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中药臭灵丹抗流感病毒活性成分分离及其药效机制研究

摘要第3-6页
Abstract第6-9页
引言第13-17页
第一章 文献综述第17-38页
    1.1 流感病毒概况第17-19页
        1.1.1 流感病毒病原学与分类第17页
        1.1.2 流感病毒复制周期第17-19页
    1.2 抗流感病毒化学药物研究进展第19-25页
        1.2.1 靶向流感病毒相关蛋白或结构第19-24页
        1.2.2 靶向流感病毒感染相关宿主细胞信号通路第24-25页
    1.3 中医对流感认识及治则第25-26页
    1.4 抗流感病毒中药研究现状第26-30页
        1.4.1 抗病毒中药复方第26-27页
        1.4.2 抗流感病毒中药成分研究第27-30页
    1.5 臭灵丹化学成分分离及药理活性研究进展第30-38页
        1.5.1 臭灵丹化学成分研究第30-31页
        1.5.2 臭灵丹药理活性研究第31-36页
        1.5.3 臭灵丹的临床研究第36-38页
第二章 臭灵丹乙醇提取物分离制备及其体内、外抗甲1型流感病毒药效研究第38-45页
    2.1 实验材料第38-39页
        2.1.1 细胞与病毒株第38页
        2.1.2 药物及动物第38页
        2.1.3 实验试剂第38页
        2.1.4 仪器设备第38-39页
    2.2 实验方法第39-41页
        2.2.1 细胞复苏与传代第39页
        2.2.2 臭灵丹乙醇提取物的分离制备第39页
        2.2.3 臭灵丹乙醇提取物对细胞毒性试验(MTT法)第39-40页
        2.2.4 臭灵丹乙醇提取物体外抗流感病毒作用第40页
        2.2.5 臭灵丹乙醇提取物小鼠体内抑制甲1型流感病毒FM1株作用第40-41页
    2.3 实验结果第41-44页
        2.3.1 臭灵丹乙醇提取物对细胞毒性作用第41页
        2.3.2 臭灵丹乙醇提取物体外对甲1型流感病毒PR8株的抑制作用第41页
        2.3.3 臭灵丹乙醇提取物体内对甲1型流感病毒感染小鼠体重变化影响第41-42页
        2.3.4 臭灵丹乙醇提取物体内对甲1型流感病毒感染小鼠肺指数变化影响第42页
        2.3.5 臭灵丹乙醇提取物体内对甲1型流感病毒感染小鼠肺组织病理改善第42-44页
    2.4 小结与讨论第44-45页
第三章 臭灵丹醇提物中抗流感病毒活性组分分离及其成分分析、药效机制研究.第45-61页
    3.1 实验材料第45-47页
        3.1.1 细胞株与病毒第45页
        3.1.2 实验试剂第45-46页
        3.1.3 仪器设备第46-47页
    3.2 实验方法第47-51页
        3.2.1 臭灵丹醇提物中不同组分的分离提取第47页
        3.2.2 臭灵丹醇提物中不同分离组分的抗流感病毒药效第47-48页
        3.2.3 活性组分C8抗流感病毒谱筛选第48页
        3.2.4 利用HEK293细胞(稳转pNF-κB-Luc质粒)检测活性组分C8对A549细胞NF-κB通路抑制作用第48页
        3.2.5 利用蛋白免疫印迹技术(western-blot)检测活性组分C8对A549细胞NF-κB信号通路相关蛋白磷酸化的抑制作用第48-50页
        3.2.6 UHPLC-MS分析活性组分C8的化学成分组成第50-51页
    3.3 实验结果第51-59页
        3.3.1 臭灵丹醇提物中不同组分分离第51-52页
        3.3.2 臭灵丹醇提物中不同组分(C5-C10)的抗流感病毒药效第52页
        3.3.3 活性组分C8抗流感病毒谱筛选结果第52页
        3.3.4 活性组分C8对宿主细胞NF-κB信号通路抑制作用第52-53页
        3.3.5 活性组分C8的化学成分分析第53-59页
    3.4 小结与讨论第59-61页
第四章 臭灵丹化学成分分析、倍半萜类成分分离及其抗流感病毒药效机制研究第61-91页
    4.1 实验材料第61-62页
        4.1.1 细胞株与病毒第61页
        4.1.2 实验试剂第61-62页
        4.1.3 仪器设备第62页
    4.2 实验方法第62-69页
        4.2.1 臭灵丹化学成分UHPLC-QTOF MS分析第62-65页
        4.2.2 臭灵丹MCI柱层析不同部位的分析第65页
        4.2.3 臭灵丹草MCI不同部位固体物重量第65页
        4.2.4 不同部位的抗流感病毒药效筛选第65页
        4.2.5 组分Fr14的抗流感病毒时相实验第65-66页
        4.2.6 利用RT-PCR技术检测组分Fr14对流感病毒诱导的细胞因子及趋化因子mRNA表达水平影响第66-67页
        4.2.7 利用bio-plex悬浮芯片技术检测组分Fr14对流感病毒诱导的细胞因子含量(蛋白水平)影响第67-68页
        4.2.8 利用蛋白免疫印迹(western-blot)技术检测组分Fr14对流感病毒感染宿主细胞信号通路影响第68页
        4.2.9 运用SPSS 18.0软件作统计学分析第68-69页
    4.3 实验结果第69-88页
        4.3.1 臭灵丹化学成分的指认第69-77页
        4.3.2 臭灵丹MCI柱层析不同部位的分析第77-79页
        4.3.3 臭灵丹MCI不同部位固体物重量第79-80页
        4.3.4 臭灵丹分离得到的23个组分体外抗流感病毒药效筛选第80-81页
        4.3.5 臭灵丹分离组分Fr 14和Fr 16的抗流感病毒谱筛选第81-82页
        4.3.6 臭灵丹分离组分Fr14的抗流感病毒作用时相第82页
        4.3.7 组分Fr14对流感病毒诱导的细胞因子mRNA水平表达影响第82-86页
        4.3.8 组分Fr 14对流感病毒诱导的细胞因子蛋白水平表达影响第86-87页
        4.3.9 组分Fr 14对流感病毒感染相关宿主细胞信号通路影响第87-88页
    4.4 小结与讨论第88-91页
结语第91-93页
参考文献第93-107页
附录第107-110页
在校期间发表论文情况第110-111页
致谢第111-112页
附件第112-113页
详细摘要第113-125页

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