| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 1.文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 小麦黄花叶病 | 第10-13页 |
| 1.1.1 小麦黄花叶病毒传播介体 | 第11页 |
| 1.1.2 检测技术 | 第11-12页 |
| 1.1.3 我国小麦黄花叶病的发生发展 | 第12页 |
| 1.1.4 小麦黄花叶病的防控 | 第12-13页 |
| 1.2 小麦黄花叶病毒的分子生物学特性 | 第13-15页 |
| 1.2.1 病毒非编码区的功能 | 第14页 |
| 1.2.2 病毒编码蛋白的功能 | 第14-15页 |
| 1.2.3 病毒外壳蛋白和病毒致病力之间的关系 | 第15页 |
| 1.3 酵母双杂交技术研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 酵母双杂交基本原理 | 第15-16页 |
| 1.3.2 利用酵母双杂交技术研究病毒与寄主蛋白间的互作 | 第16-18页 |
| 2.引言 | 第18-19页 |
| 3.材料和方法 | 第19-31页 |
| 3.1 菌株及载体 | 第19页 |
| 3.2 主要试剂 | 第19页 |
| 3.3 主要仪器 | 第19页 |
| 3.4 引物 | 第19-20页 |
| 3.5 供试小麦品种和试验田块 | 第20页 |
| 3.6 小麦酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第20-26页 |
| 3.6.1 植物总RNA的提取 | 第20页 |
| 3.6.2 mRNA的分离 | 第20-21页 |
| 3.6.3 cDNA第一条链的合成 | 第21-22页 |
| 3.6.4 初级cDNA文库的构建和质量检验 | 第22-24页 |
| 3.6.5 酵母双杂交文库的构建和质量检验 | 第24-25页 |
| 3.6.6 酵母文库制备 | 第25-26页 |
| 3.7 小麦黄花叶病毒CP诱饵载体的构建 | 第26-29页 |
| 3.7.1 使用快速反转录试剂盒合成第一链cDNA | 第26页 |
| 3.7.2 WYMV-CP基因的PCR扩增 | 第26页 |
| 3.7.3 WYMV-CP基因的PCR产物切胶回收 | 第26-27页 |
| 3.7.4 WYMV-CP基因连接T载体 | 第27页 |
| 3.7.5 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第27-28页 |
| 3.7.6 碱裂解法提取质粒 | 第28页 |
| 3.7.7 诱饵质粒对酵母毒性及自激活活性的检测 | 第28页 |
| 3.7.9 酵母蛋白的提取 | 第28-29页 |
| 3.7.10 酵母表达蛋白的检测 | 第29页 |
| 3.8 酵母双杂交筛选与小麦黄花叶病毒CP互作的寄主因子 | 第29-30页 |
| 3.8.1 酵母有性杂交及阳性克隆的筛选 | 第29页 |
| 3.8.2 阳性克隆酵母质粒的提取 | 第29-30页 |
| 3.8.3 阳性克隆质粒的分离及测序 | 第30页 |
| 3.9 田间试验设计 | 第30页 |
| 3.10 调查和评价方法 | 第30-31页 |
| 4.结果与分析 | 第31-44页 |
| 4.1 小麦总RNA提取及mRNA分离质量 | 第31-32页 |
| 4.2 小麦酵母双杂交cDNA文库的构建及质量检测 | 第32-34页 |
| 4.2.1 初级文库 | 第32-33页 |
| 4.2.2 次级文库 | 第33-34页 |
| 4.3 小麦黄花叶病毒CP诱饵载体的构建及真核表达 | 第34-36页 |
| 4.3.1 小麦黄花叶病毒CP诱饵质粒的构建 | 第34-35页 |
| 4.3.2 诱饵载体的真核表达 | 第35-36页 |
| 4.4 筛选与小麦黄花叶病毒CP互作的寄主因子 | 第36-37页 |
| 4.5 小麦品种对小麦黄花叶病的抗性鉴定 | 第37-44页 |
| 5.结论与讨论 | 第44-46页 |
| 5.1 小麦酵母双杂交cDNA文库及小麦黄花叶病毒CP诱饵载体的构建 | 第44页 |
| 5.2 与WYMV-CP互作寄主因子的筛选 | 第44-45页 |
| 5.3 小麦品种对小麦黄花叶病毒的抗性鉴定 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-57页 |
| ABSTRACT | 第57-58页 |
