| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 抗菌肽研究概述 | 第9页 |
| 1.2 抗菌肽的来源 | 第9-10页 |
| 1.2.1 来源于微生物的抗菌肽 | 第9页 |
| 1.2.2 来源于动物的抗菌肽 | 第9页 |
| 1.2.3 来源于植物的抗菌肽 | 第9-10页 |
| 1.3 抗菌肽的结构 | 第10页 |
| 1.3.1 抗菌肽的一级结构 | 第10页 |
| 1.3.2 抗菌肽的二级结构 | 第10页 |
| 1.3.3 抗菌肽的三级结构 | 第10页 |
| 1.4 抗菌肽的抑菌机制 | 第10-11页 |
| 1.5 抗菌肽的应用 | 第11-12页 |
| 1.5.1 在临床医学的应用 | 第11页 |
| 1.5.2 在食品工业的应用 | 第11-12页 |
| 1.5.3 在禽畜、水产养殖业的应用 | 第12页 |
| 1.6 基因工程法生产抗菌肽 | 第12-14页 |
| 1.6.1 大肠杆菌表达体系 | 第12-13页 |
| 1.6.2 巴斯德毕赤酵母表达体系 | 第13-14页 |
| 1.7 调控抗菌肽活性的因素 | 第14-16页 |
| 1.7.1 正电荷 | 第14-15页 |
| 1.7.2 疏水性 | 第15页 |
| 1.7.3 螺旋度 | 第15-16页 |
| 1.7.4 两亲性 | 第16页 |
| 1.7.5 特殊氨基酸 | 第16页 |
| 1.8 抗菌肽Hydramacin-1介绍 | 第16-18页 |
| 1.9 本课题目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 材料 | 第19-25页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要培养基的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 Hydramacin-1的重组表达、纯化、抑菌活性研究 | 第25-32页 |
| 2.2.2 Hydramacin-1活性调控研究 | 第32-36页 |
| 3. 结果与讨论 | 第36-53页 |
| 3.1 Hydramacin-1的重组表达、纯化、抑菌活性研究 | 第36-44页 |
| 3.1.1 Hydramacin-1重组表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.1.2 Hydramacin-1重组表达载体的验证 | 第37-38页 |
| 3.1.3 Hydramacin-1重组表达载体转入毕赤酵母 | 第38-39页 |
| 3.1.4 Hydramacin-1阳性转化子验证结果 | 第39-40页 |
| 3.1.5 Hydramacin-1重组酵母子的诱导表达结果 | 第40页 |
| 3.1.6 发酵时间和甲醇浓度对蛋白表达的影响 | 第40-43页 |
| 3.1.7 Hydramacin-1目的蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| 3.1.8 Hydramacin-1纯品的抑菌活力测定 | 第44页 |
| 3.2 Hydramacin-1活性调控研究 | 第44-53页 |
| 3.2.1 突变体与野生型理化性质比较 | 第44-45页 |
| 3.2.2 定点突变PCR结果 | 第45-46页 |
| 3.2.3 突变体质粒测序验证 | 第46-48页 |
| 3.2.4 突变体质粒线性化结果 | 第48-49页 |
| 3.2.5 突变体酵母子的诱导表达 | 第49-50页 |
| 3.2.6 突变体与野生型抑菌活力比较 | 第50-53页 |
| 4 结论 | 第53-54页 |
| 5 展望 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-60页 |
| 7 硕士期间发表论文情况 | 第60-61页 |
| 8 致谢 | 第61页 |
