摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
1. 前言 | 第10-18页 |
1.1 昆虫的先天性免疫 | 第10-11页 |
1.1.1 细胞免疫 | 第10页 |
1.1.2 体液免疫 | 第10-11页 |
1.2 Growth-blocking pepide简介 | 第11-14页 |
1.2.1 ENF肽家族 | 第11-13页 |
1.2.2 GBP介导细胞免疫和体液免疫的转换 | 第13-14页 |
1.3 GBP-binding protein的发现 | 第14-15页 |
1.4 20E的研究进展 | 第15-16页 |
1.4.1 20E调控昆虫的变态发育 | 第15页 |
1.4.2 20E调控昆虫的先天性免疫 | 第15-16页 |
1.5 研究背景及意义 | 第16-18页 |
2. 材料与方法 | 第18-29页 |
2.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 实验棉铃虫 | 第18页 |
2.1.2 实验仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.3 实验试剂药品 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-29页 |
2.2.1 HaGBP和HaGBPB基因全长序列分析 | 第20页 |
2.2.2 棉铃虫各组织RNA的提取 | 第20页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
2.2.4 cDNA的检测 | 第21页 |
2.2.5 HaGBPB1基因的克隆表达及纯化 | 第21-24页 |
2.2.6 荧光定量分析HaGBP和HaGBPB基因的表达量 | 第24-25页 |
2.2.7 RNA干扰 | 第25-27页 |
2.2.8 Western-blot检测 | 第27页 |
2.2.9 HaGBP对浆细胞的促延展实验 | 第27-28页 |
2.2.10 HaGBPB蛋白定位分析 | 第28-29页 |
3. 结果与分析 | 第29-41页 |
3.1 棉铃虫HaGBP和HaGBPB基因的序列分析 | 第29-30页 |
3.1.1 HaGBP基因的序列分析 | 第29页 |
3.1.2 HaGBPB基因的序列分析 | 第29-30页 |
3.2 HaGBPB1基因的原核重组表达、蛋白纯化及抗体制备 | 第30-32页 |
3.2.1 pET-32a-HaGBPB1重组表达质粒的构建 | 第30-31页 |
3.2.2 rHaGBPB1重组蛋白的表达与纯化 | 第31-32页 |
3.2.3 anti-HaGBPB1 antiserum的特异性分析 | 第32页 |
3.3 HaGBP和HaGBPB的表达模式分析 | 第32-38页 |
3.3.1 HaGBP、HaGBPB组织特异表达分析 | 第32-34页 |
3.3.2 HaGBP、HaGBPB在不同发育阶段中的表达分析 | 第34-35页 |
3.3.3 注射20E对HaGBP、HaGBPB表达的影响 | 第35-36页 |
3.3.4 敲降20E受体EcR/Usp的表达对HaGBP、HaGBPB表达的影响 | 第36-37页 |
3.3.5 注射Beads对HaGBP、HaGBPB表达的影响 | 第37-38页 |
3.4 HaGBPB1抑制HaGBP对浆细胞的促延展作用 | 第38-39页 |
3.5 HaGBPB在血细胞中的定位 | 第39-41页 |
4. 讨论 | 第41-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
硕士期间论文发表情况 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |