| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第7-20页 |
| 1.1 小鼠乳腺简介 | 第7-11页 |
| 1.1.1 乳腺的发育 | 第7-8页 |
| 1.1.2 乳腺干细胞 | 第8-10页 |
| 1.1.3 乳腺干细胞的分子调控机制 | 第10-11页 |
| 1.1.4 腔上皮细胞系调控基因 | 第11页 |
| 1.2 印记基因 | 第11-15页 |
| 1.2.1 印记基因对干细胞中的调控作用 | 第12-13页 |
| 1.2.2 印记基因网络 | 第13-14页 |
| 1.2.3 印记基因的进化 | 第14-15页 |
| 1.3 印记基因在发育中的调控作用 | 第15-18页 |
| 1.3.1 印记基因对胚胎发育的影响 | 第16页 |
| 1.3.2 胎盘中印记基因的功能 | 第16-17页 |
| 1.3.3 出生后印记基因对小鼠发育的影响 | 第17-18页 |
| 1.4 印记基因簇Kcnq1ot1 | 第18-20页 |
| 1.4.1 印记基因P57 | 第18-20页 |
| 第二章 材料和方法 | 第20-28页 |
| 2.1 材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第20页 |
| 2.1.2 实验用抗体及酶购买厂家 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂的配置 | 第20-21页 |
| 2.1.4 载体图谱 | 第21-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第23页 |
| 2.2.2 相关载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.3 慢病毒的包装感染及敲除效率检测 | 第25页 |
| 2.2.4 western blot蛋白检测试验 | 第25-26页 |
| 2.2.5 细胞增殖MTS检测实验 | 第26页 |
| 2.2.6 细胞周期测定——PI染色法 | 第26-27页 |
| 2.2.7 石蜡包埋与免疫荧光 | 第27页 |
| 2.2.8 克隆形成实验 | 第27页 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光实验 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果 | 第28-39页 |
| 3.1 P57在小鼠乳腺中的表达状况 | 第28-29页 |
| 3.1.1 P57在乳腺发育不同时期的表达水平检测 | 第28页 |
| 3.1.2 P57在小鼠乳腺组织及HC11细胞中的免疫荧光染色 | 第28-29页 |
| 3.2 P57在小鼠乳腺上皮细胞中的敲除模型 | 第29-32页 |
| 3.2.1 P57敲除效率的检测及细胞增殖MTS实验 | 第29-30页 |
| 3.2.2 P57敲除影响细胞周期 | 第30-31页 |
| 3.2.3 细胞周期相关蛋白表达检测 | 第31-32页 |
| 3.3 P57敲除对小鼠乳腺原代上皮细胞的干性影响 | 第32-36页 |
| 3.3.1 克隆形成实验 | 第32-33页 |
| 3.3.2 干细胞相关基因表达水平RT检测 | 第33-34页 |
| 3.3.3 HC11诱导形成dome实验 | 第34-36页 |
| 3.4 P57上游调控模型 | 第36-39页 |
| 3.4.1 Kcnq1ot1调控P57表达 | 第36-37页 |
| 3.4.2 Suz12影响印记基因表达模型 | 第37页 |
| 3.4.3 P57敲除对印记基因网络的影响 | 第37-39页 |
| 第四章 讨论 | 第39-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
