 第25页 |
| 3.5 转化体的选择 | 第25-26页 |
| 3.5.1 基因组DNA提取 | 第25-26页 |
| 3.5.2 PCR扩增转基因烟草的基因组DNA | 第26页 |
| 3.5.3 转基因植物种子收集 | 第26页 |
| 3.6 转基因植株的表型 | 第26-28页 |
| 3.6.1 形态和转基因植株生长分析 | 第26页 |
| 3.6.2 T1种子的萌发率和分离分析 | 第26页 |
| 3.6.3 芽和根的长度 | 第26页 |
| 3.6.4 植物鲜重及干重 | 第26-27页 |
| 3.6.5 检测对照和转基因植物的过氧化氢 | 第27页 |
| 3.6.6 蛋白质含量 | 第27页 |
| 3.6.7 草酸氧化酶活性 | 第27页 |
| 3.6.8 超氧化物歧化酶活性 | 第27-28页 |
| 3.6.9 通过硝基四氮唑蓝（NBT）染色检测超氧化物 | 第28页 |
| 3.7 OsRGLP1启动子克隆及测序 | 第28-29页 |
| 3.7.1 OsRGLP1启动子序列分析 | 第28-29页 |
| 3.8 统计分析 | 第29页 |
| 3.9 本章小结 | 第29-30页 |
| 第4章 结果和讨论 | 第30-70页 |
| 4.1 OsRGLP1 cDNA的克隆 | 第30-33页 |
| 4.1.1 转染E. coli用pTZ57R/TOsRGLP1载体 | 第31-32页 |
| 4.1.2 通过酶切和测序确认OsRGLP1序列 | 第32-33页 |
| 4.2 重组载体制备 | 第33-39页 |
| 4.2.1 构建设计 | 第35-37页 |
| 4.2.2 转化大肠杆菌的重组载体 | 第37-38页 |
| 4.2.3 用重组载体转化农杆菌 | 第38-39页 |
| 4.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第39-42页 |
| 4.3.1 用EHA101转化烟草的叶盘 | 第39页 |
| 4.3.2 筛选和转化体再生 | 第39-40页 |
| 4.3.3 转化植物的生根 | 第40-41页 |
| 4.3.4 转基因植物种子收集 | 第41页 |
| 4.3.5 野生植株 | 第41-42页 |
| 4.4 转基因植株的确认 | 第42-43页 |
| 4.4.1 转基因植物分子水平分析 | 第43页 |
| 4.5 功能分析 | 第43-50页 |
| 4.5.1 转化体的形态和生长分析 | 第43-44页 |
| 4.5.2 转基因植物的形态 | 第44页 |
| 4.5.3 转基因种子的形态学 | 第44-45页 |
| 4.5.4 T1种子萌发率和分离分析 | 第45-47页 |
| 4.5.5 茎叶和根系的长度 | 第47-49页 |
| 4.5.6 植物鲜重与干重 | 第49-50页 |
| 4.6 检测转基因植物中H2O2 | 第50-52页 |
| 4.7 草酸氧化酶活性 | 第52-55页 |
| 4.8 超氧化物歧化酶活性 | 第55-62页 |
| 4.8.1 T0和T1烟草中的SOD活性 | 第55-57页 |
| 4.8.2 热量对SOD活性的影响 | 第57-59页 |
| 4.8.3 抑制剂对SOD活性的影响 | 第59-61页 |
| 4.8.4 通过NBT染色检测树叶中的超氧阴离子 | 第61-62页 |
| 4.9 OsRGLP1启动子的克隆和测序 | 第62-68页 |
| 4.9.1 OsRGLP1启动子序列分析 | 第63-66页 |
| 4.9.2 假定元件功能报告 | 第66-68页 |
| 4.10 本章小结 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 个人简历 | 第84页 |
